⑴ 就是我在LB培養基裡面加的卡那抗生素是怎麼配製的,誰能告訴我
首先查找你所要的質粒的卡那黴素的工作濃度,(一般為50ug/ml,但不同質粒所用濃度不同),然後將卡那黴素配成貯存液(一般為200×),用0.22um濾器過濾除菌。例如,你配製20ml卡那黴素200×貯存液,則稱取0.2g卡那黴素,20ml水溶解。
接著你就可以配製LB培養基了,滅菌後,加入卡那黴素貯存液,配製成工作濃度。例如,500ml培養基加入2.5ml 200×卡那黴素貯存液,稀釋成工作濃度。液體培養基待冷卻後加入,固體培養基待冷卻至40-60℃左右加入,混勻,倒板。
⑵ 抗生素發酵提取的具體步驟是怎麼做的,有懂的人嗎
首先是過濾把菌體和發酵液分開來,如果抗生素是胞外的(基本都是),也就是說抗生素在發酵液中,可採取萃取、醇沉水提、膜過濾、樹脂吸附等方法來提取(不同抗生素有不同的方法);如果是胞內的,就需要用超聲或其他方法進行菌體破碎,然後再提取,基本就是用浸提的方法。
⑶ 抗生素供試品選擇什麼材質的微孔濾膜
水溶性的用混合纖維素濾膜或醋酸纖維素濾膜
脂溶性的用PVDF濾膜或PTFE濾膜
⑷ 用無水乙醇配製的紅黴素需要過濾除菌嗎
一般不需要除菌的,無水乙醇本來就不能長菌,如果一定要做過濾的操作的話,可以選用0.33μm的過濾器,用注射器裝乙醇,然後通過過濾器過濾到已滅菌的容器里,當然,要在超凈台里操作。這樣就沒問題了,一般抗生素,溶菌酶什麼的都是這么過濾的。
⑸ 培養基中加抗生素怎麼滅菌
首先確定您的滅菌方法對抗生素的葯效有無影響,如無影響 按需要濃度把抗生素定量加入培養基中就可以,然後一起滅菌。如果有影響就要再滅菌完後將抗生素過濾除菌再定量加入
⑹ 抗生素的配製
過濾除菌···沒聽說過
巴氏滅菌法 (低溫)
⑺ 抗生素是怎麼做的,自己可以做嗎
LZ您好
首先我回答你後一個問題吧
抗生素理論上自己可以做...甚至高中實驗范圍就可進行簡單的抗生素提取。
接下來是怎麼做。
我先告訴你一個概念:
抗生素,是指由微生物(包括細菌、真菌、放線菌屬)或高等動植物在生活過程中所產生的具有抗病原體或其他活性的一類次級代謝產物,能幹擾其他生活細胞發育功能的化學物質。
所以,你有培養過細菌,真菌等……理論就有提取其抗生素的機會。
嗯?你說你沒培養過細菌真菌??我就問你你有沒有忘了吃飯結果米飯發霉?忘了吃麵包結果麵包長毛?那就是真菌。
當然上面導致發霉的細菌真菌不一定是我們要的,然而其中有一種叫青黴的,就是世界上第一個被我們人類提取並利用的抗生素的青黴素的來源。
所以譬如高中生物實驗,應該就有菌類接種這一課。(見於高中生物選修1,微生物培養一節)
該章節就有詳細描述菌種接種的基本方法,包含滅菌操作,培養基,劃線操作等過程。以及之後培養過程。
接下來有了真菌培養(假設),我們得到了他發酵分泌物,那麼接下來就是化學實驗了。當然不同的抗生素提取工藝不一樣(畢竟不同的抗生素其理化性質不一樣)。譬如青黴素有土法是加入菜籽油,進行萃取;土黴素則是草酸酸化,再用黃血鹽除去蛋白質,再樹脂吸附,調節PH…………
當然也有更為進步的工藝。純度可以更好。
當然,以上我只想說,抗生素確實可以自己動手做,但做出來純度能不能達到商品標准就是另一回事了。
還有,就是產量,什麼樣的黴菌能多產,什麼黴菌產量較少,如何淘汰產量少的菌種,就是別的問題了。
再有,進行實驗,製取研究就算了。如果進行商品化,葯用等,還必須取得特定的許可。這種行政問題在此也不加贅述了。
⑻ 急!抗生素溶液的配置問題
瓊脂稀釋法配製帶葯平板
如果是測試微生物的耐葯性,可按以下步驟配製,如果只是用於篩選某些菌,只要配製好抗生素母液按照步驟(3)操作即可。
(1)抗生素葯物溶液:按產品說明書配製各種抗生素葯物原液,濃度應不低於1000μg/ml或10倍於最高測試濃度,除非葯物的溶解度有影響。將原液對倍稀釋形成濃度梯度,與培養基混合後的最終濃度可依次為512μg/ml,256μg/ml;128μg/ml;64μg/ml;32μg/ml;16μg/ml;8μg/ml;4μg/ml;2μg/ml;1μg/ml;0.5μg/ml;0.25μg/ml和0.125μg/ml。按實驗室的具體需求選用適當的葯物濃度范圍。抗生素葯物原液應貯存在-60℃或更低溫度,保存期不超過6個月,期間需用標准質控菌株檢測其效價。
(2)培養基:M-H瓊脂為常規細菌葯敏試驗的最佳培養基,其pH應為7.2~7.4,用於葡萄球菌屬對甲氧西林、苯唑西林和萘夫西林的耐葯性檢測則需添加2%NaCl。
(3)配製帶葯培養基:配製時加水量應減少1/10,以備添加稀釋好的抗生素溶液。滅菌後水浴冷卻至48~50℃,逐個將各個濃度的抗生素溶液以1:10加入M-H瓊脂中,充分混勻,傾注平板,配製完成後於0~4℃保存,用於質控試驗的平板保存期限為5天,用於常規試驗的可略有延長。
一般不用考慮抗生素溶液的雜菌問題,不過如果有條件,可以採用膜過濾的方法過濾除菌,再用於帶葯平板的配製。