流式细胞仪鞘液用超纯水

『壹』 流式细胞仪原理 流式细胞仪原理简述

1、流式细胞仪原理是参数测量原理。

2、流式细胞仪（Flow cytometer ）是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器，它只能测量一个细胞的诸如总核酸量，总蛋白量等指标，而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说，它的细节 分辨率为零。

『贰』 BD流式细胞仪鞘液，关机液能不能用其他产品代替的

看你是什么型号的机器，如果没有装多孔板装置，只是用管子检测样本的，用水就可以代替鞘液。因为在检测过程中样本和鞘液是不混合的。

关机液可以用10%漂白水，加10% contrad 70，加纯水这三管来代替。

『叁』 流式细胞仪原理

流式细胞仪的工作原理：

流式细胞仪的检测范围：

细胞结构：细胞大小，细胞颗粒度，DNA含量与细胞周期，RNA含量，蛋白质含量等等；

细胞功能： 细胞表面/胞浆/核的特异性抗原，细胞活性，细胞内/外的细胞因子，激素结合位点， 细胞受体，钙离子浓度，线粒体膜电位，等等

『肆』 流式细胞技术与流式细胞仪

流式细胞技术 （Flow Cytometer, FCM）是细胞学的研究手段之一。其能在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数。例如，采用双激光的方法，研究者可进行核型分析和鉴定，分离纯化某号染色体并构建染色体特异性DNA文库。流式细胞技术是当代最先进的细胞定量分析技术之一。

该技术依托 流式细胞仪 。其主要部件为光源、流动室、荧光检测部件、分选器。

（1）光源。通常是激光光源，目的是提供足够的荧光激光能量。

（2）流动室。其为流式细胞仪中最重要的部分。目的是使细胞流稳定流动，依次通过固定的检测区。其间一道加入还有鞘液（sheath fluid），使样品微粒之间相互分离，基于 鞘流原理 ，使微粒恒定处于同轴流动的中心位置。流动室的设计运用 液体聚焦原理 ，把激光激发点放在液流聚焦点上，该处是液流直径最小处，通常为10-20μm，做到了单个细胞进入检测区。

（3）荧光检测部件。染色细胞通过激光束时会发出荧光，检测系统将接收的这些荧光转换成与其量大小成正比的电压脉冲信号，该脉冲称为 峰值脉冲 ，分析系统根据这些来自不同方向的信号把不同的细胞群加以区分。散射光是围绕细胞360°散发的，所以检测装置里一般有90°散色光检测器（SSC，侧向散射光）和前向散射光检测器（FSC，前向角度散射光）。由于侧向散射光强度较弱，因此光电转换器件选用增益较大的 光电倍增管 。一般来说，6°以内的前向散射光为小角度散射光，可反映细胞体积的大小。大于6°的前向散射为大角度散射光，可提供细胞内的信息，特别是分叶核的信息，细胞质粒存在与否会明显改变前向大角度散射光的强度。由于前向散射光的强度较强，因此用光电二极管作 光电转换器 。

（4）分选器。细胞的分选是通过分离含有单细胞的滴液实现的。通过特异性识别与给液滴加电（2kV～6kV），施加静电场，来实现分离。

过程细节：被激光照射的染色细胞会产生散射光和激发荧光。这两种光信号同时被光电二极管和光电倍增管接收后转换成电脉冲信号。无论是散射光或荧光信号，检测的目的都是要分析不同的粒子。分析的方法有两种，一是测量粒子通过激光束的最大电压（与荧光强度成正比），二是测量脉冲的面积。再经过A/D 转换器将脉冲信号变换成二进制数字信号由计算机处理。光信号基本上反映了细胞体积的大小，荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度。这种属分析型流式细胞仪。分选型则是则是将液滴充电后送入上面描述的分选器中进行分离，目的是为了将所需的细胞做进一步的培养、观察和实验。

染色体倍性不同的细胞，染料吸附于染色体的量迥异，激发的荧光强度限定于一定区间。因此可以对染色体倍性实施鉴定。

总而言之，流式细胞仪能够对细胞的性质进行系列分析，是细胞学研究的重要工具。

[1] 何克健.流式细胞技术与流式细胞仪[J].医疗装备,2000(05):6-8.
[2] 罗庆,高建有,李洁维,叶开玉,莫权辉,蒋桥生,查满荣,王发明,刘世彪.利用流式细胞仪对51份猕猴桃种质染色体倍性的鉴定[J/OL].生物学杂志:1-8[2022-06-02]. http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1081.Q.20220321.1515.00

