『壹』 動物肝臟研磨而成的勻漿液離心後的結果
DNA提取的實驗步驟：
1．取新鮮動物肝，除去結締組織，用0.14mol／LNaCl－0.15mol／L EDTA溶液洗去血液。在冰浴中切成小塊，稱取10g，加入兩倍體積0.14mol／LNaCl－0.15mol／L EDTA溶液，於研缽中研磨至勻漿，以3000r／min的轉速離心10min。
•2．在上述沉澱物中加入0.14mol／LNaCl－0.15mol／L EDTA溶液，使總體積為20mL，然後在60℃下，滴加20％SDS溶液1mL，邊加邊攪拌，再搖動10min，使核酸與蛋白質分離。
•3. 邊攪拌邊加固體氯化鈉2g，使其最終濃度達到l.4mol／L，再搖10min。
•4．加等體積的氯仿一異戊醇，輕混，靜置，離心管內的物質分為三層，上層為含DNA的水相層，下層為氯仿一異成醇混合物，中間層為變性蛋白凝膠。吸出上清液,倒入另一離心管。
•5．加1/2體積的氯仿一異戊醇混合液，振搖20min，以3000r／min的轉速離心10min。
•6．吸出上清液，加入2倍體積95％乙醇溶液（預冷），產生沉澱。
·①用玻棒攪拌，DNA的絲狀物即纏在玻棒上，用80％乙醇溶液洗滌一次。
·②再以4000r／min的轉速離心溶液10min，棄去上清液，沉澱用80％乙醇溶液再離心洗滌一次。
•7．將沉澱置於吸水紙上，除盡乙醇，室溫自然乾燥後，加入1ml 蒸餾水，使DNA充分溶解，待用。
核酸提取過程中的注意事項：
（1）避免過酸過鹼或高溫環境，合適的T：0－4℃，
pH4-9；
（2）防止機械力的切割作用，避免劇烈振盪；
（3）防止核酸酶的降解作用，可加入抑制劑－EDTA，檸檬酸鈉；
（4）整個操作步驟應盡量簡化，縮短實驗過程，減少核酸變性、降解、機械切割的機會。
得到的是DNA粗提取液。
『貳』 ELISA試劑盒中，組織樣本用什麼勻漿液來進行組織勻漿
組織勻漿，都是按照10%進行勻漿,即1g組織加9ml的勻漿液，勻漿液可以選取生理鹽水，也可以選取PBS,但首選是PBS,PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol.
『叄』 過濾器有哪些種類型號和作用如何選擇適合的過濾設備
過濾器的分類：
1.過濾器根據功能可分為自清洗過濾器、全自動過濾器、刷式內過濾器、彈性過濾器等；容
2.過濾器根據類型可分為：保安過濾器，精密過濾器，碳鋼化過濾器，濾芯式過濾器，無菌水箱，不銹鋼袋式過濾器，不銹鋼機械過濾器，不銹鋼臭氧混合塔，不銹鋼罐體，不銹鋼混床，油精密過濾器，單級過濾器，兩級/雙級過濾器，三級過濾器，透明過濾器，壓差過濾器，pp過濾器；
3.根據濾料和材質可分為：濾芯式過濾器,不銹鋼袋式過濾器，不銹鋼機械過濾器，碳鋼過濾器，多介質過濾器，軟化水過濾器,活性炭過濾器,石英砂過濾器,纖維過濾器,錳砂過濾器，除鐵錳過濾器。
過濾器的作用：
1.精密過濾器，袋式過濾器等高精度過濾器，一般用來過濾小粒徑固體懸浮物、膠體等雜質
2.活性炭過濾器一般用來吸附有機物，色素等
3.軟化水過濾器一般用來降低水的硬度
4.石英砂過濾器，錳砂過濾器，機械過濾器，碳鋼過濾器等高效過濾器，一般用來高效過濾大流量水中的固體雜質。
如何選擇合適的過濾設備？
過濾設備的選擇，是要根據原水水質參數，處理水量，出水要求等要求來選擇的。
『肆』 高中生物，細胞勻漿濾液一般有什麼作用
可以利用差速離心法把葉綠體和線粒體分離。原理是利用葉綠體和線粒體的質量和密度不同，通過不同轉速的離心使葉綠體和線粒體分離。
『伍』 生物化學實驗，在用濃鹽法提取dna時，肝細胞的勻漿液，經過離心為什麼保留沉澱而不要上清液為什麼提
因為肝細胞勻漿只是部分肝細胞膜破了，而核膜是沒有破的，因此上清中都是水和蛋白，而細胞核及裡面的核酸在沉澱裡面。
『陸』 ELISA試劑盒中，組織樣本用什麼勻漿液來進行組織勻漿
組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重後將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，並做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，於冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。最後將勻漿液於5000×g離心5~10分鍾，取上清檢測。BIM試劑盒為您提供
『柒』 如何分離細胞核與線粒體
細胞核與線粒體的分級分離
一、原理
細胞內不同結構的比重和大小都不相同，在同一離心場內的沉降速度也不相同，根據這一原理，常用不同轉速的離心法，將細胞內各種組分分級分離出來。
分離細胞器最常用的方法是將組織製成勻漿，在均勻的懸浮介質中用差速離心法進行分離，其過程包括組織細胞勻漿、分級分離和分析三步，這種方法已成為研究亞細胞成分的化學組成、理化特性及其功能的主要手段。
勻漿(Homogenization)低溫條件下，將組織放在勻漿器中，加入等滲勻漿介質(即0.25mol／L蔗糖一0.003mol／L氯化鈣)進行破碎細胞使之成為各種細胞器及其包含物的勻漿。
分級分離(Fractionation)由低速到高速離心逐漸沉降。先用低速使較大的顆粒沉澱，再用較高的轉速，將浮在上清液中的顆粒沉澱下來，從而使各種細胞結構，如細胞核、線粒體等得以分離。由於樣品中各種大小和密度不同的顆粒在離心開始時均勻分布在整個離心管中，所以每級離心得到的第一次沈澱必然不是純的最重的顆粒，須經反復懸浮和離心加以純化。
