Ⅰ 15ml,10kd超濾管轉速要多大
1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。
通常應截版留分子量不應大於權目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。
若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同,表格中有。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。
注意,一定要等離心機達到目的轉速之後,方可離開
離心機,否則離心機出問題時,無法第一時間處理,後果不可預測!膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
Ⅱ 電泳漆超濾膜使用參數是多少
流速
流速是指原液在膜表面上流動的線速度,是超濾膜系統中一項重要操作參數。流速較大時,不但造成能量浪費和產生過大壓力降,還會加速超濾膜系統膜分裂性能的衰退。反之,如果流速較小,截留物在膜表面形成的邊界層厚度增大,引起濃度極化現象,既影響了透水速率,又影響了透水質量。最佳流速是根據實驗來確定的。在允許壓力范圍內,提高供給水量,選擇最高流速,有利於中空纖維超濾膜系統膜性能的保證。
壓力和壓力降
中空纖維超濾膜系統膜的工作壓力范圍為0.1至0.6MPa,是泛指在超濾膜系統的定義域內,處理溶液通常所使用的工作壓力。分離不同分子量的物質,需要選用相應截留分子量的超濾膜系統膜,則操作壓力也有所不同
回收比和濃縮水排放量
在超濾膜系統中,回收比與濃縮水排放量是一對相互制約的因素。回收比是指透過水量與供給量之比率,濃縮水排放量是指未透過膜而排出的水量。因為供給水量等於濃縮水與透過水量之和,所以如果濃縮水排放量大,回收就比較小。為了保證超濾膜系統正常運行,應規定組件最小濃縮水排放量及最大回收比。
工作溫度
超濾膜系統膜的透水能力隨著溫度升高而增大,一般水溶液其粘度隨著溫度而降低,從而降低了流動的阻力,相應提高了透水速率。在工程設計中應考慮工作現場供給液的實際溫度。特別是季節的變化,當溫度過低時應考慮溫度的調節,否則隨著溫度的變化其透水率有可能變化幅度在50%左右,此外過高的溫度將影響膜的性能。通常情況下超濾膜系統膜的工作溫度應在25±5℃,需要在較高溫度狀態下工作則可選用耐高溫膜材料及外殼材料。
Ⅲ 超濾機和RO機的區別
超濾機和RO機的區別:
1.區別1:過濾膜使用不同
超濾膜與RO膜的區別(左側為超濾膜)超濾凈水器和RO純水機使用的過濾膜不同,超濾凈水器使用的是超濾膜而RO純水機使用的是RO反滲透過濾膜。兩者膜的平均孔徑大小不同所以過濾的效果也不同。通過超濾膜之後的凈水還能夠含有一些微量離子,但是經過RO反滲透膜凈化之後的水質基本上已經把自來水中的離子幾乎全部都吸附出去了。總的來說膜的孔徑不同所能夠凈化的能力也就不同。
2.區別2:用電不同
純水機一般都需接電超濾凈水器一般情況下是不需要用電的,而RO純水機一般都是需要通電使用的。其實這也是由於過濾膜的孔徑大小不同所造成的,由於超濾膜的孔徑相對較大通過膜兩邊的壓力差就可以實現凈化的過程,而RO反滲透膜的孔徑太小不得不利用加壓的方式進行沖擊,還有就是通過RO反滲透膜的水流量較小為了加大水流量也需要通電加壓。
3.區別3:過濾後飲水口感不同
純水的TDS值超低超濾後的水口感與純凈水的口感差不多,而RO純水機過濾後的純水則會有一絲酸澀的口感。對於長期飲用白開水和純凈水的用戶來講,超濾凈水器過濾之後的水質就可以非常的適應,因為在口感上幾乎與市面上的純凈水相差無幾。而RO純水機過濾之後的水就會顯得味道會有些不太一樣,而且喝進口中也會感覺有些粘稠。
4.區別4:出水量不同
純水出水量相對較小超濾凈水器出水量與普通自來水的出水量相差無幾,所以用戶可以實現快速的接水以及洗菜等操作。而RO純水機的過濾膜孔徑較小所以出水量相對就會小一些,有的RO純水機會自帶一個儲水桶方便用戶的用水無需等太長的時間。
5.區別5:產生廢水不同
