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蛋白超濾管堵了怎麼辦

發布時間:2021-03-31 18:55:50

① 蛋白在超濾管濃縮過程中出現沉澱怎麼辦

1、選擇合抄適的超濾管,主要考慮襲MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。
通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。
若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同,表格中有。

2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。

3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。

注意,一定要等離心機達到目的轉速之後,方可離開
離心機,否則離心機出問題時,無法第一時間處理,後果不可預測!膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。

② picc管堵住了怎麼辦

如果是在外面,體外導管妥善固定,斷的那頭千萬不要滑進去,注意不要讓空氣進到導管里,封閉好去醫院。如果堵住的已經進入體內,千萬不要劇烈運動,上臂處扎緊,避免導管越滑越深進入心臟,馬上就醫。

1、沖管時最後05毫升要變推邊退針。

2、用脈沖式沖管法,0.9%氯化鈉注射液至少10ml注射器10ml脈沖式沖管,力度適中。

先製作PICC導管封管液:1.6ml肝素鈉加入100ml生理鹽水中,配成每毫升含有100單位肝素封管液。然後使用2—3ml肝素鹽水脈沖式封管就可以了。


(2)蛋白超濾管堵了怎麼辦擴展閱讀:

封管液的量及封管時間

生理鹽水5—10毫升停止輸液後每隔6-8小時沖管一次;肝素鈉溶液3-5毫升,輸完液後沖管,抗凝作用可持續12小時以上。不宜使用肝素鈉的某些患者,兩次輸液時間較近的患者可選用生理鹽水作為封管液。

方法得當,可延長置管時間,防止並發症的發生。通常採用正壓封管,將封管液3~5ml從肝素帽處的輸液針頭內先緩慢推注2~3 ml,再邊推余液邊拔出輸液針頭,使封管液充滿整個官腔(以拔出針頭是針尖有液體溢出為佳)。

抗凝作用可持續12小時以上;不宜使用肝素鈉的某些患者,兩次輸液時間較近的患者可選用生理鹽水作為封管液。

③ 我的超濾被尿素結晶堵住了怎麼清洗啊

應該是尿結石,要到醫院去做彩超,確定一下你要結石的大小,如果大的話要證實,如果小的話,通過吃中葯或者是運動就可以掉了

④ 超濾離心管離心蛋白時離心幹了怎麼辦

不建議用離心管離蛋白。最好還是膜處理比較好。
蛋白會粘附在渣里,只有用緩沖液再潤洗咯。

⑤ 蛋白用超濾管濃縮容易沉澱怎麼辦

可能是抄這個蛋白的水溶性較差,也就是只能保持在一定濃度不能太高
另外就和這個蛋白的穩定性有關了,超濾時保持低溫,體積縮小一點後就把濾液混勻避免局部濃度過高,選擇更合適的緩沖液,添加一點甘油等小分子物質等都可以增加蛋白的穩定性。

⑥ 超濾離心管怎麼使用

蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管(MWCO10kD)。也有其它型號的、不同體積大小和MWCO超濾管可選,視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預冷至4度)。膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時,【取50ul國產Bradford溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mg/ml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測】,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱,導致堵管。若發生沉澱,要確定沉澱的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,後者的方法是換不同的Buffer,直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經0.22um超濾膜超濾),再濃縮至1ml左右,連續三次,最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定,一般不多於500ul,也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作,用黃槍頭(200ul)取,輕輕順著邊緣插入槍頭,輕輕吹打、混勻蛋白液,注意不要碰到超濾膜,然後吸取濃縮液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取,否則難度太大,有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中,沒過超濾膜,防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管,重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉澱,可以先加入水,然後用槍頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉澱懸起,然後倒掉,不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時,不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml
離心管,排出部分水,然後蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來說,按照上述步驟和注意事項,每根管用三四年不會壞。

⑦ 超濾機出現嚴重堵塞,拆開發現膜內有一種透明的\粘性很強的物質.

自來水廠一般都會投加助凝劑PAM,雖然少量,但是也會被截留在超濾膜表面回上了,你的PP棉是1~答5um的吧,也會截留一部分哦~~時間長了積累多了就堵塞超濾膜 ~~像鼻涕一樣的白色透明膠體~~~超濾膜系統要加強反洗(葯洗),自動沖洗的周期設置得短一些,例如原來30分鍾的反沖,設置為20分鍾一次·····如有可能,超濾膜的運行模式採用外壓膜,反沖洗時採用氣水同時反沖,膜會干凈很多,,PP棉就沒辦法了,只能更換~~~

⑧ 為什麼電泳超濾管這么容易堵塞

電泳超濾管易堵塞主要原因是濃差極化造成的,從長期說,超濾管堵塞是必然的,專使用屬時間的長短在於使用時設備的的維護保養。
要盡可能消除濃差極化造成超濾管的堵塞,關鍵是保證超濾管的入口流量與濾液流量的比值控制在19:1左右,具體在生產實際中這個參數是以壓力來控制的,一般來說,超濾管的入口壓力為0.3~0.4Mpa,入口/出口壓差<0.25Mpa為宜,壓差越小,濃差極化的影響越小,但濾液量也隨之變小。
通常在生產中由於濃差極化等原因超濾管會逐漸堵塞造成濾液量減少,操作人員為了增加濾液量,調節入口/出口壓力差在一定范圍內是可以的,但壓差不宜超過設定值,超過了由於濃差極化會加速超濾管堵塞,在這種情況下應對超濾管進行反洗保養。
在電泳塗裝中,要減低超濾管堵塞的辦法,其一,保證電泳液的成分參數的穩定;其二,在濾液量滿足要求的前提下,採取低壓差來減低超濾管堵塞;其三,定期反洗超濾管,或濾液量下降到一定值時及時反洗保養。

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