負壓除菌過濾系統

A. 請問制備培養基時如何過濾除菌

1、滅菌方法
培養基的滅菌方法主要有兩種，高壓除菌及.22um微孔濾膜過濾除菌。與過濾相比，高壓滅菌的工作強度小，成本較低，但易造成營養成分的流失，而且在多次加樣（無菌谷氨醯胺溶液，無菌碳酸氫鈉溶液等）過程中容易造成二次污染。大多數培養基採用0.1～0.2μm孔徑的微孔濾膜進行過濾滅菌，並且已成為培養基除菌的發展方向，它可低限度地減少培養基的營養損失。
1.1 高壓滅菌

某些培養基（如MEM）可進行高壓滅菌，例如清大天一的MEM培養基中的MD605、MD609等。這類培養基一般不含有L-谷氨醯胺和碳酸氫鈉，一般是在培養基高壓滅菌後加入L-谷氨醯胺和碳酸氫鈉的無菌的液體。另外可高壓的谷氨酸鹽（如L-丙氨醯-L-谷氨醯胺）可代替L-谷氨醯胺。
可高壓滅菌的培養基在121℃、15psi，15分鍾的條件下完全可達到滅菌效果及營養成分的最小損失，不需將滅菌時間延長。為保證高壓滅菌的效果，滅菌設備的驗證很關鍵。
1.2 過濾滅菌
可供過濾滅菌使用的濾膜很多，其材料多為polyethersulphone（PES）、尼龍、多聚碳酸鹽、醋酸纖維素、硝酸纖維素、PTFE、陶瓷等。一般情況下採取正壓過濾，正壓過濾較之負壓過濾具有流速高、過濾快、不易污染，可避免蛋白質產生大量氣泡等優點。一般使用過濾器可參照各供應商的產品說明書。
目前大多數實驗室和制葯企業採用微孔濾膜濾器（如Zeiss濾器）或立式微孔濾器（Millipore、Pall）除菌。微孔濾膜濾器為不銹鋼，中間可夾放0.22um濾膜。使用這種濾器最重要步驟是安裝濾膜及無菌過濾過程。如在使用Zeiss濾器時，先要用培養用水將濾膜充分潤濕，在安裝濾膜時可在其上放置一層定性濾紙再固定。消毒時旋鈕不要扭太緊，凡與空氣接觸部位都要包好（可用牛皮紙、紗布、無紡布等）；高壓滅菌後，在無菌環境中立即將旋鈕扭緊。過濾除菌結束後，要打開濾器，檢查濾膜是否完整，如果濾膜破裂，需重新進行過濾除菌過程。立式微孔濾器可以選用不同的微孔濾柱體積，因為濾膜的折疊，膜面積顯著增大，液體處理量大，而且不容易發生堵塞現象。

B. 過濾除菌法的原理

過濾除菌的原理有慣性撞擊截留作用、攔截截留作用、布朗擴散截留作用等。 當空氣通過過濾層時，直徑很小的微粒在緩慢流動的氣流中，會有明顯的布朗運動，促使微粒和纖維接觸和被捕集。這種作用在較大的氣速、較大的纖維間隙中不起作用，因為此時布朗運動不明顯。

C. 除菌過濾器的除菌過濾器的特點

（1）除菌過濾器一般採用十字懸掛式，水平進出。多芯過濾器可設計成落地內式。
（2）有些使用容場合根據實際需要分成預過濾器、精過濾器兩種。
（3）空氣流向：從外向內穿過濾芯。
（4）進入除菌過濾器的壓縮空氣必須先經過至少三級的精密過濾器及乾燥機。除油、除水、除塵，油霧濃度應≤0.01PPM，否則將影響除菌濾芯的壽命，達不到預期的除菌效果。
（5）定期殺菌，根據實際使用情況每周或每月1~2次，每次30分鍾，採用經過1μ過濾精度的潔凈飽和蒸汽殺菌。蒸汽溫度<140℃，蒸汽壓力<0.3MPa。閥門緩慢開關。
（6）作為罐體、設備的呼吸器使用時，其作用主要在於連通大氣防止設備內部負壓和隔離開空氣中的污染源，過濾方面的功能不大，因此在過濾上基本無要求。