純水機會產生廢水超濾凈水器在凈化的過程中不會產生廢水,而RO純水機則會根據設計的不同產生一定量的廢水。這也意味著RO機相比超濾機會更加廢水一些,而且產水量也更少一些。RO純水機的廢水如果放任不管不能加以利用的話還是相當浪費資源的,所以消費者在購買之前也需要考慮好這樣的一個因素。
關於超濾凈水器和RO純水機的區分其實並不難,只要消費者能夠簡單的了解一下凈水器的原理和過濾的技術就可以輕松辨別。超濾凈水器和RO純水機在過濾的效果和口感上有不小的差別,所以在消費者購買凈水器之前也建議大家在有條件的情況下可以嘗一嘗兩種水質的口感再決定購買哪一種凈水器。畢竟口感上這種東西每個人對於味道的喜好並不相同。
Ⅳ 超濾離心管怎麼使用
蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管(MWCO10kD)。也有其它型號的、不同體積大小和MWCO超濾管可選,視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預冷至4度)。膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時,【取50ul國產Bradford溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mg/ml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測】,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱,導致堵管。若發生沉澱,要確定沉澱的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,後者的方法是換不同的Buffer,直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經0.22um超濾膜超濾),再濃縮至1ml左右,連續三次,最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定,一般不多於500ul,也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作,用黃槍頭(200ul)取,輕輕順著邊緣插入槍頭,輕輕吹打、混勻蛋白液,注意不要碰到超濾膜,然後吸取濃縮液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取,否則難度太大,有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中,沒過超濾膜,防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管,重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉澱,可以先加入水,然後用槍頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉澱懸起,然後倒掉,不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時,不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml
離心管,排出部分水,然後蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來說,按照上述步驟和注意事項,每根管用三四年不會壞。
Ⅳ 我們用超濾法提取多糖,多糖分子量是63000和263000,對應的超濾孔徑應該是多少
