㈠ 微生物薄膜過濾法，夾膜技巧
（1）驗證試驗方法：試驗原理同前述薄膜過濾法。驗證供試品對薄膜過濾法有抑細菌和抑真菌特性時，與實際的無菌檢查相同，在同一型號的每個過濾器或過濾筒內過濾規定定量的供試品（容器數及每容器的過濾體積），用淋洗液淋洗濾膜至少3次，每次淋洗液體積為100ml，在最後一次淋洗液中，接入驗證用菌種（接種量為10—100CFU）；另取一過濾器或濾筒，不過濾供試品，重復以上淋洗操作，作為陽性對照。根據具體情況，可將整張濾膜或半張濾膜轉移至100ml的指定驗證用培養基內，或將培養基加入到裝有濾膜的濾筒內。分別對表中所列菌種及相應的培養基逐一進行驗證，並將容器置於適當的溫度下培養，培養時間不超過14d。如果使用新的濾膜或濾過器（包括不同廠家或批號、型號），則要按上述薄膜過濾法的要求做 , 組試驗，即樣品試驗組、蛋白腖對照組和陽性對照組重新進行驗證確認。
（2）驗證結果評價：如果供試品培養基容器內的培養基內明顯可見微生物生長（混濁），並且與陽性對照容器內的培養結果相似，則在無菌檢查試驗中必須要過濾與驗證試驗相等量的供試品、淋洗液，淋洗相同次數及使用同量的培養基。如果與陽性對照容器內的培養結果相比，供試品容器內微生物生長現象不明顯，則說明該檢驗量在此檢驗條件下有抑菌作用。應增加淋洗次數，重復以上實驗。也可通過更換過濾膜並使用中和劑來消除產品的抑菌作用。USP規定，如果已淋洗了5次，並且每次淋洗液體積達到500ml，仍無法中和膜上的殘余抑菌性物質，那麼在無菌檢查試驗中就採用此淋洗次數與淋洗量作為最終淋洗方法。
㈡ 純化水微生物限度中用薄膜過濾法檢測是不是必須用稀釋液即稀釋液-氯化鈉蛋白腖緩沖液。
是的。我們實驗過程中用PH7.0氯化鈉蛋白腖緩沖溶液做稀釋劑的，也可以用生理鹽水做版稀釋劑。在實驗過程中每權張過濾膜不可超過1000ml的稀釋劑沖洗量。將純水倒入薄膜過濾後，在放入培養皿里之前，還需要加緩沖液沖洗薄膜，沖洗量可以每張膜控制在100-200ml。然後用無菌鑷子取出過濾膜，貼於培養基上，去除氣泡。
㈢ 微生物限度檢查中用膜過濾法時，是把濾膜上有菌液的那面貼到培養基上，還把反面貼到培養基
微生物限度的方法有多種。如果是用膜過濾法的話，就你提到的問題，可以查詢2010版的《中國葯典》附錄，裡面有提到。應該是把濾膜接觸到供試液的那面貼於培養基上。
㈣ 復方氨酚烷胺片的微生物限度檢查採用薄膜過濾法如何操作可以順利濾過
1. 設備、儀器
1.1 無菌室 微生物限度檢查應有單獨的無菌室，每個無菌室應有獨立的凈化空氣系統。
1.1.1 操作間 操作間應安裝空氣除菌過濾層流裝置。環境潔凈度不應低於10000級，局部潔凈度為100級（或放置同等級凈化工作台）。操作間或凈化工作台的潔凈空氣應保持對環境形成正壓，不低於4.9Pa。操作台上備有電子天平，乙醇燈，火柴，乙醇棉球，大、小橡皮乳頭等。
1.1.2 緩沖間 緩沖間內應有洗手盆，無菌衣、帽、口罩、拖鞋等。緩沖間內不得放置培養箱和其他雜物。
1.1.3 在每次操作前、後，用75%乙醇溶液或其他消毒液擦拭操作台及可能污染的死角。然後啟動層流凈化裝置，同時用紫外殺菌燈照射30min。
1.1.4 無菌室操作台消毒擦拭後，先啟動層流凈化裝置30min，將備妥的營養瓊脂平板3個（經30～350C預培養48h，證明無菌落生長），以無菌方式移入操作間，置凈化台左、中、右各1個，開蓋，暴露30min後將蓋蓋上。在30～350C培養箱內倒置培養48h，取出檢查。3個平板生長的平均菌落數不超過1個。
1.2 儀器
1.2.1 恆溫培養箱（30～350C）、生化培養箱（23～280C）、電冰箱、蒸汽滅菌器。
1.2.2 玻璃器皿 燒杯、培養皿、量筒、試管及塞、吸管。玻璃器皿用前應洗滌干凈，吸管、量筒不掛水滴，無殘留抗菌物質。玻璃器皿均應用牛皮紙（或雙層報紙）嚴密包裹置蒸汽滅菌器高壓蒸汽121℃滅菌30min，烘乾。或於160℃乾熱滅菌2h，備用。
2 培養基及其制備方法
2.1 營養瓊脂培養基：取營養瓊脂培養基34g，加1000ml蒸餾水，加熱溶解，分裝，121℃高壓滅菌15分鍾。
