① 如何從污水(或土壤)中提取微生物
把污水加蒸餾水分別稀釋10,100,1000倍,然後加入培養基中培養,如果培養出來菌落重合,菌非常多,無法分離,就加大稀釋倍數,直至獲得清晰可分離的菌落,有時甚至是非常小的菌落,要用倒置顯微鏡操作。而培養基則根據要分離的菌的營養類型進行配置,若要獲得多種微生物就要配置多種培養基進行如上操作。對於土壤加水溶解,對溶解液進行如上操作,不溶的部分就不用管了
② 為什麼噬菌體可以去除污水中的致病微生物
噬菌體可以去除污水中的致病微生物,噬菌體可以吞噬微生物。
③ 噬菌體純化不成功
沒有嚴格按照實驗步驟。
噬菌體是專性寄生物,所以自然界中凡有細菌分布的地方,均可發現其特異的噬菌體的存在,亦即噬菌體是伴隨著宿主細菌的分布而分布的,例如糞便與陰溝污水中含有大量大腸桿菌,故也能很容易地分離到大腸桿菌噬菌體;乳牛場有較多的乳酸桿菌,也容易分離到乳酸桿菌噬菌體等。
純化過程會長出的分離的單個噬菌斑,其形態、大小常不一致,再用接種針在單個噬菌斑中刺一下,小心採取噬菌體,接入含有大腸桿菌的液體培養基內, 37 ℃培養。
④ 微生物學基礎,微生物的特徵檢查噬菌體有哪些方法
5 方法
5.1 噬菌體的檢查
5.1.1 樣品採集
將2~3g土樣或5mL水樣(如陰溝污水)放入滅菌三角瓶中,加入對數生長期的敏感指示菌(大腸桿菌(Escherichia coli))菌液3~5mL,再加20mL二倍肉湯蛋白腖培養液。
5.1.2 增殖培養
30℃振盪培養12~18h, 使噬菌體增殖。
5.1.3 離心分離
將上述培養液以3000rpm離心15~20min, 取上清液,用pH7.0,1%蛋白腖水稀釋至10-2~10-3,用於噬菌體檢查及效價測定。
5.1.4 生物測定法
5.1.4.1雙層瓊脂平板法
5.1.4.1.1 倒下層瓊脂
融化下層培養基,倒平板(約10mL/皿)待用。
5.1.4.1.2倒上層瓊脂
融化上層培養基,待融化的上層培養基冷卻至50℃左右時,每管中加入敏感指示菌 (大腸桿菌(Escherichia coli)) 菌液0.2mL,待檢樣品液或上述噬菌體增殖液0.2~0.5mL,混合後立即倒入上層平板鋪平。
5.1.4.1.3恆溫培養
30℃恆溫培養6~12h觀察結果。
5.1.4.1.4 觀察結果
如有噬菌體,則在雙層培養基的上層出現透亮無菌圓形空斑──????噬菌斑。
5.1.4.2 單層瓊脂平板法
省略下層培養基,將上層培養基的瓊脂量增加至2%,融化後冷卻至45℃左右,如同上法加入指示菌和檢樣,混合後迅速倒平板。30℃恆溫培養6~16h後觀察結果。
5.1.5 離心分離加熱法(快速檢查)
取大腸桿菌(Escherichia coli)正常培養液和侵染有噬菌體的異常大腸桿菌(Escherichia coli)培養液,4000rpm離心20min,分別取兩組發酵液的上清液(A1),一部分於721分光光度計上測定OD650光密度值,另外各取5mL上清液於試管中,置水浴中煮沸2min(A2),檢測A2溶液OD650光密度值,記錄結果。
5.2 噬菌體效價的測定
5.2.1 倒平板
將融化後冷卻到45℃左右的下層肉膏蛋白腖固體培養基傾倒於11個無菌培養皿中,每皿約傾注10mL培養基,平放,待冷凝後在培養皿底部註明噬菌體稀釋度。
5.2.2 稀釋噬菌體
按10倍稀釋法,吸取0.5mL大腸桿菌(Escherichia coli)噬菌體,注入一支裝有4.5mL1%蛋白腖水的試管中,即稀釋到10-1,依次稀釋到10-6稀釋度。
5.3 噬菌體與菌液混合
