dmso溶解葯物後過濾

1. 我是做葯物篩選的，用Hela細胞篩選葯物時，MTT染色後，吸取培養基，加完DMSO之後有部分孔不溶（藍紫色固體

加完DMSO之後MTT並不會很快溶解，需要震盪加速溶解，時間不定。
那你需要確定葯物的濃度是否過大、葯物溶解性、是否可能與MTT有反應等潛在的原因.

2. DMSO如何溶解

1. 用油泵減壓蒸出來
2.若用水洗，建議用乙醚萃取。乙醚的效果會比EA好些。它對DMF，DMSO溶解度稍小。
2. 我用的DMSO 主要是,加入3倍的水,再用乙醚萃取,嘗試一下吧,祝成功
3. 產物不溶於水的都可以採用水洗除去dmf與dmso 加大量水 有機溶劑萃取 收集有機相 飽和食鹽水洗 乾燥 過濾 旋蒸溶劑即可
4. 這兩種溶劑都不是太好處理，DMSO極性更大一些，沸點也更高，黏度更大，穩定性更差，要除盡更困難。DMF通常用旋蒸再加用低沸點溶劑帶幾次一般還是可以除盡的，但DMSO要除盡非常困難，旋蒸不太容易蒸去，水洗也存在這個問題，而且要多次洗，易造成產物損失。在反應過程中，DMSO對鹼穩定性不夠，易產生自身歧化反應，如果聞到惡臭味就說明產生了歧化反應或分解反應。在100度下反應用DMF足夠了。
5. 一般反應（前提是這兩種溶劑均不參與反應）可能還是傾向於用DMF多些，DMSO粘度大些，去除相對要難一點，去除這兩種溶劑，一般可在既有產物又有溶劑的混合物中加入適量水，裝有產物的瓶子外面用乾冰+丙酮使其結冰，轉至凍干機凍干即可得到較為干凈的產物
6. 極性小的化合物，後處理水洗就好了，冰水：DMF或DMSO 10：1 （體積比）肯定能洗掉的，
如果你的產物的極性比較大的話，可以試試裝一個硅膠柱，然後把DMF或者DMSO的反應液直接上柱，然後用DCM沖洗，DMF或者DMSO會很快的沖下來，當然還會帶有一些雜質，然後再改變洗脫劑的比例把產物沖下來就好了

