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氨基酸的離子交換包括

發布時間:2022-07-16 13:46:57

1. 什麼是氨基酸的離子交換

離子交換層析 (ion exchange chromatography,簡稱ICE)是分析和制備樣品混合物的液-固相層析方法,是基於待測物質的陽離子或陰離子和相對應的離子交換劑間的靜電結合,即根據物質的酸鹼性、極性等差異,通過離子間的吸附和脫吸附原理將電解質溶液各組分分開。它是從復雜混合物體系中分離性質極為相似的生物分子的有效手段之一。由於帶電荷不同的各種物質對離子交換劑有不同親和力,通過改變洗脫液的離子強度和pH值,控制這種親和力,即可使這些物質依據親和力大小順序依次從層析柱中洗脫下來。

氨基酸是兩性電解質,分子 上的凈電荷取決於氨基酸的等電點和溶液的pH值,各種氨基酸分子結構不同,在同一pH值時所帶電荷的性質(正、負)和多少不同,與離子交換樹脂的親和力有差異,因此可根據親和力從小到大的順序被洗脫液分別洗脫下來,達到分離的效果。

三、儀器與試劑

(一)實驗器材

(1)玻璃層析柱

(2)試管

(3)移液管

(4)恆壓洗脫瓶

(5)部分收集器

(6)水浴鍋

(7)分光光度計

(8)電爐

(二)材料與試劑

(1)苯乙烯磺酸鈉型樹脂(100~200目)

(2)2mol/L鹽酸溶液

(3)2mol/L氫氧化鈉溶液

(4)標准氨基酸溶液:將天門冬氨酸和賴氨酸分別配成2mg/mL的0.1mol/L鹽酸溶液。

(5)混合氨基酸溶液:將上述天門冬氨酸和賴氨酸溶液按1:4比例混合。

(6)檸檬酸-氫氧化鈉-鹽酸溶液(pH5.8,鈉離子濃度0.45mol/L):取檸檬酸14.25克、氫氧化鈉9.30克分別溶於水後混合,加入濃鹽酸5.25毫升,定容至500毫升;4℃冰箱保存。

(7)顯色劑:2克水合茚三酮溶於95%乙醇中,加水至100毫升。

2. 氨基酸的分離

一、沉澱法:1.利用氨基酸的溶解度分離或等電點沉澱
2.特殊試劑沉澱法
二、離子交換:離子交換是利用不溶性高分子化合物,就是離子交換樹脂對不同氨基酸吸附能力的差異對氨基酸混合物進行分組或實現單一成分的分離.
三、萃取:1、反應萃取:選取適當的反應萃取劑,其解離出來的離子與氨基酸解離出來的離子發生反應,生成可以溶於有機溶劑的萃取配合物,從而使氨基酸從水相進入有機相.
2、反相微膠團萃取:反相微膠團是溶在有機溶劑中的表面活性劑自發形成的納米級的聚體,表面活性劑的極性尾與外在非極性的有機溶劑接觸,而極性頭則排列在內形成極性核,極性核溶於水後就形成了「水池」,當含有氨基酸的水溶液與反相微膠團的有機溶劑相混合時,氨基酸以帶電離子狀態進入反相微膠團的水池內而被分離
氨基酸分離的方法還有很多,但是常用的就是離子交換.
全手打,

3. 氨基酸的結構與性質

氨基酸的結構是由一個氨基、一個羧基、一個氫和一個R基連在同一個中心C原子上組成。這樣分子式就為C2H4O2R。

性質:氨基酸為無色晶體,熔點超過200℃,比一般有機化合物的熔點高很多。α一氨基酸有酸、甜、苦、鮮4種不同味感。谷氨酸單鈉鹽和甘氨酸是用量最大的鮮味調味料。氨基酸一般易溶於水、酸溶液和鹼溶液中,不溶或微溶於乙醇或乙醚等有機溶劑。

氨基酸在水中的溶解度差別很大,例如酪氨酸的溶解度最小,25℃時,100 g水中酪氨酸僅溶解0.045 g,但在熱水巾酪氨酸的溶解度較大。賴氨酸和精氨酸常以鹽酸鹽的形式存在,因為它們極易溶於水,因潮解而難以製得結晶 。

(3)氨基酸的離子交換包括擴展閱讀:

