⑴ 我純化的抗體，甘氨酸鹽酸洗脫，TRIS-HCL中和，我要把緩沖液改成PBS，超濾可以嗎透析要用多大濃度的PBS
您好！你這個是換緩沖體系，超濾能達到你需要的目的，用連續洗濾的方法需要5倍體積的PBS，就能達到對之前緩沖液99.3%的去除。
體積小的樣品可用超濾離心管，體積大用超濾系統
如還有疑問可QQ89347157交流
⑵ 什麼是緩沖溶液
緩沖溶液buffer solution
緩沖液是一種能在加入少量酸或鹼時抵抗pH改變的溶液。PH緩沖系統對維持生物的正常pH值，正常生理環境起重要作用。多數細胞僅能在很窄的pH范圍內進行活動，而且需要有緩沖體系來抵抗在代謝過程中出現的pH變化。在生物體中有三種主要的pH緩沖體系，它們時蛋白質、重碳酸鹽緩沖體系。每種緩沖體系所佔的分量在各類細胞和器官中是不同的。
在生化研究工作中，常常要用到緩沖溶液來維持實驗體系的酸鹼度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到我們工作的成效。如果提取酶實驗體系的pH值變化或變化過大，會使酶活性下降甚至完全失活。所以我們要學會配製緩沖溶液。
由弱酸及其鹽組合一起使具有緩沖作用。生化實驗室常常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris（三羥甲基氨基甲烷）等系統，在生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系，因為有時影響實驗結果的因素並不是緩沖液的pH值，而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖劑都可能產生不需要的反應。
硼酸鹽：硼酸鹽與許多化合物形成復鹽、如蔗糖。
檸檬酸鹽：檸檬酸鹽離子容易與鈣結合，所以存在有鈣離子的情況下不能使用。
磷酸鹽：在有些實驗，它是酶的抑止劑或甚至是一個代謝物，重金屬易以磷酸鹽的形式從溶液中沉澱出來。而且它在pH7.5以上時緩沖能力很小。
三羥甲基氨基甲烷：它可以和重金屬一起作用，但在有些系統中也起抑止的作用。其主要缺點時溫度效應。這點往往被忽視，在室溫pH是7.8的Tris一緩沖液，在4℃時是8.4，在37℃時是7.4，因此，4℃配製的緩沖液拿到37℃測量時，其氫離子濃度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下，緩沖能力很差。
緩沖液的pH值由哪些因素決定？
設緩沖系統的弱酸的電離常數為K（平衡常數），平衡時弱酸的濃度為[酸]，弱酸鹽的濃度為[鹽]，則由弱酸的電離平衡式可得下式：
根據此式可得出下列幾點結論：
（1）緩沖液的pH值與該酸的電離平衡常數K及鹽和酸的濃度有關。弱酸一定，但酸和鹽的比例不同時，可以得到不同的pH值。當酸和鹽濃度相等時，溶液的pH值與PK值相同。
（2）酸和鹽濃度等比例也增減時，溶液的pH值不便。
（3）酸和鹽濃度相等時，緩沖液的緩沖效率為最高，比例相差越大，緩沖效率越低，一般地說緩沖液有效緩沖范圍為PK±1pH。
從上述可知，只要知道緩沖對的PK值，和要配製的緩沖液的pH值（及要求的緩沖液總濃度）時，可按公式計算出[鹽]和[酸]的量。這樣算涉及到對數的換算，較麻煩，前人為減少後人的計算麻煩，經計算已為我們總結出pH值與緩沖液對離子用量的關系列出了表格。講義附錄部分節錄有磷酸緩沖液的配製表。只要我們知道要配製的緩沖液的pH，經查表便可計算處所用緩沖劑的比例和用量。例如配製500nmpH5.8濃度為0.1M磷酸緩沖液。
經查表知pH5.8濃度為0.2M Na2HPO48.0毫升，而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推論出配製100ml0.1M的磷酸緩沖液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。
計算好後，按計算結果稱好葯品，放於燒杯中，加少量蒸餾水溶解，轉移入50ml容量瓶，加蒸餾水至刻度，搖勻，便得所需的緩沖液。