分析 分級分離得到的組分，可用細胞化學和生化方法進行形態和功能鑒定。
二、細胞核的分離提取
(一)操作步驟
1．用頸椎脫位的方法處死小白鼠後，迅速剖開腹部取出肝臟，剪成小塊(去除結締組織)盡快置於盛有0.9％NaCl的燒杯中，反復洗滌，盡量除去血污，用濾紙吸去表面的液體。
2．將濕重約1g的肝組織放在小平皿中，用量筒量取8ml預冷的0.25mol／L蔗糖一0.003mol／L氯化鈣溶液，先加少量該溶液於平皿中，盡量剪碎肝組織後，再全部加入。
3．剪碎的肝組織倒入勻漿管中，使勻漿器下端浸入盛有冰塊的器皿中，左手持之，右手將勻漿搗桿垂直插入管中，上下轉動研磨3～5次，用3層紗布過濾勻漿液於離心管中，然後制備一張塗片①，做好標記，自然乾燥。
4．將裝有濾液的離心管配平後，放入普通離心機，以2500rpm，離心15分鍾；(1)緩緩取上清液，移入高速離心管中，保存於有冰塊的燒杯中，待分離線粒體用；(2)同時塗一張上清液片②做好標記，自然乾燥；(3)餘下的沉澱物進行下一步驟。
5．用6ml0.25mol/L蔗糖一0.003mol／L氯化鈣溶液懸浮沉澱物，以2500rpm離心15分鍾棄上清，將殘留液體用吸管吹打成懸液，滴一滴於干凈的載玻片上，塗片③，自然乾燥。
6．將①、②、③塗片用l％甲苯胺蘭染色後蓋片即可觀察。
(二)結果
分別於高倍鏡下觀察三張塗片，描述鏡下所見。
三、高速離心分離提取線粒體
(一)操作步驟
1．將裝有上清液的高速離心管，從裝有冰塊的燒杯中取出，配平後，以17000rpm離心20分鍾，棄上清，留取沉澱物。
2．加入0．25mol／L蔗糖一0．003mol／L氯化鈣液lml，用吸管吹打成懸液，以17000rpm離心20分鍾，將上清吸入另一試管中，留取沉澱物，加入0.1ml 0．25mol／L蔗糖一0.003mol／L氯化鈣溶液混勻成懸液(可用牙簽)。
3．取上清液和沉澱物懸液，分別滴一滴於干凈載玻片上(分別標記④、⑤塗片)，各滴一滴0.02％詹納斯綠B染液蓋上蓋片染20分鍾。
(二)結果
油鏡下觀察，顆粒狀的線粒體被詹納斯綠B染成藍綠色。
『捌』 能從組織勻漿液中直接檢測dna病毒嗎
可以的，直接將組織均漿液8000rpm離心5min，取上清為模版直接PCR檢測。蛋白水平的直接加Buffer煮了做WB，也可以檢測。
『玖』 ELISA 實驗注意事項知多少
?優質的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果准確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內醫學檢驗一般均用板式。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點（珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應用，兩者均有詳細的使用說明，須嚴格遵照規程操作）。
標本的採取和保存
通常我們可用於ELISA檢測的樣本是有多種類型的，如血清、血漿、尿液、細胞培養上清或組織勻漿液等，不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。正確的處理樣本是保證ELISA檢測的正確性和准確性的第一步，下面簡單介紹一下不同類型的樣本的處理方法。
血清
血清是最常用於ELISA檢測的一類樣本，處理也比較簡單。
用無熱原、無內毒素的試管或離心管採集血液標本，將試管或離心管室溫放置2小時或4℃過夜，使血清析出。（最好將試管或離心管傾斜放置，使液面橫截面增大，能使血清更大程度的析出。）4℃1000×g離心20min，仔細收集上清。建議將血清分裝多份，-20℃或-80℃保存，避免反復凍融。
采血過程中應避免溶血，因為紅細胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質，在以HRP為標記的ELISA檢測中會有非特異性的顯色，而導致檢測的不準確性。同時也應避免細菌污染，因為菌體內可能含有內源性的HRP從而導致檢測的假陽性。
血漿
用含抗凝劑的采血管或離心管採集血液標本，標本採集後30min內4℃1000×g離心15min，取上清即血漿。將上清分裝多份，-20℃或-80℃保存，避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。
常用的抗凝劑為EDTA、肝素鈉和枸櫞酸鈉等，檢測時還應仔細閱讀試劑盒說明書，檢查試劑盒是否對抗凝劑有特殊要求。
細胞培養上清
取細胞培養上清到離心管，1000×g離心20min，除去細胞碎片及雜質，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復凍融。
細胞裂解液
1) 吸去培養板內的培養基，用胰酶消化細胞，加適量培養基將細胞從培養板上吹下來。懸浮細胞可省略。
2) 收集細胞懸液，1000×g離心10min，棄去培養基，用預冷的PBS潤洗3次。
3) 加入適量的預冷PBS或細胞裂解液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）重懸細胞。通常6孔板一個孔的細胞量需要150~250μL PBS重懸。
4) 將樣品放入-20℃或-80℃，使樣品冷凍，再放室溫解凍樣品，反復凍融幾次，使細胞充分裂解。也可將樣品進行超聲破碎，以達到裂解的目的。