氨基酸是構成動物營養所需蛋白質的基本物質。是含有鹼性氨基和酸性羧基的有機化合物。氨基連在α-碳上的為α-氨基酸。組成蛋白質的氨基酸大部分為α-氨基酸。

氨基酸在人體內通過代謝可以發揮下列一些作用:①合成組織蛋白質;②變成酸、激素、抗體、肌酸等含氨物質;③轉變為碳水化合物和脂肪;④氧化成二氧化碳和水及尿素,產生能量。

參考資料來源:網路——氨基酸

4. 如何用陰離子交換樹脂層析分離混合氨基酸

  1. 離子交換樹脂是一種合成的高聚物,不溶於水,能吸水膨脹.高聚物分子由能電離的回極性答基團及非極性的樹脂組成.極性基團上的離子能與溶液中的離子起交換作用,而非極性的樹脂本身物性不變.通常離子交換樹脂按所帶的基團分為強酸(=R=S03H)、弱(=COOH)、強鹼 (=N+=R:)和弱鹼(=NH2=NHR=NR2).

  2. 離子交換樹脂分離小分子物質如氨基酸、腺苷、腺苷酸等是比較理想的.但對生物大於物質如蛋白質是不適當的,因為它們不能擴散到樹脂的鏈狀結構中.故如分離生物大子、可選用以多糖聚合物如纖維素、葡聚糖為載體的離子交換劑.

  3. 本實驗用磺酸陽離子交換樹脂分離酸性氨基酸(天冬氨酸)、中性氨基酸(丙氨酸)鹼性氨基酸(賴氨酸)的混合液.在特定的pH條件下,它們解離程度不同,通過改變脫液的pH或離子強度可分別洗脫分離.

5. 求問怎麼用離子交換樹脂層析分離混合氨基酸

【原理】離子交換樹脂是一種合成的高聚物,不溶於水,能吸水膨脹。高聚物分子由能電離的極性基團及非極性的樹脂組成。極性基團上的離子能與溶液中的離子起交換作用,而非極性的樹脂本身物性不變。通常離子交換樹脂按所帶的基團分為強酸(=R=S03H)、弱(=COOH)、強鹼 (=N+=R:)和弱鹼(=NH2=NHR=NR2)。
離子交換樹脂分離小分子物質如氨基酸、腺苷、腺苷酸等是比較理想的。但對生物大於物質如蛋白質是不適當的,因為它們不能擴散到樹脂的鏈狀結構中。故如分離生物大子、可選用以多糖聚合物如纖維素、葡聚糖為載體的離子交換劑。
本實驗用磺酸陽離子交換樹脂分離酸性氨基酸(天冬氨酸)、中性氨基酸(丙氨酸)鹼性氨基酸(賴氨酸)的混合液。在特定的pH條件下,它們解離程度不同,通過改變脫液的pH或離子強度可分別洗脫分離。
【材料】1.實驗器材層析柱(1.6X20cm);恆流泵;梯度混合器;試管及試管架;紫外分光光度計、磺酸陽離子交換樹脂(Dowex 50)
2.實驗試劑
(1)2mol/L HCl
(2)2mol/L NaOH
(3)0.1mOl/L HCl
(4) 0.1mol/L NaOH
(5)pH4.2的檸檬酸緩沖液:0.lmol/L檸檬酸54m1加0.1mol/L檸檬酸鈉46ml
(6)pH5的醋酸緩沖液:0.2mol/L NaAc 70ml加 0.2mol/L HAc 30ml
(7)0.2%中性茚三酮溶液:0.2g茚三酮加100ml丙酮
(8)氨基酸混合液:丙氨酸、天冬氨酸、賴氨酸各10m1加0.1mol/L HCl 3m【方法】
1. 樹脂的處理
100ml燒杯中置約10g樹脂,加25ml 12mo1/L HCl攪拌2h,傾棄酸液,用蒸餾水充洗滌樹脂至中性。加25ml 12mol/L NaOH至上述樹脂中攪拌2h,傾棄鹼液,用蒸餾水洗滌至中性。將樹脂懸浮於50ml pH4.2檸檬酸緩沖液中備用。
2. 裝柱取直徑0.8cm~1.2cm、長度 10cm~12cm的層析柱,底部墊玻璃棉或海綿圓墊,自頂部注入經處理的上述樹脂懸浮液,關閉層柱出口,待樹脂沉降後,放出過量的溶液,在加入一些樹脂,至樹脂沉積至8cm~10cm高度即可。於柱子頂部繼續加入pH4.2檸檬酸緩沖液洗滌,使流出液pH為4.2為止,關閉柱子出口,保持液面高出樹脂表面1cm左右。
3. 加樣、洗脫及洗脫液收集
打開山口使緩沖液流出,待液面幾乎平齊樹脂表面時關閉出口(不可使樹脂表面乾燥)。用長滴管將15滴氨基酸混合液仔細直接加到樹脂頂部,打開出口使其緩慢流入柱內。當液面剛平樹脂表面時,加入0.1mol/L HCl 3ml,以10滴/min~12滴/min的流速洗脫,收集洗脫液,每管20滴,逐管收存。當HCl液面剛平樹脂表面時,用1m1 pH4.2檸檬酸緩沖液沖洗柱壁一次,接著用2ml pH4.2檸檬酸緩沖液洗脫,保持流速10滴/min~12滴/min並注意勿使樹脂表面乾燥。
在收集洗脫液的過程中,逐管用茚三酮檢驗氨基酸的洗脫情況,方法是:於各管洗脫液中加10滴pH5醋酸緩沖液和10滴中性茚三酮溶液,沸水浴中煮10min,如溶液呈紫藍色,表示已有氨基酸洗脫下來。顯色的深度可代表洗脫的氨基酸濃度,可比色測。
在用pH4.2檸檬酸緩沖液把第二個氨基酸洗脫出來之後,再收集兩管茚三酮反應陰性部分,關閉層析柱出口,將樹脂頂部剩餘的pH4.2檸檬酸緩沖液移去。
於樹脂頂部加入2ml 0.1mo1/L NaOH,打開出口使其緩慢流入柱內,按上面I續用0.1mo1/L NaOH洗脫並逐管收集 (注意仍然保持流速10滴/min~12滴/min),每管20滴。做洗脫液中氨基酸檢驗,在第三個氨基酸用0.1mo1/L NaOH洗脫下來以後,再繼續收集兩管茚三酮反應陰性部分。
最後以洗脫液管號為橫坐標,洗脫液各管光密度(以水作空白,在570nm波長讀取吸光度)或顏色深淺(以 -,±,+,++...表示)為縱坐標作圖,即可畫出一條洗脫曲線。
【注意事項】
1. 一直保持流速10滴/min~12滴/min,並注意勿使樹脂表面乾燥。
2. 在裝柱時必須防止氣泡、分層及柱子液面在樹脂表面以下等現象發生。