3. MTT法測24孔板時 細胞數多 二甲基亞碸（DMSO）溶解甲瓚後溶液顏色深的孔 吸光度反而低

MTT原理
\x09MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,漢語化學名為 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽,商品名：噻唑藍.是一種黃顏色的染料.
\x09MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法.其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚（Formazan）並沉積在細胞中,而死細胞無此功能.二甲基亞碸（DMSO）能溶解細胞中的甲瓚,用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量.在一定細胞數范圍內,MTT結晶形成的量與細胞數成正比.該方法已廣泛用於一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤葯物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等.它的特點是靈敏度高、經濟. 缺點：由於MTT經還原所產生的甲瓚產物不溶於水,需被溶解後才能檢測.這不僅使工作量增加,也會對實驗結果的准確性產生影響,而且溶解甲的有機溶劑對實驗者也有損害.
MTT 溶液的配製方法 通常,此法中的MTT 濃度為5mg/ml.因此,可以稱取MTT 0.5克,溶於100 ml的磷酸緩沖液（PBS）或無酚紅的培養基中,用0.22μm濾膜過濾以除去溶液里的細菌,放4℃ 避光保存即可.在配製和保存的過程中,容器最好用鋁箔紙包住.實驗的時候我一般關閉超凈台上的日光燈來避光,覺得這樣比較好. 需要注意的是,MTT法只能用來檢測細胞相對數和相對活力,但不能測定細胞絕對數.在用酶標儀檢測結果的時候,為了保證實驗結果的線性,MTT 吸光度最好在0-0.7 范圍內.
\x09MTT一般最好現用現配,過濾後4ºC避光保存兩周內有效,或配製成5mg/ml保存在-20度長期保存,避免反復凍融,最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解.我一般都把MTT粉分裝在EP管里,用的時候現配,直接往培養板中加,沒必要一下子配那麼多,尤其當MTT變為灰綠色時就絕對不能再用了.
\x09MTT有致癌性,用的時候小心,有條件最好帶那種透明的簿膜手套.配成的MTT需要無菌,MTT對菌很敏感；往96孔板加時不避光也沒有關系,畢竟時間較短,或者你不放心的時候可以把操作台上的照明燈關掉.
\x09配製MTT時用PBS（ph=7.4）溶解.PBS配方：Nacl 8g ＋ Kcl 0.2g ＋ Na2HPO4 1.44g ＋ KH2PO4 0.24g調pH 7.4,定容1L.
普通MTT法實驗步驟：1：接種細胞：用含10％胎小牛血清得培養液配成單個細胞懸液,以每孔1000-10000個細
\x09胞接種到96孔板,每孔體積200ul.2: 培養細胞：同一般培養條件,培養3-5天（可根據試驗目的和要求決定培養時間）.3：呈色：培養3-5天後,每孔加MTT（噻唑藍）溶液（5mg/ml用PBS配製,pH=7.4)20ul.繼續孵育4 h,
\x09終止培養,小心吸棄孔內培養上清液,對於懸浮細胞需要離心後再吸棄孔內培養上清液.
\x09每孔加150ul DMSO,振盪10min,使結晶物充分融解.4：比色：選擇490nm波長,在酶聯免疫監測儀上測定各孔光吸收值,記錄結果,以時間為
\x09橫坐標,吸光值為縱坐標繪制細胞生長曲線.
葯物MTT法實驗步驟貼壁細胞：1: 收集對數期細胞,調整細胞懸液濃度,每孔加入100ul,鋪板使待測細胞調密度 1000-
\x0910000 孔,（邊緣孔用無菌PBS填充）.2: 5%CO2,37℃孵育,至細胞單層鋪滿孔底（96孔平底板）,加入濃度梯度的葯物,原則上,
\x09細胞貼壁後即可加葯,或兩小時,或半天時間,但我們常在前一天下午鋪板,次日上午
\x09加葯.一般5-7個梯度,每孔100ul,設3-5個復孔.建議設5個,否則難以反應真實情況3: 5%CO2,37℃孵育16-48小時,倒置顯微鏡下觀察.4: 每孔加入20ulMTT溶液（5mg/ml,即0.5%MTT）,繼續培養4h.若葯物與MTT能夠反應,
\x09可先離心後棄去培養液,小心用PBS沖2-3遍後,再加入含MTT的培養液.5: 終止培養,小心吸去孔內培養液.6: 每孔加入150ul二甲基亞碸,置搖床上低速振盪10min,使結晶物充分溶解.在酶聯免
\x09疫檢測儀OD490nm處測量各孔的吸光值.7: 同時設置調零孔（培養基、MTT、二甲基亞碸）,對照孔（細胞、相同濃度的葯物溶解介
\x09質、培養液、MTT、二甲基亞碸）.
懸浮細胞：1: 收集對數期細胞,調節細胞懸液濃度1×106/ml,按次序將①補足的1640（無血清）培
養基40ul ；②加Actinomycin D（放線菌素D有毒性）10ul用培養液稀釋 (儲存液100g/ml,需預試尋找最佳稀釋度,1:10-1:20)；③需檢測物10ul；④細胞懸液50ul（即5×104cell/孔）,共100ul加入到96孔板（邊緣孔用無菌水填充）.每板設對照（加100l 1640）
2: 置37℃,5%CO2孵育16-48小時,倒置顯微鏡下觀察.3: 每孔加入10 ul MTT溶液（5 mg/ml,即0.5%MTT）,繼續培養4 h.（懸浮細胞推薦使用
WST-1,培養4 h後可跳過步驟4）,直接酶聯免疫檢測儀OD570nm（630nm校準）測量各孔的吸光值）
\x094、離心（1000轉x10min）,小心吸掉上清,每孔加入100 ul二甲基亞碸,置搖床上低速振盪10 min,使結晶物充分溶解.在酶聯免疫檢測儀OD570nm（630nm校準）測量各孔的吸光值.
\x095、同時設置調零孔（培養基、MTT、二甲基亞碸DMSO）,對照孔（細胞、相同濃度的葯物溶解介質、培養液、MTT、二甲基亞碸）,每組設定3復孔.
注意事項：(1) 選擇適當得細胞接種濃度.(2) 避免血清干擾：一般選小於10％的胎牛血清的培養液進行試驗.在呈色後盡量吸盡孔
\x09內殘余培養液.(3) 設空白對照：與試驗平行不加細胞只加培養液的空白對照.其他試驗步驟保持一致,
\x09最後比色以空白調零.
(4) MTT實驗吸光度最後要在0-0.7之間,超出這個范圍就不是直線關系.
\x09(5) 用96孔板培養細胞做MTT測細胞活力,應該加多少1640培養基,多少MTT和DMSO合適
\x09根據書上說的加200ul1640,20ulMTT,150ulDMSO 加DMSO之前要盡量去掉培養液,便於
\x09DMSO溶解甲臢顆粒進行比色測定
\x09(6) 一般每孔4000個細胞為宜,既細胞濃度在20000個/ml,MTT加20ul,作用四小時後洗掉上清液,注意不要將甲瓉洗掉,然後每孔加150ul DMSO,在脫色搖床上振盪10分鍾,然後測吸光值.

