家庭自製蒸餾水簡易方法文庫

1. RNA的提取方法步驟及原理.

RNA抽取一般使用Trizol法抽提:

Trizol是一種總RNA抽提試劑，內含異硫氰酸胍等物質，能迅速裂解細胞，抑制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。

Trizol作用原理:

在勻質化或溶解樣品中，Trizol試劑可保持RNA的完整性，同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心後，裂解液分層成水相和有機相。RNA存在於水相中。

水相轉移後，RNA通過異丙醇沉澱回收。移去水相後，用乙醇可從中間相沉澱得到DNA，加入異丙醇沉澱可從有機相得到蛋白質。

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與DNA不同，RNA一般為單鏈長分子，不形成雙螺旋結構，但是很多RNA也需要通過鹼基配對原則形成一定的二級結構乃至三級結構來行使生物學功能。

RNA的鹼基配對規則基本和DNA相同，不過除了A-U、G-C配對外，G-U也可以配對。

在細胞中，根據結構功能的不同，RNA主要分三類，即tRNA（轉運RNA），rRNA（核糖體RNA），mRNA（信使RNA）。mRNA是合成蛋白質的模板，內容按照細胞核中的DNA所轉錄；tRNA是mRNA上鹼基序列（即遺傳密碼子）的識別者和氨基酸的轉運者；rRNA是組成核糖體的組分，是蛋白質合成的工作場所。

2. RNA的提取方法

1、酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎細胞，消化蛋白，然後用酚和酚-氯萃取，高速離心後取上清，所得DNA大小為100-150kb

2、甲醯胺解聚法：破碎細胞同上，然後用高濃度甲醯胺解聚蛋白質與DNA的結合，再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。

3、玻璃棒纏繞法：用鹽酸胍裂解細胞，將裂解物鋪於乙醇上，然後用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪，DNA沉澱液繞於玻棒。生成DNA約80kb。

4、異丙醇沉澱法：基本同1法，僅用二倍容積異丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在異丙醇中可溶狀態）

5、表面活性劑快速制備法：用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細胞，然後用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉澱或透析。

6、加熱法快速制備：加熱96℃-100℃，五分鍾，然後離心後取上清，可用於PCR反應。

7、鹼變性快速制備：先用NaOH作用20分鍾，再加HCI中和，離心後取上清，含少量DNA。

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DNA提取原則：

1、保證核酸一級結構的完整性；

2、核酸樣品中不應存在對酶有抑製作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子；

3、其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降低到最低程度；

4、其他核酸分子，如RNA，也應盡量去除。

3. 詳細的滴定管的使用方法

1、酸式滴定管的使用方法

（1）洗滌。通常滴定管可用自來水或管刷蘸洗滌劑（不能用去污粉）洗刷，而後用自來水沖洗干凈，去離子水潤洗3次。有油污的滴定管要用鉻酸洗液洗滌。

（2）給旋塞塗凡士林（起密封和潤滑的作用）。將管中的水倒掉，平放在台上，把旋塞取出，用濾紙將旋塞和塞槽內的水吸干。用手指蘸少許凡士林，在旋塞芯兩頭薄薄地塗上一層（導管處不塗凡士林），然後把旋塞插入塞槽內，旋轉幾次，使油膜在旋塞內均勻透明，且旋塞轉動靈活。

（3）試漏。將旋塞關閉，滴定管里注滿水，把它固定在滴定管架上，放置10分鍾，觀察滴定管口及旋塞兩端是否有水滲出，旋塞不滲水才可使用。

（4）滴定管內裝入標准溶液後要檢查尖嘴內是否有氣泡。如有氣泡，將影響溶液體積的准確測量。排除氣泡的方法是：用右手拿住滴定管無刻度部分使其傾斜約30°角，左手迅速打開旋塞，使溶液快速沖出，將氣泡帶走。

（5） 裝標准溶液。應先用標准液（5-6ml）潤洗滴定管3次，洗去管內壁的水膜，以確保標准溶液濃度不變。方法是兩手平端滴定管同時慢慢轉動使標准溶液接觸整個內壁，並使溶液從滴定管下端流出。裝液時要將標准溶液搖勻，然後不藉助任何器皿直接注入滴定管內。

