『壹』 分子篩，親和，離子交換三種層析方法比較，具體蛋白質樣品如何選擇此類方法
現在做異源表達親和用的多，因為可以在目標蛋白上加入譬如6xHis這樣的標記，然後用鎳柱分離
根據目標蛋白的分子量，用分子篩根據大小來獲得目標蛋白，同時還可以除去雜質
離子交換需要你知道目標蛋白的性質，除非對該蛋白很熟悉才用
『貳』 分離純化常用的色譜分離方法有哪些它們的原理是什麼
1、色譜方法根據分離機制的不同可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠過濾內（分子容篩）色譜和親和色譜等。2、（1）吸附色譜法是指混合物隨流動相通過吸附劑時，由於該吸附劑對不同物質有不同的吸附力而使混合物分離的方法。（2）分配色譜系法是利用固定相與流動相之間對待分離組分溶解度的差異來實現分離。（3）離子交換色譜法是利用離子交換原理和液相色譜技術的結合來測定溶液中陽離子和陰離子的一種分離分析方法。凡在溶液中能夠電離的物質通常都可以用離子交換色譜法進行分離。（4）凝膠色譜法又叫凝膠色譜技術，是六十年代初發展起來的一種快速而又簡單的分離分析技術，由於設備簡單、操作方便，不需要有機溶劑，對高分子物質有很高的分離效果。（5）親和色譜法是將相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相，利用與固定相不同程度的親和性，使成分與雜質分離的色譜法。
『叄』 國家推薦分離方法除了膜法還有什麼
你的問題不具體，常用的化工和生化工程方面的分離方法包括：層析（離子交換、分子篩、親和層析）、離心、沉澱、鹽析、萃取、蒸餾/分餾、等等。根據物料要求選擇合適的分離方法。
『肆』 請教離子交換層析與親和層析方面的問題
親和層析是通過層析介質表面鍵合的配基與目標物質特異性吸附，然後非目標物流穿，再改變流動相是目標物質的特異性吸附消失，從而達到純化目的。凝膠層析是通過層析介質孔徑的設定，使分子量大小相差比較大的物質通過的路徑不一樣，從而達到分離效果。離子交換是通過層析介質表面的帶電荷的基團與目標之間產生吸附，通過改變鹽濃度使吸附力的大小改變，從而使不同的物質解吸的速度不一樣，達到分離的效果。離子交換又分陰離子交換和陽離子交換。一般來說以上三種，離子交換應用面最廣，親和特異性最好，體積排阻的話只能對分子量差距很明顯的物質進行分離。
『伍』 親和層析的原理
4 親和層析
4.1 原理 親和層析是應用生物高分子與配基可逆結合的原理,將配基通過共價鍵牢固結合於載體上而製得的層析系統.這種可逆結合的作用主要是靠生物高分子對它的配基的空間結構的識別.常用的生物親和關系有酶-底物、底物類似物、抑制劑、激活劑、輔因子,抗體-抗原,激素-受體蛋白、載體蛋白,外源凝集素-多糖、糖蛋白、細胞表面受體,核酸-互補核苷酸序列、組蛋白、核酸結合蛋白等 〔10,11〕 .
4.2 離子交換劑 親和層析的層析劑可分為3個部分:
（1）載體,載體起支架作用,一般是偶聯凝膠或多孔玻璃珠.
（2）間臂,由於生物大分子的空間位阻作用,需加一間臂,其長度具有重要作用.太長則增加了非特異性疏水吸附作用,太短則起不到應有的作用.
（3）配基,這是親和層析的核心物質,在分離中起特異性吸附欲分離物的作用.配基一般分為天然配基（包括糖結合配基和蛋白質結合配基）、染料配基、氨基酸類親和配基、核苷酸及核苷酸類似物配基和仿生配基等幾類.其中利用計算機輔助設計的仿生配基 〔12～15〕 和膜層析 〔16〕 代表了親和層析的發展方向.不僅是配基本身的結構,它們與載體的連接方法也與層析的分離能力有關 〔17〕 .
4.3 影響因素與洗脫 親和層析中配基與欲分離物吸附作用的大小主要與配基的空間結構有關,因此可以用分子間相互作用的平衡常數K D 來衡量親和作用強度 〔18〕 .但它們的結合力仍不外乎對應的功能基團之間的氫鍵、靜電作用、疏水作用等.所以,除了可改變配基以改變親和層析的作用強度以外,還可以通過改變pH和離子強度的方法來改變配基與生物大分子之間的親和力,從而達到洗脫的目的 〔19〕 .但由於親和層析的多樣性,洗脫的條件常常需要通過實驗來獲得.除此以外,還可運用其它配基、抑制劑等物質與出層析劑上的配基或生物大分子產生競爭性結合,達到洗脫的目的,這種方法被稱為專一性洗脫.專一性洗脫可以獲得很高的分辨能力,但洗脫劑的價格較高,所以常與普通洗脫配合使用.值得注意的是,在洗脫時,會有少許配基與蛋白質一同被洗脫下來,因此常在其後加一凝膠層析以除去小分子的配基.
4.4 應用及舉例 在實際使用中,配基與欲分離蛋白質之間的親和力要控制在一定的范圍之內,這是因為若親和力太低,則分離的效果不好;若親和力太高,則洗脫太困難.因此配基與欲分離蛋白質之間的K D 值一般控制在10 -4 10 -6 之間
『陸』 要通過分子篩、離子交換、親和層析從一稀蛋白混合物中純化出目的蛋白，上述三種層析的順序怎麼安排合理
濃度低的話可以先親和，減小體積。然後離子交換，最後分子篩，順便除鹽。但離子交換下來體積不能太大。否則就要先分子篩了。
『柒』 離子交換層析和親和層析都可以用來分離所有的蛋白質嗎
理論上來說離子交換層析可以用來分離所有的蛋白質，但親和層析只能內分離能和其特異性結容合或者說帶tag的蛋白質。
從實際應用來說，離子交換層析不可能能用來分離所有的蛋白質。這是因為其解析度沒有辦法達到分離所有蛋白質。而且蛋白與蛋白之間可能存在其他的相互作用，造成某個鹽濃度下被洗脫的蛋白可能會吸附其他蛋白一起被洗脫，達不到分離的效果
親和層析就更不可能分離所有的蛋白質了，不管是哪種親和層析都有對應可以特異性吸附的親和標簽蛋白。如果沒有親和標簽，所有的蛋白都是不能吸附的
『捌』 蛋白分離純化所使用的填料有哪些
從方法上來講，主要是親和層析、離子交換、分子排阻（分子篩）、疏水層析和反相層析這5種；但具體到每個實驗，就會根據您的實驗目的（蛋白的純度、活性、量產以及用途的不同），以及蛋白本身的性質不同（真核或原核、水溶性、穩定性、有無修飾、理化性質等），來設計合理的純化方法，進而選擇不同類型、解析度和性價比的填料。
一般科研實驗室，有限考慮親和層析填料，若有更高的純度要求，再考慮不同解析度的離子交換或分子篩填料。
蛋白純化，GE的填料是最豐富，也是最穩定的，你可以參考最新的GE 凝膠選擇指南。
如，我在文庫鍾搜的2014版的：
http://wenku..com/link?url=XIgERGPVdEqYRPs-_IG_-