❶ 蛋白質水解產物陽離子交換柱層析時的洗脫順序
pI 10.76的那個應該帶正電荷。陽離子交換柱本身帶負電荷。
❷ 離子交換層析中流出物質順序是什麼
若用離子交換層析分離物質,以蛋白質為例,離子交換層析中,基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。帶有正電荷的稱之陰離子交換樹脂;而帶有負電荷的稱之陽離子樹脂。離子交換層析同樣可以用於蛋白質的分離純化。
由於蛋白質也有等電點,當蛋白質處於不同的pH條件下,其帶電狀況也不同。陰離子交換基質結合帶有負電荷的蛋白質,所以這類蛋白質被留在柱子上,然後通過提高洗脫液中的鹽濃度等措施,將吸附在柱子上的蛋白質洗脫下來。結合較弱的蛋白質首先被洗脫下來。
反之陽離子交換基質結合帶有正電荷的蛋白質,結合的蛋白可以通過逐步增加洗脫液中的鹽濃度或是提高洗脫液的pH值洗脫下來。
(2)陽離子交換柱層析誰先被洗脫擴展閱讀:
對於離子交換纖維素要用流水洗去少量碎的不易沉澱的顆粒,以保證有較好的均勻度,對於已溶脹好的產品則不必經這一步驟。
溶脹的交換劑使用前要用稀酸或稀鹼處理,使之成為帶H+或OH-的交換劑型。陰離子交換劑常用「鹼-酸-鹼」處理,使最終轉為-OH-型或鹽型交換劑;對於陽離子交換劑則用「酸-鹼-酸」處理,使最終轉為-H-型交換劑。
梯度不要上升太快,要恰好使移動的區帶在快到柱末端時達到解吸狀態。目的物的過早解吸,會引起區帶擴散;而目的物的過晚解吸會使峰形過寬。
❸ 在強酸性陽離子交換柱上asp,his及leu等幾種氨基酸的洗脫順序如何為什麼
依次是:精氨酸Asp,賴氨酸Leu,組氨酸His
因為他們的鹼性,也就是攜帶正電荷的能力,或者說電離成陽離子的能力,由強到弱是這個順序。
❹ 在陽離子交換柱中為什麼極性強的先洗脫下來
雜陽離子交換柱上我們一般用的是苯乙烯和二乙烯苯組成的聚合物,是非極性的;根據相似相溶,自然極性強的先洗脫下來
❺ 用陽離子交換層析洗脫氨基酸
首先得知道待分離氨基酸的等電點,洗脫液也分為幾種,一種洗脫液的pH對應一種氨基酸的pI,用某一洗脫液洗脫時,對應的氨基酸不帶電
❻ 在PH3左右,氨基酸混合液(酸性,鹼性,中性三類),經陽離子交換樹脂被洗脫分離,這三類氨基酸的洗脫順序
原因:氨基酸與陽離子交換樹脂的靜電引力大小依次是 鹼性氨基酸>中性氨回基酸>酸性氨基酸,所以答洗脫的順序就
先是酸性氨基酸(負電荷最多),然後是中性氨基酸,最後是鹼性氨基酸(帶正電荷最多)。
詳見《生物化學》王鏡岩 第三版 上冊 153頁
❼ 離子交換柱的陽,陰離子交換樹脂順序,哪個前哪個後
廣州華膜--樹脂產品的貯存:
離子交換樹脂內含一定量的水份,在運輸及貯存過程中應盡量保持這部分水份,如貯存過
程中樹脂脫了水應先用濃食鹽水(10%)浸泡,再逐漸稀釋不得直接放入水中,以免樹脂急劇
膨脹而破碎。在長期貯存中,強型樹脂應轉成鹽型,弱型樹脂可轉變成相應的氫型或游離型,
也可轉變成鹽型,然後浸泡在潔凈的水中。樹脂在貯存或運輸過程中,應保持在5-40℃的溫度
環境中避免過冷過熱,影響質量。
新樹脂的預處理:
新樹脂常含有溶劑、未參加聚合反應的物質和少量低聚合物,還可能吸著鐵、鋁、鋼等重
金屬離子。當樹脂與水、酸、鹼或其他溶液相接觸時,上述可溶性雜質就會轉入溶液中,在使
用初期污染出水水質。所以,新樹脂在投運前要進行預處理。
1、 陽樹脂預處理步驟如下:
首先使用飽和的食鹽水。取其量約等於被處理樹脂體積的兩倍,將樹脂置於10%食鹽溶液
中浸泡18-20小時,然後放出食鹽水,用清水漂洗凈,使排出水不帶黃色;其次再用
2%-4%NaOH溶液,其量與上相同,在其中浸泡2-4小時(或作小流量清洗),放出鹼液後,重洗
樹脂直至排出水接近中性為止;最後用5%HCI溶液,其量亦與上述相同,浸泡4-8小時後放出酸
液,用清水洗至中性待用。
2、 陰樹脂的預處理
其預處理方法中的第一步與陽樹脂預處理方法中的第一步相同;而後用5%HCI浸泡4-8小時,然後放出酸液,用水清洗至中性;而後用2%-4%NaOH溶液浸泡4-8小時後,放鹼液用清水漂洗至
中性待用。
❽ 在本次柱層析條件下,天冬氨酸、甘氨酸、組氨酸洗脫時那個最先洗
在本次柱層析條件下,天冬氨酸,甘氨酸,組氨酸洗脫時組氨酸最先洗,其次是甘氨酸,最後是天冬氨酸。根據查詢相關公開信息顯示,在苯酚硫酸鈉溶液中,天冬氨酸的電荷比較小,它的遷移速率較快,因此它會在紙上向下遷移在最下面。脯氨酸的電荷比較大,它的遷移速率較慢,因此它會在紙上向上遷移,在最上面。而甘氨酸的電荷介於兩者之間,它的遷移速率也在兩者之間,因此它會在中間。
❾ 利用陽離子交換層析分離下列每一對氨基酸,哪一種氨基酸首先被PH7緩沖液從離子交換柱上洗脫出來。
氨基酸與粒子抄交換樹脂的吸附力襲大小取決於它們之間的電荷引力和疏水作用。第一組中甘氨酸和亮氨酸均為非極性氨基酸,但是相比之下甘氨酸的極性要更強,也就是疏水性更弱,它會先被洗脫。第二組中,絲氨酸是中性條件下不帶電荷的極性氨基酸,丙氨酸是非極性氨基酸,所以絲氨酸疏水性差,先被洗脫。
❿ 在強酸型陽離子交換柱上天冬氨酸,組氨酸,亮氨酸等幾種氨基酸的洗脫順序及原因。
洗脫順序先後依次是:天冬氨酸、亮氨酸、組氨酸。
原因:氨基酸與陽離子交換樹回脂的靜電引力大小答依次是 鹼性氨基酸>中性氨基酸>酸性氨基酸,所以洗脫的順序就先是酸性氨基酸,然後是中性氨基酸,最後是鹼性氨基酸。
天冬氨酸屬於酸性氨基酸,組氨酸屬於鹼性氨基酸,亮氨酸屬於中性氨基酸。
詳見《生物化學》王鏡岩 第三版 上冊 153頁