將11支滅菌空試管分別標記10-4、10-5、10-6和對照。分別從10-4、10-5和10-6噬菌體稀釋液中吸取0.1mL於上述編號的無菌試管中,每個稀釋度平行做三個管,在另外兩支對照管中加0.1mL無菌水,並分別於各管中加入0.2mL大腸桿菌(Escherichia coli)菌懸液,振盪試管使菌液與噬菌體液混合均勻,置37℃水浴中保溫5min,讓噬菌體粒子充分吸附並侵入菌體細胞。
5.4.4 接種上層平板
將11支融化並保溫於45℃的上層肉膏蛋白腖半固體瓊脂培養基5mL分別加入到含有噬菌體和敏感菌液的混合管中,迅速搓勻,立即倒入相應編號的底層培養基平板表面,邊倒入邊搖動平板使其迅速地鋪展表面。水平靜置,凝固後置37℃培養。
5.5 觀察並計數
觀察平板中的噬菌斑,並將結果記錄於實驗報告表格內,選取每皿有30~300個噬菌斑的平板計算噬菌體效價。
計算公式: N=Y/V?X
(N:效價值,Y:平均噬菌斑數/皿,V:取樣量,X:稀釋度)
例如:當稀釋度為10-6時,取樣量為0.1 mL/皿,同一稀釋度中3個平板上的噬菌斑的平均值為186個,則該樣品的效價為:N=186/0.1×10-6=1.86×109。
6 結果
6.1 噬菌體檢查
6.1.1離心分離加熱法
處理方法 OD650光密度值
正常發酵液(對照) 異常發酵液(試驗)
離心上清液(A1)
離心上清液加熱煮沸後(A2)
A2/A1
6.1.2 繪出平板上的噬菌斑檢測結果,指出噬菌斑和宿主細菌。
6.2 噬菌體效價測定
6.2.1 平板上噬菌斑數目
噬菌體稀釋度 10-4 10-5 10-6 對照
噬菌斑數(個)/皿
平均每皿噬菌斑數目
6.2.2 計算噬菌體效價(即噬菌斑形成單位pfu, plague-forming unit).
7 思考
1有哪些方法可檢查發酵液中確有噬菌體存在?比較其優缺點。
2測定噬菌體效價的原理是什麼?要提高測定的准確性應注意哪些操作?
3噬菌體與菌液混合後保溫時間越長其吸附率越高的說法對嗎?
回復
吸收率:在噬菌體和過量菌液混合後,菌/噬菌體混合液中未感染的噬菌體顆粒經過氯仿處理後,在不同時間點檢測其數量。一般情況下幾分鍾內噬菌體即可大部分吸附到宿主菌上.
潛伏期:細菌與噬菌體混合作用5分鍾後,徹底清洗以除去未結合的噬菌體。然後用新鮮的培養基重懸至相同體積。該重懸液在370C下孵育,其間有規則地收集噬菌體測滴度。
裂解量指的是單個宿主細菌被噬菌體完全裂解後所釋放的噬菌體數量.具體檢測方法本人也不是很清楚.
⑤ Indigenous somatic coliphage removal from a real municipal 怎麼翻譯
中心語 coliphage (大腸桿菌),
indigenous(本土的,此處應為當地種,) 和 somatic (somatic 與 coliphage 組合特指一種噬菌體(見樓上), )為前置定語
removal from a real municipal wastewater by a submerged membrance bioreactor 整體為後置定語 可以分為兩個部分:
1. removal from a real municipal wastewater(從城市污水中去除,removal 是名詞做定語的用法)
2. by a submerged membrance bioreactor (用/以全透性膜處理器)(半透膜是semipermeable membrane,所以這里應該是全透 )
整合成為 用全透性膜處理器從城市污水中提取的當地種大腸桿菌噬菌體
謝謝!