2.2 玫瑰紅鈉瓊脂培養基：取玫瑰紅鈉瓊脂培養基30.5g，加1000ml蒸餾水，加熱溶解，分裝，121℃高壓滅菌15分鍾。
2.3 膽鹽乳糖培養基：取膽鹽乳糖培養基36g，加1000ml蒸餾水，加熱溶解，分裝，121℃高壓滅菌15分鍾。
3 稀釋劑
3.1 0.9%無菌氯化鈉溶液：取氯化鈉9.0g，加水溶解使成1000ml，121℃滅菌20分鍾。
3.2 PH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液：取磷酸二氫鉀3.56g，磷酸氫二鈉7.23g，氯化鈉4.30g，蛋白腖1.0g，加水1000ml，微溫溶解，分裝，過濾，滅菌。
4 供試液的制備
4.1 取供試品10g，加經乾熱滅菌的5%吐溫-80 0.2ml，加PH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液稀釋至100ml，邊加邊振搖使成混懸液，靜止5分鍾使分層，傾取上清液置離心機中500r/min離心5分鍾，取上清液作為供試品溶液。
5 檢查方法
採用薄膜過濾法，濾膜孔徑為0.45um，直徑為50mm。濾膜及濾器在使用前採用121℃高壓滅菌30鍾。試驗過程中，應保持濾膜前後的完整性。將制備好的供試液過濾，然後用100mlPH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液（注意保持供試品溶液覆蓋整個濾膜表面）。沖洗後，用鑷子取出濾膜，菌面朝上貼於營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基平板上培養。細菌於30～35℃培養48小時，黴菌於23～28℃培養72小時。
㈤ 純化水微生物限度檢查方法
4.10微生物限度(薄膜過濾法)
4.10.1取相當於每張濾膜含1g或1ml供試品的供試液，加至適量的稀釋劑中，混勻，過濾。若供試品每1g或1ml所含的菌數較多時，可取適量稀釋劑的供試液1ml過濾。用pH7.0無菌氯化鈉－蛋白腖緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同「計數方法的驗證」。沖洗後取出濾膜，菌面朝上貼於營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉腖葡萄糖瓊脂培養基平板上培養。每種培養基至少制備一張濾膜。
4.10.2陰性對照試驗 取試驗用的稀釋液1ml，照上述薄膜過濾法操作，作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。
4.10.3培養和計數 除另有規定外，細菌培養48小時，逐日點計菌落數，一般以48小時的菌落數報告；黴菌、酵母菌培養72小時，逐日點計菌落數，一般以72小時的菌落數報告；必要時，可適當延長培養時間至5～7天進行菌落計數並報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計菌落數後，計算各稀釋級供試液的平均菌落數，按菌數報告規則報告菌數。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不少於15，則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。
4.10.4菌數報告原則 以相當於1g或1ml供試品的菌落數報告菌數；若濾膜上無菌落生長，以<1報告菌數（每張濾膜過濾1g或1ml供試品），或<1乘以稀釋倍數的值報告菌數。
這是我們公司的純化水微生物檢測部分內容，請參考。
㈥ 純化水中的微生物檢測怎麼做 要詳細
採用濾膜法進行微生物檢測是一種國際公認的微生物標准檢驗方法,其得到AOAC、美國、歐洲和日本等國家的葯典、FDA和EPA等組織的承認,廣泛應用於環境監測、食品及飲料工業、化妝品、制葯工業品質控制和電子工業等領域.賽多利斯公司的濾膜法微生物檢測產品成功地應用於濾膜法已有20多年的歷史,實用而且方便實用,它簡化了微生物檢測程序.