各種緩沖溶液的配製，均按下表按比例混合，某些試劑，必須標定配成准確的濃度才能進行，如醋酸、NaOH等。
⑶ 緩沖液是什麼
當往某些溶液中加入一定量的酸和鹼時，有阻礙溶液pH變化的作用，稱為緩沖作用，這樣的溶液叫做緩沖溶液。弱酸及其鹽的混合溶液(如HOAc與NaOAc)，弱鹼及其鹽的混合溶液(如NH3·H2O與NH4Cl)等都是緩沖溶液。
由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用，是由於溶液中存在足夠量的鹼A-的緣故。當向這種溶液中加入一定量的強酸時，H+離子基本上被A-離子消耗:
所以溶液的pH值幾乎不變;當加入一定量強鹼時，溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。
在緩沖溶液中加入少量強酸或強鹼，其溶液pH值變化不大，但若加入酸，鹼的量多時，緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說明它的緩沖能力是有一定限度的。
緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· L-1NaAc組成的緩沖溶液，比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的緩沖溶液緩沖能力大。關於這一點通過計算便可證實。但緩沖溶液組分的濃度不能太大，否則，不能忽視離子間的作用。
⑷ 離心時tris-HCl緩沖液中tris的具體作用是什麼
tris是三(羥甲基)
甲胺
的英文縮寫。
tris-HCl
緩沖液
中tris的具體作用是作為抗酸成分，防止溶液PH大幅度下降。
⑸ 純化的單克隆抗體，超濾濃縮的時候會把磷酸鹽離心掉導致抗體的緩沖環境變成水嗎
不會的。。。
超濾濃縮對於緩沖液成分不會有任何改變的，因為PBS中的磷酸根離子回也好答，氯離子也好，鈉離子也好都是很小的離子，可以在溶液中自由擴散，不會因為超濾離心就被甩到下層濾液中去。
你可以做個簡單的實驗，取一定體積PBS溶液測一下pH值和電導率值，之後用超濾管去離心。取出上層未被濾完的溶液再測一下pH值和電導率值，會發現pH值和電導率值和之前測的是一樣的。即可證明未被濾完的溶液還是PBS溶液，而不是水。
⑹ 緩沖液和緩沖對的定義是什麼
緩沖液；能抵禦少量的酸,鹼或稀釋少量倍數時,體系的pH基本不變的溶液稱為緩沖溶液.緩沖溶液的緩沖對一般是由共軛酸鹼對或兩性物質組成.緩沖對在生物中是指酸鹼性相反的東西，，可以相互中和,比如在人體中，乳酸和碳酸氫鈉就是一對緩沖對
⑺ 什麼叫緩沖液,什麼叫表面活性劑
緩沖液
1）緩沖溶液作用原理和pH值
當往某些溶液中加入一定量的酸和鹼時，有阻礙溶液pH變化的作用，稱為緩沖作用，這樣的溶液叫做緩沖溶液。弱酸及其鹽的混合溶液（如HAc與NaAc），弱鹼及其鹽的混合溶液（如NH3·H2O與NH4Cl）等都是緩沖溶液。
由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用，是由於溶液中存在足夠量的鹼A-的緣故。當向這種溶液中加入一定量的強酸時，H 離子基本上被A-離子消耗：
所以溶液的pH值幾乎不變；當加入一定量強鹼時，溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。
2）緩沖溶液的緩沖能力
在緩沖溶液中加入少量強酸或強鹼，其溶液pH值變化不大，但若加入酸，鹼的量多時，緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說明它的緩沖能力是有一定限度的。
緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· L-1NaAc組成的緩沖溶液，比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的緩沖溶液緩沖能力大。關於這一點通過計算便可證實。但緩沖溶液組分的濃度不能太大，否則，不能忽視離子間的作用。