⑥ 論述污水處理的微生物學原理及主要的處理方式
參與污廢水處理的生物主要有四類:
1.細菌類:在污水處理所利用的生物群中,細菌是體型最微小的一種,它具有在好氧及厭氧條件下分解吸收各種有機物的能力。對污水生物處理起作用的細菌有.菌膠團.球衣細菌.硝化菌.脫氮菌.聚磷菌等幾種。
2.原生動物:原生動物具有吞食污水中的有機物,細菌,在體內迅速氧化分解的能力,因此在活性污泥法和生物膜中。它除了能除去的有機物,加快有機物的分解速度外,還能使生物膜的表面附著能力再生,原聲動物是單細胞的好氧性生物。
3.藻類:藻類是植物,含有葉綠素,當葉綠素吸收二氧化碳和水進行光合作用而產生碳水化合物時將放出大量的氧於水中,穩定塘就是利用這種氧來氧化污水的有機物。
4:後生動物,以上所介紹的生物都是單細胞構成,體內還有各種器官,參與污水處理的後生動物,包括從形態較小的輪蟲到棲息於生物濾池的甲殼蟲,昆蟲,幼蟲等體形較大的種種類型。
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⑦ 印度恆河水,究竟有多臟其他人都不敢碰的水,為什麼印度人喝了卻沒事
在印度人的心裡,其「母親河」恆河是聖潔無比的,實際上恆河已經受到了嚴重的污染,只不過是印度人給恆河加上了神聖的光環而已。
通過專家對恆河水質研究檢測顯示,其水質含有的細菌量超過國際規定的幾百倍,可以說是世界上污染非常嚴重的河流。上游和下游的河水污染程度之嚴重導致外國遊客都不敢碰,但是印度人不僅用恆河水洗衣服,而且做飯和喝水都是直接恆河水。
⑧ 水污染的建議
加強企業與城市污水排放標准管理,興建污水處理場,清理和保護好河道衛生.簡單說起來就這么幾件,辦好了就治理好了!
⑨ 什麼是噬菌體,如何提取
你好
噬菌體是一種病毒,是感染細菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的細菌病毒的總稱,
病毒是提取不了的,可以提取噬菌體中的DNA
對人體應該無影響,它是專門侵染細菌的病毒
純手打,望採納
⑩ 污水處理的六個步驟是什麼
1、廢水首先經過格柵、篩網後流至絮凝沉澱池,為了使處理效果好,在絮凝沉澱池中加入混凝劑,使廢水中懸浮物治理效果更好,混凝加葯也起到調節廢水的作用,絮凝沉澱後的廢水流入預曝氣調節池中。
2、曝氣調節池中通入空氣,起到預曝氣調節的作用,調節均勻的廢水用泵提升到一級浮動填料生化池中。
3、生化池中安裝充氧效率很高的曝氣頭,並裝入浮動填料,實踐證明該項技術對COD和BOD有較高的去除效率,一級浮動填料生化池中廢水自流入二級浮動填料生化池,二池採用方法相同。
4、二級浮動填料生化池水自流入斜板沉澱池中,池中加入聚丙烯蜂窩斜管,可大大提高沉降效率,另外水力負荷高,停留時間短,佔地面積小。
5、混凝沉澱池與斜板沉澱池沉澱污泥排入污泥濃縮池中,然後經污泥脫水機械脫水。
6、斜板沉澱池排出的水流入清水池中,經檢測後外排。
(10)污水中提取噬菌體擴展閱讀:
污水處理一般來說包含以下三級處理:
一級處理是它通過機械處理,如格柵、沉澱或氣浮,去除污水中所含的石塊、砂石和脂肪、油脂等。一級處理具有投資少、成本低等特點,但是廢水經過一級處理一般達不到符合國家排放標准所以還需要進行第二級處理。
二級處理是生物處理,污水中的污染物在微生物的作用下被降解和轉化為污泥。使bod5降至20-30mg.l-1,經過二級處理後的水一般就可以達到國家排放標准了。
三級處理是污水的深度處理,它包括營養物的去除和通過加氯、紫外輻射或臭氧技術對污水進行消毒。