（6） 進行滴定操作時，應將滴定管夾在滴定管架上。左手控制旋塞，大拇指在管前，食指和中指在後，三指輕拿旋塞柄，手指略微彎曲，向內扣住旋塞，避免產生使旋塞拉出的力。向里旋轉旋塞使溶液滴出。滴定管應插入錐形瓶口1-2cm，右手持瓶，使瓶內溶液順時針不斷旋轉。掌握好滴定速度（連續滴加，逐滴滴加，半滴滴加），終點前用洗瓶沖洗瓶壁，再繼續滴定至終點。

（7） 滴定管使用完後，應洗凈打開旋塞倒置於滴定管架上。

2、鹼式滴定管的使用方法

（1）試漏。給鹼式滴定管裝滿水後夾在滴定管架上靜置5分鍾。若有漏水應更換橡皮管或管內玻璃珠，直至不漏水且能靈活控制液滴為止。

（2） 滴定管內裝入標准溶液後，要將尖嘴內的氣泡排出。方法是：把橡皮管向上彎曲，出口上斜，擠捏玻璃珠，使溶液從尖嘴快速噴出，氣泡即可隨之排掉。

（3）進行滴定操作時，用左手的拇指和食指捏住玻璃珠中部靠上部位的橡皮管外側，向手心方向捏擠橡皮管，使其與玻璃珠之間形成一條縫隙，溶液即可流出。
其他操作同酸式滴定管。

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1、滴定管是滴定分析法所用的主要量器、滴定管的容積與其所標出的體積並非完全一致，在准確度要求較高的分析工作中須進行校準j由於玻璃具有熱脹冷縮的特性，在不同溫度下，滴定管的體積不同。校準時，必須規定一個共同的溫度值，這一規定溫度值為標准溫度。國際上規定玻璃容量器皿的標准溫度為20℃，即在校準時都將玻璃容量器皿的容積校準到20℃時的實際容積。

2、滴定管可分為兩種：一種是酸式滴定管，另一種是鹼式滴定管。

（1）酸式滴定管的下端有玻璃活塞，可裝入酸性或氧化性滴定液，不能裝入鹼性滴定液，因為鹼性滴定液可使活塞與活塞套黏合，難於轉動。

（2）鹼式滴定管用來盛放鹼性溶液，它的下端連接一橡皮管，橡皮管內放有玻璃珠以控制溶液流出，橡皮管下端再接有一尖嘴玻璃管。凡是能與橡皮管起反應的溶液，如高錳酸鉀、碘等溶液，都不能裝入鹼式滴定管中。

3、校準：滴定管的校準與容量瓶的校準一樣，都採用稱量水法，即根據純水在不同溫度下具有不同的密度，稱量測量溫度下滴定管不同刻度處水的質量，根據V=m/P，計算陔溫度下純水的體積，即為該滴定管在陔刻度處的真實容積。

4、原理

滴定過程需要一個定量進行的反應，此反應必須能完全進行，且速率要快，也就是平衡常數、速率常數都要較大。而且反應還不能有干擾測量的副產物，副反應更是不允許的。

在兩種溶液的滴定中，已知濃度的溶液裝在滴定管里，未知濃度的溶液裝在下方的錐形瓶里。通常把已知濃度的溶液叫做標准溶液，它的濃度是與不易變質的固體基準試劑滴定而測得的。反應停止時，讀出用去滴定管中溶液的體積，即可用公式算出濃度。

根據反應類型的不同，滴定分為以下種類：

（1）酸鹼中和滴定（利用中和反應）（指示劑常用甲基橙、酚酞）

（2）氧化還原滴定（利用氧化還原反應）

（3）沉澱滴定（利用生成沉澱的反應）

（4）絡合滴定（利用絡合反應）

5、滴定操作中應注意以下幾點：

（1）搖瓶時，應使溶液向同一方向作圓周運動（左右旋轉均可），但勿使瓶口接觸滴定管，溶液也不得濺出。

（2）滴定時，左手不能離開活塞任其自流。

（3）注意觀察溶液落點周圍溶液顏色的變化。

（4）開始時，應邊搖邊滴，滴定速度可稍快，但不能流成「水線」。接近終點時，應改為加一滴，搖幾下。最後，每加半滴溶液就搖動錐形瓶，直至溶液出現明顯的顏色變化。加半滴溶液的方法如下：微微轉動活塞，使溶液懸掛在出口管嘴上，形成半滴，用錐形瓶內壁將其沾落，再用洗瓶以少量蒸餾水吹洗瓶壁。用鹼管滴加半滴溶液時，應先松開拇指和食指，將懸掛的半滴溶液沾在錐形瓶內壁上，再放開無名指與小指。這樣可以避免出口管尖出現氣泡，使讀數造成誤差。