5) 4℃10000×g 離心10min，除去細胞碎片，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復凍融。
組織勻漿液
1) 將組織樣本用PBS (0.01M, PH 7.4) 沖洗，洗去組織表面殘留的血液或雜質。
2) 將組織塊稱重，記錄後剪碎，碎塊應盡量小，便於勻漿得更充分。
3) 將組織按一定的比例加入預冷的PBS（臨用前加入蛋白酶抑制劑）勻漿，勻漿時置於冰上或冰浴中。（通常按組織重量：PBS體積=1:9的比例勻漿，例如1g的組織樣本對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，檢測後計算樣品濃度時應乘以相應的稀釋倍數）。
4) 吸取勻漿液到離心管，4℃5000×g 離心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復凍融。
尿液、唾液等其他液體生物樣本
1000×g離心20min，取上清即可檢測。
總的來說，因為ELISA只能檢測可溶性蛋白的含量，所以應保證所有樣本均為澄清的液體，沉澱或懸浮物都應離心去除。
為了保證檢測的准確性，保存於-20℃或-80℃的樣本最好在1~6個月內檢測；4℃保存的樣本應在1周內進行檢測。
另外，還應保證樣本不含NaN3，因為NaN3會抑制HRP的活性，從而導致假陰性的結果。
試劑的准備
按試劑盒說明書的要求准備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用於洗滌的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液、洗滌液應用pH計測量。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡後使用，一般室溫平衡不低於30min。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。
加樣
在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，並注意不可濺出，不可產生氣泡。
加標本一般用微量加樣器，按規定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以免發生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣（一般不建議使用）。有些指標檢測（如間接法ELISA）需用稀釋的血清，可在試管中按規定的稀釋度稀釋後再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標本，然後在微型震盪器上震盪1min。加酶結合物工作液和底物工作液時可用多道移液器，使加液過程在最短時間內完成。
保溫
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物後。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育。
ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標本，其中的抗原並不是都有均等的和固相抗結合的機會，只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經擴散才能達到反應的終點。在其後加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是為什麼ELISA反應總是需要一定時間的溫育。
溫育常採用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數抗原抗體結合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時，兩次抗原抗體反應一般在37℃經1-2小時，產物的生成可達頂峰。為加速反應，可提高反應的溫度，有些試驗在43℃進行，但不宜採用更高的溫度。抗原抗體反應4℃更為徹底，在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜，以形成最多的沉澱。但因所需時間太長，在ELISA中一般不予採用。
保溫的方式除有的ELISA儀器附有特製的電熱塊外，一般均採用水浴，可將ELISA板置於水浴箱中，ELISA板底應貼著水面，使溫度迅速平衡。為避免蒸發，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時可讓反應板漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA板應放在濕盒內，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，最後將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度，特別是在氣溫較低的時候更應如此。為避免酶標板底部受水汽或磨損導致的讀數誤差，一般採用鼓風恆溫箱保溫，這個過程必須在酶標板上方貼封紙，以免蒸發。無論是水浴還是濕盒溫育，反應板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應，操作時的室溫應嚴格限制在規定的范圍內，標准室溫溫度是指20-25℃，但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。室溫溫育時，ELISA板只要平置於操作台上即可。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求准確。為保證時間精確，一個人一次不宜多於兩塊板同時操作、測定。
