超濾離心管中的緩沖液是什麼

A. 離心時tris-HCl緩沖液中tris的具體作用是什麼

tris是三(羥甲基)甲胺的英文縮寫.tris-HCl緩沖液中tris的具體作用是作為抗酸成分,防止溶液PH大幅度下降.

B. 緩沖液是什麼

1. 緩沖液一般指平衡溶液。

2. 是一種能對溶液酸度起穩定作用的溶液。

3. 能使溶液酸鹼性維持在一定范圍內。

4. 緩沖液是一種能在加入少量酸或鹼時抵抗pH改變的溶液。PH緩沖系統對維持生物的正常pH值，正常生理環境起重要作用。
   

C. 超濾離心管離心蛋白時離心幹了怎麼辦

不建議用離心管離蛋白。最好還是膜處理比較好。
蛋白會粘附在渣里，只有用緩沖液再潤洗咯。

D. 求助：第一次使用超濾離心管應該怎麼處理

可能不同廠家的產品保存運輸條件不一樣。
如果有甘油等保護劑，那就一定要洗干凈再加樣品。版權
乾的超濾管也要先潤濕再用，否則可能不能完全利用膜面積。
最好，用樣品buffer潤洗下再加樣，最大程度保證蛋白活性。尤其是用過後保存在NaOH或乙醇中後。
一般還是離心機甩一下好，使膜充分浸潤。

降低吸附的辦法有：
1，蛋白濃度不要過低
2，盡量選用纖維素的低吸附超濾管
3，用前可以用Tween 80等去垢劑潤洗（不影響蛋白活性的前提下）
4，加入保護蛋白，如BSA(不影響蛋白後續使用的前提下)

用完保存在20% EtOH中，4C保存，防止長菌，依不同樣品可以重復使用不同的次數。

E. 【求助】超濾離心是怎麼回事

超濾離心機是使用帶超濾膜的離心管，這個膜有分子量的區別，可以截留大於回膜孔徑的答分子，一般的離心機就可以了，還要選好你的離心管體積，這樣才能和你離心機配套使用 情非所屬(站內聯系TA)一般一百左右一根，特殊的可能更貴，有50ml，10ml，一般的離心機都可以，只要管子能套上，同一種物質在膜完好不堵塞的情況下可以重復下，但是不能太多次數，兩三次就好了！

F. 超濾離心管怎麼使用

蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管（MWCO10kD）。也有其它型號的、不同體積大小和MWCO超濾管可選，視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管，主要考慮MWCO和濃縮體積，通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全過膜，冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂的白線為准。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾（離心機預冷至4度）。膜與轉軸的方向根據說明書調整（角轉離心機的情況是膜與軸垂直）。在實際使用中，一般轉速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時，【取50ul國產Bradford溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管，用5mg/ml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測】，繼續加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱，導致堵管。若發生沉澱，要確定沉澱的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時超濾，降低濃度的辦法解決，後者的方法是換不同的Buffer，直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer（經0.22um超濾膜超濾），再濃縮至1ml左右，連續三次，最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定，一般不多於500ul，也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達到1000倍以上，基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作，用黃槍頭（200ul）取，輕輕順著邊緣插入槍頭，輕輕吹打、混勻蛋白液，注意不要碰到超濾膜，然後吸取濃縮液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取，否則難度太大，有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中，沒過超濾膜，防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管，重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水，用milliQ水輕輕潤洗幾次，【若管底有可見的蛋白沉澱，可以先加入水，然後用槍頭吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉澱懸起，然後倒掉，不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液，室溫放置20min，期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液，將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時，不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗，內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯，加至接近滿的MilliQ水，50ml管也加滿MilliQ水，將管芯慢慢放入50ml
離心管，排出部分水，然後蓋上蓋子，放4度保存，直到下次使用。一般來說，按照上述步驟和注意事項，每根管用三四年不會壞。

G. 我純化的抗體，甘氨酸鹽酸洗脫，TRIS-HCL中和，我要把緩沖液改成PBS，超濾可以嗎透析要用多大濃度的PBS

您好！你這個是換緩沖體系，超濾能達到你需要的目的，用連續洗濾的方法需要5倍體積的PBS，就能達到對之前緩沖液99.3%的去除。
體積小的樣品可用超濾離心管，體積大用超濾系統

如還有疑問可QQ89347157交流

H. 緩沖液在試驗中的作用具體是什麼

實驗中也需要一個最合適實驗的環境啊~比如受PH值，溫度，離子濃度，液體環境以及純度等等影響。緩沖液其實就是個調節實驗環境作用，以提供一個最合適的化學反應環境。其中有pbs磷酸鹽，醋酸鹽等系列緩沖液~你要的是作用，不是配方，我就不詳細介紹咯。需要的話繼續追問就是哈！或者QQ聯系嘛。

I. 超濾離心管的介紹

超濾離心管，備有四種材質的超濾膜：聚醚碸、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart，可根據不同要求靈活選用；

J. 什麼是PBS緩沖液

PBS是磷酸緩沖鹽溶液一般作為溶劑，起溶解保護試劑的作用。它是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na₂HPO₄、KH₂PO₄、NaCl和KCl。PBS緩沖液不僅偽狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。

由於Na₂HPO₄和KH₂PO₄它們有二級解離，緩沖的pH值范圍很廣；而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補加1 mmol/L CaCl₂和0.5 mmol/L MgCl₂，以提供雙價陽離子。

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PBS是磷酸緩沖鹽溶液作用：

1、因為PBS緩沖液具有可調整的適宜pH緩沖作用和鹽平衡的作用。不使用蒸餾水的原因在於水會破壞生物蛋白的結構和生物特性。不使用生理鹽水的原因在於它不能夠調整PH值。所以，對生物細胞進行清洗首選是PBS緩沖液。

2、PBS緩沖液的PH值是細胞最適合的PH值范圍，而且在酸鹼微量的刺激下，PH值一般也沒有任何的變化。培養基的PH值時很容易變化的，對於細胞具有極大的損傷，但是PBS緩沖液可以保持細胞能在適合的PH值范圍之內健康的生活活。