1、一種玉米浸泡水中提取、提純脂多糖的方法,其特徵是本方法通過分別採用超濾法、等電點法、三氯乙酸法三種方法分離玉米浸泡水中的蛋白質,再用納濾膜將浸泡水濃縮,並通過乙醇沉澱法進一步分離浸泡水中的蛋白質,最後,用活性炭將脂多糖從浸泡水中提取出來:(1)等電點法分離蛋白及普通多糖:用飽和氫氧化鈉溶液調節浸泡水中的PH值到7.3,將浸泡液通過分離機分離,在每分鍾3000轉轉速下離心25分鍾,分離沉澱上清液;(2)超濾法分離蛋白及普通多糖:選用截留分子量10萬的超濾膜,對上述上清液進行超濾,取過濾液;(3)三氯乙酸法分離蛋白及普通多糖:在上述濾液中加入占其體積0.5%的三氯乙酸,攪拌30分鍾,於每分鍾3000轉條件下離心25分鍾,分離出含蛋白及普通多糖的上清液;(4)濃縮:採用納米過濾裝置,將分離蛋白及普通多糖後的浸泡水濃縮6-10倍,經納濾膜過濾,取濃縮後的浸泡水;(5)再分離:在上述濃縮浸泡水中加入濃度為95%的乙醇,使浸泡水中乙醇濃度達到30%,攪拌5分鍾,於每分鍾2600轉下離心30分鍾,分離後取上清液;(6)提取:將上述上清液PH值調整為6.50,加入占其重量1.5-2.5%的經處理的活性炭,攪拌15分鍾,靜置10分鍾,最後過濾,分離取出吸附了脂多糖活性炭;(7)提純:將吸附了脂多糖的活性炭裝填於1.6×90厘米的色譜柱中,用10毫摩爾每升三羥甲基氨基甲烷-鹽酸/10毫摩爾每升氯化鈉進行洗脫,洗脫液流速為每小時8毫升,分步收集洗脫液,每管收集4毫升,共收集52管,將第27~36管洗脫液合並,冷凍乾燥;將DEAE-葡聚糖凝膠A-50裝填於1.6×40厘米的色譜柱中。取上述乾燥產物0.25克,溶於6毫升的10毫摩爾每升三羥甲基氨基甲烷-鹽酸/10毫摩爾每升氯化鈉中,將其加入色譜柱。用濃度依次增加的三羥甲基氨基甲烷-鹽酸/氯化鈉溶液進行洗脫,同時進行分步收集。每管收集6毫升,共收集60根管,洗脫劑流速為每小時8毫升;(8)脫鹽:將第34~52根管的洗脫液合並,用葡聚糖凝膠G-15層析柱進行脫鹽,以超純水洗脫,最後凍幹得到脂多糖成品。
Ⅵ 超濾離心管用材要求
摘要 (1)選擇合適的超濾離心管。通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的產品。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同。
Ⅶ 超濾設備一般用什麼循環水泵
好像是磁力循環水泵吧,有特別小功率的,90W,260W,180W,0.75KW等等,SMF-25250的循環泵耐腐蝕,密封性好
Ⅷ 什麼是超濾機,超濾機有什麼作用
超濾機是目前市場上主流凈水器的一種,另外一種是純水機。這是一種能將溶液專進行凈化和分離的膜分離技屬術。超濾膜系統是以超濾膜絲為過濾介質,膜兩側的壓力差為驅動力的溶液分離裝置。超濾膜只允許溶液中的溶劑(如水分子)、無機鹽及小分子有機物透過,而將溶液中的懸浮物、膠體、蛋白質和微生物等大分子物質截留,從而達到凈化或分離的目的。相比較純水機,它有一個致命的缺陷,就是膜的精度不高,只有0.01微米。水質環境較差的情況下,其過濾能力較差,不能有效的起到防護作用。這極大的限制了超濾機的發展,目前市場主流的還是純水機。加拿大蘭澤、美國怡口、凱奈蒂克這些進口牌子就很不錯,還有一些國產的比方說美的、海爾之類。最終選哪個品牌,關鍵還是得看你的需要,如果家裡水質比較好,超濾機足夠了。如果水質不夠好,或者說不放心,最好還是選擇純水機。
Ⅸ 雜質沉澱,細菌菌體保留在發酵液中,離心機需要多少轉速
雜質沉澱,細菌菌體保留在發酵液中,離心機需要多少轉速
發酵液的預處理
1 加水稀釋法和加熱法
加水稀釋法能降低液體粘度,但會增加懸浮液的體積,加大後繼過程的處理任務。而且,單從過濾操作看,稀釋後過濾速率提高的百分比必須大於加水比才能認為有效,即若加水一倍,則稀釋後液體的粘度必須下降50%以上才能有效提高過濾速率。
加熱是發酵液預處理最簡單最常用的方法。加熱可有效降低液體粘度,提高過濾速率。同時,在適當溫度和受熱時間下可使蛋白質凝聚,形成較大顆粒的凝聚物,進一步改善了發酵液的過濾特性。
對於粘度較高的發酵液,稀釋或者加熱可以降低發酵液黏度,有利於輸送和過濾等後續操作。
2 離心法