組成緩沖溶液的兩組分的比值不為1∶1時，緩沖作用減小，緩沖能力降低，當c（鹽）/c（酸）為1∶1時△pH最小，緩沖能力大。不論對於酸或鹼都有較大的緩沖作用。緩沖溶液的pH值可用下式計算：
此時緩沖能力大。緩沖組分的比值離1∶1愈遠，緩沖能力愈小，甚至不能起緩沖作用。對於任何緩沖體系，存在有效緩沖范圍，這個范圍大致在pKaφ（或pKbφ）兩側各一個pH單位之內。
弱酸及其鹽（弱酸及其共軛鹼）體系pH=pKaφ±1
弱鹼及其鹽（弱鹼及其共軛酸）體系pOH=pKbφ±1
例如HAc的pKaφ為4.76，所以用HAc和NaAc適宜於配製pH為3.76～5.76的緩沖溶液，在這個范圍內有較大的緩沖作用。配製pH=4.76的緩沖溶液時緩沖能力最大，此時（c（HAc）/c（NaAc）=1。
3）緩沖溶液的配製和應用
為了配製一定pH的緩沖溶液，首先選定一個弱酸，它的pKaφ盡可能接近所需配製的緩沖溶液的pH值，然後計算酸與鹼的濃度比，根據此濃度比便可配製所需緩沖溶液。
以上主要以弱酸及其鹽組成的緩沖溶液為例說明它的作用原理、pH計算和配製方法。對於弱鹼及其鹽組成的緩沖溶液可採用相同的方法。
緩沖溶液在物質分離和成分分析等方面應用廣泛，如鑒定Mg2 離子時，可用下面的反應：
白色磷酸銨鎂沉澱溶於酸，故反應需在鹼性溶液中進行，但鹼性太強，可能生成白色Mg（OH）2沉澱，所以反應的pH值需控制在一定范圍內，因此利用NH3·H2O和NH4Cl組成的緩沖溶液，保持溶液的pH值條件下，進行上述反應。
表面活性劑
表面活性劑 surfactant，surface activeagent
溶於液體後，具有使表面張力顯著降低作用的物質，稱為表面活性劑。由於其分子內存在著親水性部分和疏水性部分，因此表面容易吸附；另外在一定濃度（膠粒臨界濃度）以上時，則形成稱為膠粒的分子團。親水性、疏水性兩部分之比，是決定表面活性劑性質的重要因素，所以以此作為表示親水、疏水平衡〔hydrophilc hydrophobic （＝lipophilc）〕（縮寫HLB）的數量夫系。隨著水溶液中的解離狀況，分為陰離子、陽離子、兩性和非離子性等四種表面活性劑。表面活性劑具有洗滌劑等廣泛用途，但基於難溶於水的非極性物質的溶解作用，所以在活體膜的研究上佔有重要的地位。為了使膜蛋白穩定和易溶化的目的，所使用的主要為中性表面活性劑，而以Tritonx -100為代表的Triton系、Tween系等各種HLB值不同的市售品都可以利用。十二基硫酸鈉（SDS）等陰離子表面活性劑和十六烷三甲胺等陽離子表面活性劑，一般均具有較強的溶化作用，但對蛋白質也有較強的變性作用。利用SDS和蛋白質的復合體的聚丙烯醯胺凝膠電泳，被廣泛應用於測定蛋白質分子量的一種方法。
它是一類具有表面活性的化合物。溶於液體（特別是水）後，能顯著降低溶液的表面張力或界面張力，並能改進溶液的增溶、乳化、分散、滲透、潤濕、發泡和洗凈等能力。主要用於製作合成洗滌劑、乳化劑、破乳劑、滲透劑、發泡劑、消泡劑、潤濕劑、分散劑、浮選劑、柔軟劑、抗靜電劑、防水劑等助劑。廣泛用於紡織、食品、醫葯、農葯、化妝品、建築、采礦等工業領域。表面活性劑具有共同的特點，即分子中同時存在親水基和親油基（又稱疏水基）。親水基通常是溶於水後容易電離的基團，如羧酸鹽、磺酸鹽、硫酸酯鹽等，以及在水中不電離的羥基或聚氧乙烯基。親油基能與油類互相吸引、溶解，通常是由石油或油脂組成的長碳鏈的烴基 ，可以是脂肪烴，也可以是芳香烴。親水基性能強，就溶解於水，反之，親油基性能強，就溶於油。表面活性劑溶於水後，能生成單分子膜和膠束，其分子在水中能自動定向吸附於水溶液-空氣的界面處 ，親水基伸向水溶液 ，親油基伸向空氣，分子通過界面吸附形成的單分子膜在界面處起著隔離作用 ，使空氣和水溶液的接觸面顯著減少，因此，水溶液的表面張力急劇下降。表面活性劑通常按離子類型分為離子型（溶於水後電離成離子）、非離子型（溶於水不電離）。（1）非離子型，如多元醇、聚氧乙烯等.（2）離子型，它又可分為陰離子型（如：磺酸鹽、羧酸鹽等）、陽離子型（如各類胺鹽）、兩性型（如氨基酸）
⑻ 緩沖溶液是干什麼用的
緩沖液是一種能在加入少量酸或鹼時抵抗pH改變的溶液。
PH緩沖系統對維持生物的正常pH值，正常生理環境起重要作用。