（5）每次滴定最好都從0.00開始（或從零附近的某一固定刻度線開始），這樣可以減小誤差。

（6）滴定結束後，滴定管內剩餘的溶液應棄去，不得將其倒回原瓶，以免沾污整瓶操作溶液。隨即洗凈滴定管，並用蒸餾水充滿全管，備用。

4. 如何將75%的酒精變成95%的酒精方法越簡單越好

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原發布者:0aaaaaaaa0
100ml的95%酒精
蒸餾水（可進行自己購買，也可自己製作）
量筒（燒杯有刻度就不需要量筒）
燒杯(在家裡可以找一些有刻度的杯子)步驟：1.計算配置75%的酒精的計算方法，100ml95%的酒精有95ml的酒精和5ml的水 95%÷（X+5）ml=75%÷100 ml
X=121.6666666672.用量筒量取100ml95%的酒精3.將100ml95%的酒精放入燒杯，然後用量筒量取121.6ml的蒸餾水倒入燒杯攪拌勻即可 註：蒸餾水，就是水燒開以後水蒸氣凝結成的水【1】95%酒精的濃度值，是以體積分數（%）表示的。即100毫升的溶液里含有95毫升酒精。【2】酒精稀釋，就是把高濃度的（95%）酒精（有500毫升包裝的、95%酒精），加一定體積水後，配製成低濃度的（例如75%）酒精的過程。【3】例如配製100毫升75%酒精：計算式求取95%酒精的體積V=(75%x100ml)/95%=78.9ml.【4】稀釋操作：在100毫升的乾燥干凈的量筒中加入78.9ml.95%酒精，用蒸餾水稀釋至100毫升的刻線。然後轉移到試劑瓶中，貼上標簽。 如何用95%的酒精配製成75%的酒精呢？這在課堂上老師也許有教過大家，但是到實際應用時總會臨門亂腳，不知所措。為了方便廣大學子和工作生活中有需要的朋友們，今天千夏子就和大家說說怎樣在75%和95%之間互相配製吧！ 萬能公式：95%

5. 植物組織培養的流程

植物組織培養的流程：

第一步，將采來的植物材料除去不用的部分，將需要的部分仔細洗干凈，如用適當的刷子等刷洗。把材料切割成適當大小，即滅菌容器能放入為宜。置自來水龍頭下流水沖洗幾分鍾至數小時，沖洗時間視材料清潔程度而宜。易漂浮或細小的材料，可裝入紗布袋內沖洗。

第二步是對材料的表面浸潤滅菌。要在超凈台或接種箱內完成，准備好消毒的燒杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、無菌水、手錶等。用70%酒精浸10～30秒。由於酒精具有使植物材料表面被浸濕的作用，加之70%酒精穿透力強，也很易殺傷植物細胞，所以浸潤時間不能過長。

第三步是用滅菌劑處理。表面滅菌劑的種類較多，可根據情況選取1～2種使用見表。第四步是用無菌水涮洗，涮洗要每次3min左右，視採用的消毒液種類，涮洗3～10次左右。

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組織培養技術是在人為創造的無菌條件下將生活的離體器官（如根、莖、葉、莖段、原生質體）、組織或細胞置於培養基內，並放在適宜的環境中，進行連續培養以獲得細胞、組織或個體的技術。

組織培養技術原理

植物組織培養的原理是細胞全能性。也就是說每個植物細胞里都含有一整套遺傳物質，只不過在特定條件下才會表達。

組織培養基於此原理就可以將已處於分化終端或正在分化的植物組織脫分化，誘導形成愈傷組織，再在愈傷組織上形成新的叢生芽。

組織培養技術的應用

（1）改良作物：增加遺傳變異性。

（2）繁殖植物：組織培養中從一個單細胞，一塊愈傷組織，一個芽（或其它器官）都可以獲得無性系。無性系就是用植物體細胞繁殖所獲得的後代。

（3）有用化合物：有用化合物包括葯物、橡膠、香精油、色素等。這些化合物許多都是高等植物的次生代謝物，有些化合物還不能大規模地人工合成，而靠植物產生這些化合物來源有限。因此，利用組織培養方法，培養植物的某些器官或愈傷組織，並篩選出高產、高合成能力、生長快的細胞株系，以進行工業化生產，是一條行之有效的途徑。