D. 負壓救護車原理 負壓救護車消毒流程

負壓救護車原理：負壓救護車是在監護型救護車基礎上加裝負壓設備而成，其運作原理基於壓強差。確保外界氣壓高於車廂內氣壓，使新鮮空氣能夠進入車廂，同時車廂內被患者或疑似患者污染的空氣或氣溶膠不會隨意外泄。車內裝有負壓裝置，能對污染空氣進行消毒過濾後，定向排出車廂，從而減少外界空氣污染的機會，避免救護車成為流動污染源。

負壓救護車消毒流程：1. 表面消毒：消毒人員首先使用氣溶膠噴霧對救護車表面進行消毒。出診人員需打開用過的出診箱，帶離醫療垃圾，並開啟紫外線燈後方可下車進入污染區。隨後，消毒人員對出診人員經過的區域進行噴霧消毒。2. 紫外線燈照射與通風：紫外線燈照射30分鍾後，打開車門進行通風。3. 醫療艙消毒：對醫療艙空間、表面、地面進行消毒，採用2%過氧乙酸溶液、3%過氧化氫溶液或有效氯濃度2000mg/L含氯消毒劑溶液，通過氣溶膠噴霧方式聯合消毒。消毒順序為先表面後空間，從外向里進行。4. 密閉與再次通風：噴霧完畢後，密閉5分鍾再打開車窗、車門進行通風。5. 過濾除菌系統維護：負壓救護車過濾除菌系統的濾器或濾材應定期由專業人員清洗消毒並檢修更換。清洗消毒可用有效氯濃度5000mg/L的含氯消毒劑溶液浸泡或直接噴灑，作用60分鍾後清洗。廢棄的過濾器或濾材需密封後焚燒處理。6. 車內物品表面消毒：車內物品表面的消毒方法多樣，包括使用2000mg/L～5000mg/L過氧乙酸溶液、有效氯濃度1000mg/L～2000mg/L的含氯消毒劑溶液或75%酒精擦拭或浸泡消毒。30分鍾後，對易腐蝕物品進行清水清洗或擦拭。

E. 關於實驗室抽慮除菌的操作

問：最近要做一些培養基，有一些糖類需要過濾除菌，但不知道怎麼操作，還需要什麼輔助設備？
答：你只要有濾膜和配套的過濾器就可以了，一般在超凈工作台上進行。濾膜用0.22微米或0.45微米兩種規格，指的是濾膜的孔徑大小吧。一般0.22就夠了！
答：如果溶液的量比較大，超過500ml，可以採用已滅菌的抽濾瓶，預先墊好0.22um 的濾膜。抽濾瓶滅菌前要檢查封口用紗布或棉花堵牢，使用時，不用在無菌室中進行，只要保證收集瓶無菌狀態就可以。抽濾後，過濾好的溶液在無菌條件下倒進已滅菌的空試劑瓶中。
如果用小量的溶液過濾，無菌室內用一次性注射器和一次性0.22um濾膜（millipore或pall都有賣）就可以。
答：看過濾的量，如果量小，用注射器加濾器、0.22微米濾膜過濾，濾器加上濾膜後蓋緊，稍旋松，飯盒密封100度蒸餾水煮沸30分鍾滅菌，用來承接無菌糖水的瓶需高壓。用時在無菌操作台上操作，並先旋緊濾器，注意濾器外流下去的哪怕一滴也會造成染菌；過濾應該是費力的，如果感覺很輕松，則濾膜已破。0.45微米的濾膜一般用於兩次過濾的第一次，以防止0.22堵塞。注射器，若能高壓更好些。
如果量大，正壓可用蠕動泵接皮管接不銹鋼濾器大張濾膜，這些都是要高壓的。負壓可用抽濾。

F. 實驗室常用的滅菌方法有哪些

高溫滅菌，噴灑滅菌葯物滅菌，紫外線燈滅菌。如有幫助請採納，手機則點擊右上角的滿意，謝謝！！