⑴ 如何清洗Agilent zorbax sax色譜柱
反向沖柱,不接檢測器。如果不行,打開柱頭,超聲清洗篩板。如果填料也污染了,可以挖掉,補一些新的填料——有一定的難度。
⑵ 簡述離子交換色譜法
離子交換色譜法(ion exchange chromatography,IEC)
離子色譜分析法出現在20世紀70年代,80年代迅速發展起來,以無機、特別是無機陰離子混合物為主要分析對象。
離子交換色譜利用被分離組分與固定相之間發生離子交換的能力差異來實現分離。離子交換色譜的固定相一般為離子交換樹脂,樹脂分子結構中存在許多可以電離的活性中心,待分離組分中的離子會與這些活性中心發生離子交換,形成離子交換平衡,從而在流動相與固定相之間形成分配。固定相的固有離子與待分離組分中的離子之間相互爭奪固定相中的離子交換中心,並隨著流動相的運動而運動,最終實現分離。
表達式
離子交換色譜的分配系數又叫做選擇系數,其表達式為:
K_s=\frac{[RX^+]}{[X^+]}
其中[RX + ]表示與離子交換樹脂活性中心結合的離子濃度,[X + ]表示游離於流動相中的離子濃度
分離原理
離子交換色譜(ion exchange chromatography,IEC)以離子交換樹脂作為固定相,樹脂上具有固定離子基團及可交換的離子基團。當流動相帶著組分電離生成的離子通過固定相時,組分離子與樹脂上可交換的離子基團進行可逆變換。根據組分離子對樹脂親合力不同而得到分離。
陽離子交換:
陰離子交換:
式中"--"表示在固定相上,Kxy和Kzm是交換反應的平衡常數,Z+和X-代表被分析的組分離子。M+和Y-表示樹脂上可交換的離子團。
離子交換反應的平衡常數分別為:
陽離子交換:
陰離子交換:
平衡常數K值越大,表示組分的離子與離子交換樹脂的相互作用越強。由於不同的物質在溶劑中離解後,對離子交換中心具有不同的親合力,因此具有不同的平衡常數。親合力大的,在柱中的停留時間長,具有高的保留值。
固定相
離子交換色譜常用的固定相為離子交換樹脂。目前常用的離子交換樹脂分為三種形式,一是常見的純離子交換樹脂。第二種是玻璃珠等硬芯子表面塗一層樹脂薄層構成的表面層離子交換樹脂,第三種為大孔徑網路型樹脂。它們各有特點,例如第二種樹脂有很高的柱效,但它的柱容量不大;第三種樹脂適用於非水溶液中物質的分離,因為它們的孔徑和內表面積大,不需要用水溶脹,便可滿意地使用。
典型的離子交換樹脂是由苯乙烯和二乙烯基苯交聯共聚而成:
其中,二乙烯基苯起了交聯和加牢整個構型的作用,其含量決定了樹脂交聯度大小。交聯度一般控制在4%~16%范圍內,高度交聯的樹脂較硬而且脆,也較滲透,但選擇性較好。在基體網狀結構上引入各種不同酸鹼基團作為可交換的離於基團。
按結合的基團不同,離子交換樹脂可分為陽離子交換樹脂和陰離子交換樹脂。陽離子交換樹脂上具有與樣品中陽離子交換的基團。陽離子交換樹脂又可分為強酸性和弱酸性樹脂。強酸性陽離子交換樹脂所帶的基團為磷酸基(一),其中和有機聚合物牢固結合形成固定部分,是可流動的能為其他陽離子所交換的離子。
陰離子交換樹脂具有與樣品中陰離子交換的基團。陰離子交換樹脂也可分為強鹼性和弱鹼性樹脂。
陰離子交換樹脂屬強鹼性,它是由有機聚合物骨架和一季胺鹼基團所組成,它帶有正電荷。而與相反的是可以移動的部分,它能被其它陰離子所交換
流動相
離子交換色譜的流動相最常使用水緩沖溶液,有時也使用有機溶劑如甲醇,或乙醇同水緩沖溶液混合使用,以提供特殊的選擇性,並改善樣品的溶解度。
離子交換色譜所用的緩沖液,通常用下列化合物配製:鈉、鉀、被的檸檬酸鹽,磷酸鹽,甲酸鹽與其相應的酸混合成酸性緩沖液或氫氧化鈉混合成鹼性緩沖液等。
⑶ 強陽離子交換(SCX)色譜柱與以強陽離子交換鍵和硅膠為填充劑的柱子有什麼區別
強陽離子交換(SCX)色譜柱與以強陽離子交換鍵和硅膠為填充劑的柱子有什麼區別
⑷ 離子交換色譜柱和離子排阻色譜柱分離物質原理的區別
色譜過程的本質是待分離物質分子在固定相和流動相之間分配平衡的過程,不同的物質在兩相之專間的分配屬會不同,這使其隨流動相運動速度各不相同,隨著流動相的運動,混合物中的不同組分在固定相上相互分離。根據物質的分離機制,又可以分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜等類別。 吸附色譜利用固定相吸附中心對物質分子吸附能力的差異實現對混合物的分離,吸附色譜的色譜過程是流動相分子與物質分子競爭固定相吸附中心的過程
⑸ 有人用過Hypersil-SAX色譜柱嗎
本次主要講解了以下六個方面的內容:一、高效液相色譜法原理與方法發展二、高效液相色譜儀的原理、結構、使用和維護三、樣品制備四、色譜柱的原理、選擇及維護五、高效液相色譜數據處理及定性與定量分析六、高效液相色譜儀在各領域的應用由於。
⑹ 分配色譜,吸附色譜和離子交換色譜各是什麼它們的區別
吸附色譜
吸附色譜利用固定相吸附中對物質分子吸附能力的差異實現對混合物的分離,吸附色譜的色譜過程是流動相分子與物質分子競爭固定相吸附中心的過程
吸附色譜的分配系數表達式如下:
⑺ sax 色譜柱和離子色譜柱可以通用嗎
sax 色譜柱和離子色譜柱可以通用
高效色譜柱可以通過陰陽離子交換色譜方式進行分析和分離生物分子的.在任何一種離子交換模式下,產品既有甲基丙烯酸基體,又有硅膠基體的色譜柱.蛋白質、多肽、DNA和寡核苷酸衍生出來的RNA以及其它的核酸片斷是TSK-GE陰離子交換分析和分離的典型樣品.