洗滌
洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟，但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質，以及在反應過程中非特異性地吸附於固相載體的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，而在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。可以說在ELISA操作中，洗滌是最主要的關鍵技術，應引起操作者的高度重視，操作者應嚴格按要求洗滌，不得馬虎。
洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外，手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種，過程如下：
（1）浸泡式：a.吸干或甩干孔內反應液；b.用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔後，即甩去）；c.浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2min，間歇搖動，浸泡時間不可隨意縮短；d.吸干孔內液體。吸干應徹底，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體後在清潔毛巾或吸水紙上拍干；e.重復操作c和d，洗滌3-4次（按說明規定）。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數或延長浸泡時間。
微量滴定板多採用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質的結合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團，也含親水基團，其疏水基團與蛋白質的疏水基團借疏水鍵結合，從而削弱蛋白質與固相載體的結合，並藉助於親水基團和水分子的結合作用，使蛋白質回復到水溶液狀態，從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高於0.2%時，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。
（2）流水沖洗式：流水沖洗法最初用於小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗，持續沖洗2min後，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2min，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為徹底，且也簡便、快速。已有實驗表明，流水沖洗式同樣也適用於微量滴定板的洗滌。洗滌時設法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果更佳（此方法試劑盒較少採用）。
顯色和比色
顯色
顯色是ELISA中的最後一步溫育反應，此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內，陰性孔可保持無色，而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助於加速顯色進行。在定量測定中，加入底物後的反應溫度和時間應按規定力求准確。定性測定的顯色可在室溫進行，時間一般不需要嚴格控制，有時可根據陽性對照孔和陰性對照孔的顯色情況適當縮短或延長反應時間，及時判斷。
OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應20-30min後即不再加深，再延長反應時間，可使本底值增高。OPD底物液受光照會自行變色，顯色反應應避光進行，顯色反應結束時加入終止液終止反應。OPD產物用硫酸終止後，顯色由橙黃色轉向棕黃色。
TMB受光照的影響不大，可在室溫中置於操作台上，邊反應觀察結果。但為保證實驗結果的穩定性，宜在規定的適當時間閱讀結果。TMB經HRP作用後，約40min顯色達頂峰，隨即逐漸減弱，至2小時後即可完全消退至無色。TMB的終止液有多種，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉（SDS）等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間（12-24小時）不褪，是目視判斷的良好終止劑。此外，各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色，此時可用特定的波長（450nm）測讀吸光值。
比色
