⑴ 生物化學實驗
牛血清白蛋白熱乙醇法提取工藝:分離血漿,在牛血中加入枸櫞酸鈉離心,提取,將收集的血漿放入夾層反應罐內,加熱加入辛酸鈉,緩慢攪拌,溫度在55℃~65℃,加入鹽酸調pH值至4.0~6.5,然後加乙醇,過濾,脫鹽和濃縮,凍干為成品。具體為以下步驟:A、分離血漿,取新鮮牛血放入帶製冷功能的離心機中,加入血量的10%的濃度為3.8%的枸櫞酸鈉,離心,溫度在2℃以下,分離血漿、血球,收集血漿,血球另用; B、提取,將血漿放入夾層反應罐內,夾層內加熱水,邊加熱邊加入牛血清容積的0.2-0.3%的辛酸鈉,緩慢攪拌,溫度在55℃~65℃,溶解後調PH值,加入濃度為1摩爾的鹽酸,將PH調至4.0~6.5,然後加入血清總量的5.5%的濃度為95%的乙醇,過濾,濾渣棄之; C、脫鹽和濃縮,將濾液用20000分子量以下的超濾器洗脫鹽類及其它小分子雜質,同時進行濃縮; D、凍干,將濃縮液按凍干曲線凍干,即將濃縮液迅速冷卻至-40℃,持續1小時左右,升到-25℃,持續10-20小時,再緩慢升溫到0℃,再持續1-4小時升到保存溫度20℃。,為成品。
⑵ 在培養基中想加入牛血清白蛋白 想問問牛血清白蛋白需要除菌嗎 除菌的話用濾膜除菌的方法嗎
不用除菌!
牛血清白蛋白,是從生物公司買來的,是已經制備好的,無菌。直接添加到培養基中即可。
⑶ 哪些因素會影響超濾膜組件截留分子量
會影響超濾膜組件截留分子量的因素:
1、進水壓版力對納濾膜的影響
進水壓力本身並權不會影響鹽透過量,但是進水壓力升高使得驅動納濾膜的凈壓力升高,使得產水量加大,同時鹽透過量幾乎不變,增加的產水量稀釋了透過膜的鹽分,降低了透鹽率,提高脫鹽率。當進水壓力超過一定值時,由於過高的回收率,加大了濃差極化,又會導致透過量增加,抵消了增加的產水量,使得脫鹽率不再增加。
2、進水TDS含鹽量對納濾膜的影響
滲透壓是水中所含鹽粉或有機物濃度的函數,含鹽量越高滲透壓也增加,進水壓力不變的情況下,凈壓力將減小,產水量降低。透鹽率正比於膜正反兩側鹽濃度差,進水含鹽量越高,濃度差也越大,透鹽率上升,從而導致脫鹽率下降。
納濾膜的應用非常廣泛,在醫療、環保等等的行業都有所涉及,為了確保其應用性能的穩定性,應注意進水壓力及進水TDS含鹽量對納濾膜的影響。
⑷ 我在做牛血清白蛋白,凍干後復溶就變渾濁了,如何解決呀
每10g加100ml水。還是用pbs溶解也可以,看你的用途。
按一周內能用完的分量,分裝成小支放在負20或負30度冰箱應該起碼可以放好幾個月。
不是冷凍保存的話,如果想放4度冰箱放久一點,則需要加防腐劑,比如可以用0.1%
nan3
(sodium
azide)
也要看你的用途,有些實驗會受防腐劑影響。
⑸ 聚醚碸濾膜可以過濾BSA(牛血清白蛋白)溶液嗎
下午好,沒問題。PES和PA、PP一樣屬於對水相完全封閉對絕大多數溶劑相耐受也很好的內非極容性高聚物,它可以過濾BSA,唯一需要注意的就是看看孔徑是多大適合了請酌情參考。理論上蛋白水溶液或者極性溶劑只要不是純水相材質都可以使用(我一般都是直接用PP的0.22和0.14um)。