我公司提供分析柱(4.6和7.5mm內徑)和半制備柱(21.5和55mm內徑).顆粒范圍從快速質量控制和工藝檢測的2μm到工藝規模分離的20μm大型顆粒.由於陰離子交換柱是基於聚苯烯基體材料,他們最適合用於分析小分子量的糖類氨基酸類、核酸鹼基,以及小的備選葯物.
TSK-GEL 離子交換色譜柱特性及優點
TSK-GEL 陽離子交換色譜柱特點:
TSKgel BioAssist S 色譜柱具有獨特的孔結構和結合特性,對中到大分子量的蛋白質具有較高的結合容量.
BioAssist 色譜柱有內徑為4.6mm或者10mm的PEEK 材質,也有分析,半制備和制備應用的玻璃柱和不銹鋼柱.
TSKgel CM-3SW 色譜柱具有小孔徑和較大的表面積,對小到中等分子量的蛋白質的結合量近似為TSKgel CM-5PW色譜柱的兩倍.
TSKgel SP-5PW有內徑為2mm的色譜柱,可應用於LC-MS分析.
⑻ 從分析原理簡述hplc中,離子交換色譜,離子對色譜及離子色譜有何異同
離子色譜原理與離子交換色譜原理類似,離子色譜後一般使用電化學內檢測器進行檢測,適容用於分析無機與有機陰陽離子和氨基酸,以及糖類和DNA、RNA的水解產物等;離子對色譜主要是補充離子抑制色譜的不足,離子抑制色譜是指在流動相中加入弱酸或弱鹼來抑制待測組分的離解,提高k值以利於組分的分離,一般針對酸性待測組分,可在流動相中加入弱酸,使待測組分減少在流動相中的離解,加強與固定相的分配,適用於有機弱酸鹼或兩性化合物的檢測,但由於色譜柱一般是硅膠基質化學鍵合相色譜,其酸度耐受范圍是2-8,因此在加入酸鹼調節劑時還要兼顧流動相pH,導致無法通過此方法分析強酸強鹼,因此引入離子對色譜,在流動相中加入可與強酸強鹼抑制的離子對,通常分析鹼加入烷基磺酸鈉,分析酸加入季胺鹽,適用於較強有機酸鹼的分析。
⑼ 離子交換色譜法的原理、裝置及應用是什麼
一、原理:離子抄交換色譜(ion exchange chromatography,IEC)以離子交換樹脂作為固定相,樹脂上具有固定離子基團及可交換的離子基團。當流動相帶著組分電離生成的離子通過固定相時,組分離子與樹脂上可交換的離子基團進行可逆變換。根據組分離子對樹脂親合力不同而得到分離。
二、裝置:
1、分離柱:裝有離子交換樹脂,如陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂或螯合離子交換樹脂。
2、抑制柱和柱後衍生作用:常用的檢測器不僅能檢測樣品離子,而且也對移動相中的離子有響應,所以必須消除移動相離子的干擾。
3、檢測器:分為通用型和專用型。通用型檢測器對存在於檢測池中的所有離子都有響應。離子色譜中最常用的電導檢測器就是通用型的一種。
三、應用:
離子色譜主要用於測定各種離子的含量,特別適於測定水溶液中低濃度的陰離子,例如飲用水水質分析,高純水的離子分析,礦泉水、雨水、各種廢水和電廠水的分析,紙漿和漂白液的分析,食品分析,生物體液(尿和血等)中的離子測定,以及鋼鐵工業、環境保護等方面的應用。
⑽ 什麼叫色譜柱,什麼叫離子交換劑,什麼叫固定相啊
色譜是利用待抄分離組分在兩種萃取劑中的分配比差異來進行分離的。 實際操作中,會把一種萃取劑裝填到一根玻璃管或者不銹鋼管里,加上待分離組分以後,用另一種萃取劑去洗脫。 這根裝有萃取劑的管子就是色譜柱,裡面填充的萃取劑因為不會移動,就叫做固定相。聰明的你一定就明白另一種用來洗脫的萃取劑就叫做流動相了。
在離子色譜里不是這么簡單的吸附-洗脫過程 ,而是用離子交換的過程來替代,因此用到的就是離子交換劑,其實也是固定相,但是利用的是離子交換速率的差異了。