比色前應先用潔凈的吸水紙拭乾板底附著的液體，但應盡量避免刮花表面，然後將板正確放入酶標比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗，需先將板置於標准96孔的座架中，才可進行比色。最好在加底物液顯色前，先將軟板邊緣剪凈，這樣，此板就可完全平妥坐入座架中。
比色時應先以蒸餾水校零點，測讀底物孔（未經任何反應僅加底物液的孔）和空白孔（以生理鹽水或稀釋液代替標本作全過程的孔），以記錄本次試驗的試劑狀況。其後可用空白孔以蒸餾水校零點，以上各孔的吸光度需減去空白孔的吸光度，然後進行計算。
比色結果的表達以往通用光密度（oplical density，OD），現按規定用吸光度（absorbence，A），兩者含義相同。通常的表示方法是，將吸收波長寫於A字母的右下角，如OPD的吸收波長為492nm，表示方法為"A492nm"或"OD492nm"。
酶標比色儀
酶標比色儀簡稱酶標儀，通常指專用於測讀ELISA結果吸光度的光度計。針對固相載體形式的不同，各有特製的適用於板、珠和小試管的設計。許多試劑公司配套供應酶標儀。酶標儀的主要性能指標有：測讀速度、讀數的准確性、重復性、精確度和可測范圍、線性等等。優良的酶標儀的讀數一般可精確到0.0 01，准確性為±1%，重復性達0.5%。舉例說，若某孔測得的A值為1.083，則該孔相對於空氣的真實A值應為1.083± 0.01(1.073~1.093），重復測定數次，其A值均應1.083±0.05（1.078~1.088）在之間。酶標儀的可測范圍視各酶標儀的性能而不同。普通的酶標儀在0.000~2.000，新型號的酶標儀上限拓寬達2.900，甚至更高。超出可測上限的A值常以"*"或"over"或其它符號表示。應注意可測范圍與線性范圍的不同，線性范圍常小於可測范圍，比如某一酶標儀的可測范圍為0.000~2.900，而其線性范圍僅0.000~2.000，這在定量ELISA中製作標准曲線時應予注意。
酶標儀不應安置在陽光或強光照射下，操作時室溫宜在15~30℃，使用前先預熱儀器15-30min，測讀結果更穩定（也有一些酶標儀說明書上明確標明不需要預熱）。
測讀A值時，要選用產物的敏感吸收峰，如OPD用492nm波長。有的酶標儀可用雙波長式測讀，即每孔先後測讀兩次，第一次在最適波長（W1），第二次在不敏感波長（W2），兩次測定間不移動ELISA板的位置。例如OPD用492nm為W1，630nm為W 2，最終測得的A值為兩者之差（W1-W2）。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
各種酶標儀性能有所不同，使用中應詳細新聞記者說明書。
結果判斷
定性測定
定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答，分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定系統中有反應。"陰性"則為無反應。用定性判斷法也可得到半定量結果，即用滴度來表示反應的強度，其實質仍是一個定性試驗。在這種半定量測定中，將標本作一系列稀釋後進行試驗，呈陽性反應的最高稀釋度即為滴度。根據滴度的高低，可以判斷標本反應性的強弱，這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性、弱陽性更具定量意義。
在間接法和夾心法ELSIA中，陽性孔呈色深於陰性孔。在競爭法ELISA中則相反，陰性孔呈色深於陽性孔。兩類反應的結果判斷方法不同，分述於下。
（1）間接法和夾心法
這類反應的定性結果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近於無色者判為陰性，顯色清晰者為陽性。但在ELSIA中，正常人血清反應後常可出現呈色的本底，此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異，因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結果時，更宜用顯色深於陰性對照作為標本陽性的指標。
目視法簡捷明了，但頗具主觀性。在條件許可下，應該用比色計測定吸光值，這樣可以得到客觀的數據。先讀出標本（sample，S）、陽性對照（P）、和陰性對照（N）的吸光值，然後進行計算。計算方法有多種，大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。
a．陽性判定值
陽性判定值（cut-off value）一般為陰性對照A值加上一個特定的常數，以此作為判斷結果陽性或陰性的標准。
用此法判斷結果要求實驗條件十分恆定，試劑的制備必須標准化，陽性和陰性的對照品應符合一定的規格，須配用精密的儀器，並嚴格按規定操作。陽性判定值公式中的常數是在這特定的系統中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。現舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿，陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng /ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值後，先計算陰性對照A值的平均數（NC X ）和陽性對照A值的平均數（PCX），兩個平均數的差（P-N）必須大於一個特定的數值（例0.400），試驗才有效。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX，並≤1.5×NCX，如其中之一超出此范圍，則棄去，而以另兩個陰性對照重新計算NCX；如有兩個陰性對照A值超出以上范圍，則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算：