『伍』 生物实验室必备设备有哪些

1、样品保存:
冰箱/超低温冰箱(荷兰SKADI)
液氮罐(英国STATEBOURNE CRYOGENICS)

2、样品前处理:
移液器(gilson,ependof,biocos)
天平(梅特勒，赛多利斯)
均质/搅拌系列(IKA,KINEMATICA,LABSCAN)
离心机(sigma,日立，ebendof,hettich,beckman)
冻干机(荷兰SKADI)
高压灭菌器(MMM,SANYO,STURDY)
电泳仪(bio-rad,epondorf)

3、培养过程
培养箱系列(美国SI)
生物安全柜/超净工作台(telstar,baker,thermo)
发酵罐(infors，labconco)
摇床(IKA,INFORS,LAB-LINE)
水浴(LABSCAN,JULABO)
转瓶机(WHEATON,IBS)
PCR(thermo，epondorf,ABI,BIO-RAD,MJ)
酶标仪(Awareness，epondorf,ABI)

4、观察分析
显微镜(Hund,olympus，leica，nikon)
菌落计数仪(INTERSCIENCE)
流式细胞仪(bd,日立)
DNA测序仪(ABI)
高效色谱系列(agilent,whatman,abi,dionex,mathon)

5、其它
洗瓶机(labconco，miele)
超纯水系列(MILLIPORE,ELGA,PALL)
超声波清洗(英国Prima)

微生物实验室主要用于无菌环境下微生物提纯、分离、增殖及鉴定等工作，对无菌环境的要求很高。那么微生物实验室中需要用到哪些仪器设备呢？

一、无菌室

无菌室是实验室的核心部分，主要为样品提供保护，保证实验结果的准确和人员的安全。

二、超净工作台

微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养，那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境。超净工作台的主要用途是微生物的接种及处理时的无菌操作。

六、微波炉/电炉

其主要作用是用于溶液的快速加热，微生物固体培养基的加热溶化等。

七、摇床

摇床又称摇瓶机，它是培养好气性微生物的小型试验设备或作为种子扩大培养之用。

八、冰箱

冰箱是实验室中保存试剂和样品必不可少的仪器。微生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存，有些要求是负20度保存，实验人员一定要看清试剂的保存条件，放置在恰当的温度下保存。

九、显微镜

微生物个体微小，必须借助显微镜才能观察清楚它们的个体形态和细胞结构。因此，在微生物学的各项研究中，显微镜就成为不可缺少的工具。

十、生物安全柜

微生物实验中所涉及到的部分试剂和样品微生物有些是有毒的，对于操作人员来说伤害比较大。为了防止有害德悬浮微粒、气溶胶的扩散，可以利用生物安全柜对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全的保护作用。

微生物实验室用到的仪器设备都有哪些

A2生物安全柜

十一、菌落计数器

菌落计数仪可帮助操作者计数菌落数量。通过放大，拍照，计数等方式来准确的获取菌落的数量。有些高性能的菌落计数器还可直接连接电脑来完成自动计数的操作，方便快捷的计数。

十二、分光光度计

分光光度计在微生物试验中用于测定微生物悬液的浓度，可以正确选取合适的培养时间。

十三、离心机

离心机是用于收集微生物菌体以及其他沉淀物。有冷冻离心机和常温离心机之分。

十四、液氮罐

液氮罐里装有液氮，可用于微生物实验室中各菌种的长期保存。

『陆』 为什么不用油作为流式细胞仪分选的鞘液

并不一定要用等渗的缓冲液，很多地方就是用超纯水的（分选仪不能用水）。对机器的保护作用更好。
因为鞘液和样本的压力不同，流速也不一样，所以不会混合。同样都是水或者水溶液，表面张力也一样。如果用了油，粘滞度很高，无法高速通过管路。表面张力大，干扰样本轴流，另外折光性也不一样了。而且肯定成本也会贵很多。