國內在這方面的報道,主要反映了高速離心能耗大、設備昂貴,因而得不到推廣應用。國內有些廠家仿效國外的做法, 採用高速蝶片式噴嘴離心機分離菌體, 雖對谷氨酸菌體的除去有一定效果, 但對菌絲較輕細的肌苷菌體至今未取得滿意的結果且設備價格昂貴。
3 絮凝和凝聚及混凝方法
絮凝預處理能顯著加快發酵液中固體顆粒的沉降,提高過濾速度。李凡鋒等處理1,3-丙二醇發酵液後,其中絮凝樣的濾餅濕基、干基重量分別比對照樣增加了41.13%、51.88%。
江龍法等採用殼聚糖作為絮凝劑對L - 乳酸發酵液進行預處理,取得了較好的結果。
江龍法等用殼聚糖作絮凝劑處理谷氨酸發酵液,經處理後的發酵液菌體減少95 %以上,谷氨酸濃度沒有降低。
周榮清等的研究證明:透明質酸發酵液經絮凝預處理後,不僅可以大大改善發酵液的固液分離效果,同時其濾清液的純度亦有一定幅度的提高,在超濾過程中污染程度明顯減少,滲透通量增加。
4 調節PH值
調節pH值可以改善發酵液吸附性質和使蛋白變性。對於加入離子型絮凝劑的發酵液,調節pH可改變絮凝劑的電離度,從而改變分子鏈的伸展狀態。郝健等[7]的研究表明,pH越低,相同操作電壓下工作電流越大,脫鹽操作時間也越短,發酵液初始pH 調至6 左右為宜。
李向平等以殼聚糖為絮凝劑進行了單因素絮凝實驗,結果表明pH值和絮凝劑用量對絮凝效果影響很大。
5 加入助濾劑
助濾劑是一種不可壓縮的多孔微粒,它能使濾餅疏鬆,吸附膠體,擴大過濾面積,濾速增大。助濾劑的添加可以改善發酵液過濾性質。助濾劑作為膠體粒子的載體,均勻地分布於濾餅層中,相應地改變了濾餅結構,降低了濾餅的可壓縮性,也就減小了過濾阻力。
王曉靜等針對絮凝預處理後過濾速率慢的問題,採用添加助濾劑的方法。以粗、細2種粒度的硅藻土進行摻漿法實驗,即把助濾劑直接投到懸浮液中,目的是增大濾餅的孔隙,使液相能夠快速流出。
6 加入反應劑
改善過濾性能較好的方法是加入一些反應劑,它們能相互作用,或和某些溶解性鹽類發生反應生成不溶解的沉澱。生成的沉澱能防止菌絲體粘結,使菌絲具有塊狀結構,沉澱本身即可作為助濾劑,並且還能使膠狀物和懸浮物凝固。
例如發酵液中有不溶解的多糖存在,則最好用酶將它轉化為單糖,以提高過濾速度。加入澱粉酶後,能使過濾速度加快。
在發酵液中加入某些鹽類,可除去高價無機離子。如除去鈣離子,可加入草酸鈉,生成的草酸鈣能促進蛋白質凝固,提高溶液質量。除去鎂離子,可加入三聚磷酸鈉Na5P3O10,它與鎂離子形成不溶性絡合物。用磷酸鹽處理,也能大大降低鈣離子和鎂離子的濃度。除去鐵離子,可加入黃血鹽,使其形成普魯士藍沉澱。
7 膜處理
膜分離技術是近三十多年來發展起來的高新技術,具有高效、節能、過程簡單、容易操作和控制、不污染環境等優點。由於這些優點、使膜分離技術在短短的時間迅速發展起來,已廣泛有效地應用於石油化工、生化制葯、醫療衛生、冶金、電子、能源、輕工、紡織、食品、環保、航天、海運、人民生活等領域,形成了獨立的新興技術產業。
張月萍等用超濾膜對VB12發酵濾液進行分離,使純度提高50. 3%,收率提高12. 5%。馮建立等採用自製的超濾膜對紅黴素發酵液去乳化進行研究, 解決了絮凝法去除蛋白和多糖效果較差的問題, 同時提高了萃取的收率和質量。
以上這些方法各有特點,通常是幾種方法綜合使用,以提高發酵液預處理效率。馮聞錚等考察了溫度、酸度、絮凝劑和凝聚劑等對過濾速度和濾液效價的影響。實驗發現過濾液效價隨過濾溫度和pH 值不同而變化,實驗還發現,不同絮凝劑影響濾液效價, 以聚丙烯醯胺為最好, 外加溶劑也影響濾液效價, 乙醇使效價降低, 而丙酮和甲醛可使效價升高。
Ⅹ 超濾原理的超濾應用
超濾(Ultrafiltration)技術是一來種膜濾自法,也有錯流過濾(Cross Filtration)之稱。它能從周圍含有微粒的介質中分離出10~100A的微粒,這個尺寸范圍內的微粒,通常是指液體內的溶質。其基本原理是在常溫下以一定壓力和流量,利用不對稱微孔結構和半透膜介質,依靠膜兩側的壓力差作為推動力,以錯流方式進行過濾,使溶劑及小分子物質通過,大分子物質和微粒子如蛋白質、水溶性高聚物、細菌等被濾膜阻留,從而達到分離、分級、純化、濃縮目的的一種新型膜分離技術。