A. 為什麼做細胞實驗的PBS緩沖液不含鈣離子和鎂離子
為什麼做細胞實驗的PBS緩沖液不含鈣離子和鎂離子
含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡稱為PBS-T)
配製方法為:稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),氯化鈉(NaCl),氯化鉀(KCl),吐溫-20 ,加水。
PBS:Phosphate Buffered Saline
PBS 1L配方pH7.4:
磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g,
磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g,
氯化鈉(NaCl):8g,
氯化鉀(KCl)0.2g,
加去離子水約800mL
充分攪拌溶解,然後加入濃鹽酸調pH至7.4,最後定容到1L。高溫高壓滅菌後室溫保存。 PBS緩沖液(pH7.2~7.4):
NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 10mmol/L, KH2PO4 2mmol/L
PBS緩沖液一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用,具體試劑一般也有不同的比例配方,在針對性上就有了更好的效果。
1x PBS緩沖液就是使用0.1M的PBS配置,可直接使用,2x PBS就是2倍濃度,使用時稀釋一倍使用。0.01M的PBS一般不用來配置緩沖液,用於其它用處。
B. 為什麼細胞培養時用到的PBS經常不含有鈣鎂離子
摘要:因為鈣離子和鎂離子會影響胰酶的消化能力,導致胰酶消化能力下降,培養細胞時,消化的細胞數量有限,加上細胞的密度依賴性,所以細胞培養時最好使用不含有鈣鎂離子的PBS緩沖液。
C. 普通配置的pbs是有鈣鎂離子的嗎
為什麼做細胞實驗的PBS緩沖液不含鈣離子和鎂離子
含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡稱為版PBS-T)
配製方法為:稱取磷酸二氫鉀權(KH2PO4),磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),氯化鈉(NaCl),氯化鉀(KCl),吐溫-20
,加水。
PBS:Phosphate
Buffered
Saline
PBS
1LpH7.4:
磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g,
磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g,
氯化鈉(NaCl):8g,
氯化鉀(KCl)0.2g,
加去離子水約800mL
充分攪拌溶解,然後加入濃鹽酸調pH至7.4,最後定容到1L。高溫高壓滅菌後室溫保存。
PBS緩沖液(pH7.2~7.4):
NaCl
137mmol/L,KCl
2.7mmol/L,Na2HPO4
10mmol/L,
KH2PO4
2mmol/L
PBS緩沖液一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用,具體試劑一般也有不同的比例,在針對性上就有了更好的效果。
1x
PBS緩沖液就是使用0.1M的PBS配置,可直接使用,2x
PBS就是2倍濃度,使用時稀釋一倍使用。0.01M的PBS一般不用來配置緩沖液,用於其它用處。
D. 為什麼做細胞實驗的PBS緩沖液不含鈣離子和鎂離子
因為:pbs中加入了na2hpo4和0.24g
kh2po4,他們能與鈣離子和鎂離子,金屬離子結合生成沉澱,
附:
0.01m
磷酸鹽版緩沖液(pbs)配權制方法
稱取8g
nacl、0.2g
kcl、1.44g
na2hpo4和0.24g
kh2po4,溶於800ml蒸餾水中,用hcl調節溶液的ph值至7.4,最後加蒸餾水定容至1l即可。在15lbf/in2(1034×105pa)高壓下蒸氣滅菌(至少20分鍾),保存存於室溫或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所說的濃度0.01m
指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度,而非na
離子或k
離子的濃度,na
離子和k
離子只是用來調節滲透壓的。如果是用於免疫組化的話,則需要在配置的時候分別加入100
u/ml青黴素和鏈黴素之後再調ph、定容、滅菌消毒。
E. 為什麼做細胞實驗的PBS緩沖液不含鈣離子和鎂離子
因為來:PBS中加入了Na2HPO4和0.24g KH2PO4,他們能源與鈣離子和鎂離子,金屬離子結合生成沉澱,
附:
0.01M 磷酸鹽緩沖液(PBS)配製方法
稱取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶於800ml蒸餾水中,用HCl調節溶液的pH值至7.4,最後加蒸餾水定容至1L即可.在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌(至少20分鍾),保存存於室溫或4℃冰箱中.
需要注意的是,通常所說的濃度0.01M 指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度,而非Na 離子或K 離子的濃度,Na 離子和K 離子只是用來調節滲透壓的.如果是用於免疫組化的話,則需要在配置的時候分別加入100 u/ml青黴素和鏈黴素之後再調PH、定容、滅菌消毒.
F. 為什麼做細胞實驗的PBS緩沖液不含鈣離子和鎂離子
因為:PBS中加來入了Na2HPO4和0.24g KH2PO4,他源們能與鈣離子和鎂離子,金屬離子結合生成沉澱,
附:
0.01M 磷酸鹽緩沖液(PBS)配製方法
稱取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶於800ml蒸餾水中,用HCl調節溶液的pH值至7.4,最後加蒸餾水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌(至少20分鍾),保存存於室溫或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所說的濃度0.01M 指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度,而非Na 離子或K 離子的濃度,Na 離子和K 離子只是用來調節滲透壓的。如果是用於免疫組化的話,則需要在配置的時候分別加入100 u/ml青黴素和鏈黴素之後再調PH、定容、滅菌消毒。