液相色譜流動過濾膜

1. 高效液相色流動相過濾必須使用什麼粒徑的過濾膜

0.45μm。
根據道客巴巴資料，高效液相色流動手卜悔相過畢正濾必弊兆須使用0.45μm粒徑的過濾膜。為了改變色譜柱的選擇性，可以改變固定相和流動相的種類。
過濾膜全稱微孔過濾膜，應用於原料葯、葯用溶劑、注射用水、針劑，包括混合纖維微孔濾膜等種類。

2. 高效液相色譜，流動相抽濾時，什麼時候用有機系濾膜，什麼時候用水系濾膜

過市場出售的水系膜是混合纖維素濾膜或者醋酸纖維素濾膜,
有機系濾膜一般是PVDF(聚偏氟乙烯濾膜)和PTFE(聚四氟乙烯濾膜).
用有機系濾膜是可以濾不含有機相的水或鹽溶液的，只是速度較慢，還是建議水膜過濾。當然有機系濾膜也可以過濾水和有機相混合的流動相。
但是纖維素濾膜是會被有機相溶解的，有機相比例高的時候你會發現膜被溶解。有機相比例低的時候你看不到溶解，但是也不證明膜沒有損失，這些損失導致的後果就是流動相被溶解的膜污染以及膜孔的擴大導致的過濾效果變差。
不要為了有機系和水系濾膜的差價而放棄試驗的嚴謹性。
我的結論就是：含有有機相的流動相，即便比例低也不要用水膜過濾。除非你買特殊材質的混合濾膜，說明書上說明都可以過濾的就行。
也別再追求什麼比例了，那些都是自欺欺人，既然叫做水膜，就不能用於有機相。

3. 高效液相色譜法流動相為什麼要用過濾膜過濾

樓上正解。但不光是堵塞柱子，如果有不容顆粒在流動相中，也會對泵進行磨損。

4. 高效液相色譜儀操作流程

高效液相色譜儀操作流程為開機、超聲、排氣、走基線。

1、開機前先將流動相過濾和超聲：水流動相用混合濾膜（0.2μm）過濾，有機流動相用有機濾膜過濾，之後超聲脫氣15-20分鍾。（過濾的目的是除去流動相里的雜質，以免雜質進入色譜柱堵塞色譜柱；超聲的目的是排除流動相裡面的氣體，以防氣體進入色譜柱損害色譜柱，影響柱效能）

注意：試驗過程中由於只有0.45μm的混合濾膜，第一次使用時感覺效果不好，於是過濾水時同時使用兩張混合濾膜過濾水流動相。

數據分析：

色譜得到的原始數據為色譜圖，我們需要對途中的色譜峰進行積分，獲得峰面積，並根據實驗需要，使用不同的方法進行定量計算，比如外標法，內標法，面積百分比法等。

儀器還可以得到光譜或者質譜信息，我們可以通過色譜柱數據軟體的對應功能得到光譜圖及質譜圖，獲得定性信息。

獲得所需信息後，可以利用色譜軟體將結果輸出成不同格式的報告，或將處理好的結果導入其他軟體（如統計分析）進行二次處理。

5. 為什麼液相色譜實驗中流動相和待測樣品都需要過濾

因為要過濾掉流動相和待測樣品裡面的不溶性物質和氣泡。防止它們堵住儀器。

很多東專西不是你看著澄清就真屬的干凈。液相的管路很細，還有色譜柱的孔徑也很小，萬一堵住了就報廢了。所以一定要過濾。
流動相不單要過濾掉不溶物，還有就是氣泡。這些氣泡可能會堵住泵頭，堵住色譜柱，就算哪兒都不會堵上也會導致流速不準確，柱壓不穩定，基線波動等等。所以一定要過濾。

你的色譜柱是5um粒徑的，用4.5um孔徑濾膜就可以了。如果色譜柱粒徑更小，那麼也應該選擇孔徑更小的濾膜。

另外，如果你的流動相和待測樣品是純的色譜純有機相，其實就沒必要過濾了。

6. 為什麼用於液相色譜的流動相和樣品溶液必須用孔徑至少0.45μm的濾膜過濾

防止顆粒進入液相系統。因為顆粒會磨損設備元件和堵塞液相管道。