濾膜法微生物檢測：
將適當孔徑的濾膜放入濾器,過濾樣品,由於濾膜的作用而將微生物保留在膜的表面上.樣品中微生物生長抑制劑可在過濾後用無菌水沖洗濾器而除去.然後,將濾膜放在培養基上培養,營養物和代謝物通過濾膜的微孔進行交換,在濾膜表面上培養出的菌落可以計數,並和樣品量相關.
濾膜法的優點：
- 與直接法比較,可以檢測大量的樣品
- 濃縮效應使微生物檢測的准確度提高
- 帶有菌落的濾膜,可作為檢測的永久記錄存檔
- 可見的菌落和樣品量直接對應,得出定量結果
操作具體一點就是：薄膜過濾法檢測,一個樣過濾一份,就是200ml的純化水通過濾膜,將該濾膜浸泡在滅菌好的l生理鹽水中,再接種到平皿中,製成10級、100級、1000級稀釋倍數的細菌、黴菌和酵母菌稀釋培養皿,即可
㈦ 純化水進行微生物限度檢測，使用薄膜過濾法應該取多少
准備工作：用純化水浸泡濾膜，浸泡完全後放入濾杯中，包好濾杯，連同量筒、培養基、專平皿、取膜器、三角屬燒瓶等一起121℃滅菌30min。滅菌後的物品一並傳入潔凈室中，微生物限度過濾器上連好已經滅好的濾杯，用緩沖液先潤濕濾膜，抽掉緩沖液，然後倒入供試液（10倍稀釋），濾過，再用緩沖液沖洗濾膜。過濾結束後取下濾膜平貼於R2A瓊脂培養基平板上，32℃倒置培養5天。菌落計數（平皿上長幾個菌結果就報幾個菌）
㈧ 純化水的微生物限度里的薄膜過濾法如何計數啊
一次兩毫升水。把過濾完成的薄膜正面貼在R2A平板上，18小時後計數，每天數一次，可以用軟體數，也可以人工數，用記號筆在碟子上打點。細菌三天，黴菌五天。
㈨ 純化水微生物限度檢查操作
純化水微生物限度操作規程
文件編號
總
頁
數
共
3
頁
制訂部門
實施日期
起
草
人
審
核
人
批
准
人
起草日期
審核日期
批准日期
1.
目的
本規程旨在為微生物限度檢查提供一個標准化方法。
2.
適用范圍
微生物限度實驗室
3.
責任者
QC
主管生測員
4.
安全注意事項
嚴格無菌操作，防止微生物污染。
5.
規程
5.1
取樣
a
．在車間、實驗室所有用水點按序取樣，標明日期和取樣點位置，一個監測
點取水
3
次，一次
250mL
，送檢驗室按中國葯典
2010
年版二部標准進行全檢。
b
．
取樣前將直接接觸樣品的容器用
75%
酒精棉球進行擦拭，
採用滅菌後瓶收
集樣品。
c
．取樣時，取樣人洗手並消毒，取樣前用純化水淋洗檢驗用取樣瓶和瓶塞
3
次。滅菌瓶至少取
200mL
用於微生物檢驗用水，微生物檢驗應在取樣後的
1
小
時內進行，或將樣品冷藏並在
4
小時內進行檢驗。
5.2
微生物限度檢查
純化水檢驗標准微生物限度檢查採用平皿法和薄膜過濾法。
5.3
微生物培養
（
1
）
除另有規定，
本檢查法中細菌培養溫度為
30-35
℃，黴菌、酵母菌培養溫
度為