4. 葯物溶於DMSo後加水稀釋，析出怎麼處理

水是該葯物的不良溶劑，DMSO容易溶解的葯物，在水中並不一定容易溶解。因此該葯物的DMSO溶液加水稀釋後，因溶解度降低就析出了，這是很正常的現象。

在細胞膜上打洞，使細胞內的水分子能滲透出來，從而防治冷凍細胞時，細胞內冰晶的形成，而破壞細胞。所以在做細胞凍存時它是必不可少的。

但DMSO又能損傷細胞使用它時需要有一定濃度，一般採用的是終濃度10％就行了。最大濃度葯物的DMSO含量是0一般來說，培養基中濃度為小於0.5%就可以了。

(4)dmso溶解葯物後過濾擴展閱讀：

無色粘稠液體。可燃，幾乎無臭，帶有苦味，有吸濕性。除石油醚外,可溶解一般有機溶劑。 能與水、乙醇、丙酮、乙醛、吡啶、乙酸乙酯、苯二甲酸二丁酯、二惡烷和芳烴化合物等任意互溶，不溶於乙炔以外的脂肪烴類化合物。

有強烈吸濕性，在20℃，當相對濕度為60%時，可從空氣吸收相當於自身重量70%的水分。該品是弱氧化劑，不含水的二甲基亞碸對金屬無腐蝕性。含水時對鐵；銅等金屬有腐蝕性，但對鋁不腐蝕。

對鹼穩定。在酸存在時加熱會產生少量的甲基硫醇；甲醛；二甲基硫；甲磺酸等化合物。在高溫下有分解現象，遇氯能發生激烈反應，在空氣中燃燒發出淡藍色火焰。

5. 【求助】請問有Dmso做溶劑的反應，後處理怎麼操作

有機溶劑萃取，水洗；乙醚最好，和DMSO不太互溶產物要是溶於水的話就加適量有機溶劑，放冰箱里凍，然後趁冷過濾，最後剩很少量的DMSO根據你的需要考慮要不要過柱子

6. 細胞實驗，DMSO溶解葯物，求助給位

你好，DMSO是一種細胞保護劑，它的作用機理是在細胞膜上打洞，使細胞內的水分子能滲透出來，從而防治冷凍細胞時，細胞內冰晶的形成，而破壞細胞。所以在做細胞凍存時它是必不可少的，但DMSO又能損傷細胞使用它時需要有一定濃度，一般採用的是終濃度10％就行了。最大濃度葯物的DMSO含量是0一般來說，培養基中濃度為小於0.5%就可以了，但據實驗觀察小於0.25%肯定沒有問題。相關要求不超過1%祝你健康

7. 如何除去聚合產物中的DMSO溶劑

晚上好，如果確定聚合物里的溶劑只有DMSO一種，可以用真空乾燥的方式來脫除，對於高沸點其他液相溶劑比如難揮發的鄰苯二甲酸酯、脂肪酸酯和苯甲醇效果也很好，請酌情參考。DMSO是極性非質子溶劑不比無水甲乙醇那麼易燃，把你的聚合物盡可能碾成薄片，如果能耐100度以下更好（窮得叮當響就買個真空脫泡桶+2L的旋片泵插上慢慢抽吧）。

8. 10%的DMSO溶解的葯物需要過濾除菌嗎

建議還是濾菌，來保險一些自。葯物的話，用DMSO溶解後，再加入培養基培成母液，然後過濾；凍存液的配置可採用兩種方法，方法一是：把DMSO拿去高壓消毒；方法二是，直接配好凍存液，再過濾一遍，分裝成10ml的小管，可以保存在－20度中，。因為雖然說DMSO不長菌，但是你有可能接觸DMSO的瓶口、瓶壁，還是存在污染的可能性，安全起見，還是應過濾一次的。

9. 做mtt實驗時，自由葯用dmso溶解後用pbs稀釋後又析出怎麼辦

加完DMSO之後MTT並不會很快溶解，需要震盪加速溶解，時間不定。
那你需要確定物的濃度是否過大、物溶解性、是否可能與MTT有反應等潛在的原因.

10. 100%DMSO溶解葯物以後下一步再用什麼稀釋

100%DMSO溶解葯物以後下一步再用什麼稀釋
為了保證DMSO在細胞懸液里的濃度不大於0.1%,
就不好繼續用DMSO繼續稀釋葯物了。