6. 許多不同的氨基酸混在一起,怎樣將它們分離或制備

一、沉澱法:1.利用氨基酸的溶解度分離或等電點沉澱
2.特殊試劑沉澱法
二、離子交換:離子交換是利用不溶性高分子化合物,就是離子交換樹脂對不同氨基酸吸附能力的差異對氨基酸混合物進行分組或實現單一成分的分離.
三、萃取:1、反應萃取:選取適當的反應萃取劑,其解離出來的離子與氨基酸解離出來的離子發生反應,生成可以溶於有機溶劑的萃取配合物,從而使氨基酸從水相進入有機相.
2、反相微膠團萃取:反相微膠團是溶在有機溶劑中的表面活性劑自發形成的納米級的聚體,表面活性劑的極性尾與外在非極性的有機溶劑接觸,而極性頭則排列在內形成極性核,極性核溶於水後就形成了「水池」,當含有氨基酸的水溶液與反相微膠團的有機溶劑相混合時,氨基酸以帶電離子狀態進入反相微膠團的水池內而被分離
氨基酸分離的方法還有很多,但是常用的就是離子交換.
全手打,

7. 20種氨基酸用離子交換層析法分離順序

這看你用什麼填料進行交換層析了,還有離子交換緩沖液的pH多少。
因為氨基酸有酸性氨基酸、鹼性氨基酸以及中性氨基酸。不同交換條件分離順序不同。

8. 如何應用離子交換層析分離氨基酸混合物

離子交換樹脂是一種合成的高聚物,不溶於水,能吸水膨脹.高聚物分子由能電離回的極性基團及非極答性的樹脂組成.極性基團上的離子能與溶液中的離子起交換作用,而非極性的樹脂本身物性不變.通常離子交換樹脂按所帶的基團分為強酸(=R=S03H)

9. 離子交換層析法是能分離所有的氨基酸嗎

首先了解一下離抄子交襲換層析的原理,離子交換層析是用離子交換劑作固定相,利用它與流動相中的離子能進行可逆的交換性質來分離離子型化合物的層析方法。帶電荷量少,親和力小的先被洗脫下來;帶電荷量多,親和力大的後被洗脫下來。因此氨基酸由於所帶電荷量的不同而被逐一洗脫分離開。

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