陽性判定值=NCX+0.05
標本A值＞陽性判定值的為陽性，小於陽性判定值的為陰性。應注意的是，式中0.05為該試劑盒的常數，只適合於該特定條件下，而不是對各種試劑均可通用。
根據以上敘述可以看出，在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質控作用，試劑變質和操作不當均會產生"試驗無效"的後果。
b.標本/陰性對照比值
在實驗條件（包括試劑）較難保證恆定的情況下，這種判斷法較為合適。在得出標本（S）和陰性對照（N）的A值後，計算S/N值。也有寫作P/N的，這里的P不代表陽性(positive)，而是病人（patient）的縮寫，不應誤解。為避免混淆，更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中，有些作者定出S/N為陽性標准，現多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統應該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應注意的是，N所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質或蛋白質含量較底的緩沖液，以致反應後產生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此，這類試劑盒規，如N<0.05<>（或其他數值），則按0.05計算，否則將出現假陽性結果。
（2）競爭法
在競爭法ELISA中，陰性孔呈色深於陽性孔。陰性呈色的強度取決於反應中酶結合物的濃度和加入競爭抑制物的量，一般調節陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間，此時反應最為敏感。
競爭法ELISA不易用自視判斷結果，因肉眼很難辨別弱陽性反應與陰性對照的顯色差異，一般均用比色計測定，讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種，即陽性判定值法和抑制率法。
a. 陽性判定值法
與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同，但在計算公式中引入陽性對照A值，現舉某種檢測抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照為不含抗HBc的復鈣人血漿，陽性對照中抗HBc含量為125±1 00u/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值後，先計算陰性對照A值的平均值（NC X ）和陽性對照A值的平均數（PCX），兩個平均數的差（N-P）必須大於一個特定的數值（例如0.300）,試驗才有效。3個陰性對照A值均應小於2.000，而且應≥0.5×NCX並≤1.5×NCX，如其中之一超出此范圍，則棄去，而以另2個陰性對照重新計算×NCX；如有2個陰性對照A超出以上范圍，則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算：
陰性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX
標本A值≤陽性判定值的反應為陽性，A＞陽性判定值的反應為陰性。
b. 抑制率法
抑制率表示標本在競爭結合中標本對陰性反應顯色的抑製程度，按下式計算：
抑制率（%）= （陰性對照A值-標本A值）×100%/陰性對照A值
一般規定抑制率≥50%為陽性，＜50%為陰性。
定量測定
ELSIA操作步驟復雜，影響反應因素較多，特別是固相載體的包被難達到各個體之間的一致，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標准品在相同的條件下製作標准曲線。測定大分子量物質的夾心法ELISA，標准曲線的范圍一般較寬，曲線最高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數紙，以檢測物的濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨於平坦，中間較呈直線的部分是最理想的檢測區域。
測定小分子量物質常用競爭法，其標准曲線中吸光度與受檢物質的濃度呈負相關。標准曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。
『拾』 一個細胞生物學的選擇題 制備人類肝細胞勻漿液
1、封閉（緊密連接）、粘著連接
2、面內質網、 高爾基體
3、流動性 、不對稱性
4、核苷酸 、單糖
5、多能性 、單能性
6、調節途徑 、調節途徑
7、核纖層 、核纖層蛋白
8、聚合期 、穩定期
9、顯微水平、超微水平和分子水平
10、CGN和TGN