『壹』 菌液如何稀释,是用无菌水还是用培养基
菌液如何稀释,是用无菌水还是用培养基
用于大肠杆菌的液体培养基:
GYT培养基(Tung and Chow 1995)
10%(v/v)甘油
0.125%(m/v)酵母提取物
0.25%(m/v)胰化蛋白胨
使用0.22um滤器过滤除菌,分装成2.5ml一份,保存于4℃。
LB(Luria-Bertani)培养基
配制每升培养基,应在950ml去离子水中加入:
胰化蛋白胨 10g
酵母提取物 5g
NaCl 10 g
摇动容器直至溶质溶解。用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。
M9培养基
配制1L培养基,应在750m1无菌去离子水(冷至50℃或50℃以下)中加入:
5×M9盐溶液 200ml
1 mol/LMgSO4 2 ml
适当碳源的20%溶液(如20%葡萄糖) 20ml
1 mol/LCaCl2 0.1 ml
灭菌的去离子水至980ml。
如果需要,可在M9培养基中补加适当氨基酸和维生素的贮存液。
5×M9盐溶液配制:用无离子水溶解下列盐类,终体积为1L:
Na2HPO4·7H2O 64g
KHPO4 15g
NaCl 2.5g
NH4Cl 5.0g
分装成200ml一份,在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌15min。
分别配制MgSO4溶液和CaCl2溶液,高压灭菌。用无菌水将5×M9盐溶液稀释至980ml后,加入MgSO4和CaCl2溶液。葡萄糖溶液在加到稀释的M9盐溶液之前,用0.22um滤器过滤除菌。当使用含有染色体上脯氨酸生物合成操纵子缺陷[△(lac-proAB)]的大肠杆菌以及互补的proAB基因在F'质粒上时,在M9基本培养基中补加下列成分:
0.4%(m/v)葡萄糖(右旋糖)
5mM MgSO4·7H2O
0.01%硫胺
『贰』 微生物配置培养基用什么水
不同的来培养基选用不同的水
细胞培养基源一般用新鲜三蒸水或Millipore超纯水(分子生物学及生命科学,动物细胞及植物细胞培养,组织培养,试管婴儿,电泳、凝胶分析,生物工程,培养基制备)
医院检验科培养病人标本的培养基用的是普通蒸馏水
现在有的实验室使用的是反渗透纯水,应用:① 实验室器皿的最后清洗② 缓冲液、化学试剂配制用水③ 微生物培养基制备用水④ 氢气发生器、室内加湿器、高压消毒锅用纯水⑤ 人或实验动物饮用水等
超纯水的应用① 医院、医药制剂室及中心供应室用纯化水和高纯水② 各种医疗用生化仪、分析仪、血液透析仪用水③ 分析试剂及药品配置稀释用水④ 生理、病理、毒理学实验用水⑤ 动、植物细细胞培养用水⑥ 原子吸收光谱用水⑦ 试管婴儿用水⑧ 各种高效液相色谱、离子色谱用水⑨ 其他各种实验室用水和医药用水
『叁』 为什么制备ms培养基用的是蒸馏水而不是无菌水
因为ms培养基要经过高压蒸汽灭菌才能使用,使用用蒸馏水和无菌水是一样的,再加上蒸馏水比无菌水便宜(或者说常见),所以用蒸馏水。
『肆』 纯化水中的微生物检测怎么做 要详细
采用滤膜法进来行微生物检测源是一种国际公认的微生物标准检验方法,其得到AOAC、美国、欧洲和日本等国家的药典、FDA和EPA等组织的承认,广泛应用于环境监测、食品及饮料工业、化妆品、制药工业品质控制和电子工业等领域。赛多利斯公司的滤膜法微生物检测产品成功地应用于滤膜法已有20多年的历史,实用而且方便实用,它简化了微生物检测程序。
滤膜法微生物检测:
将适当孔径的滤膜放入滤器,过滤样品,由于滤膜的作用而将微生物保留在膜的表面上。样品中微生物生长抑制剂可在过滤后用无菌水冲洗滤器而除去。然后,将滤膜放在培养基上培养,营养物和代谢物通过滤膜的微孔进行交换,在滤膜表面上培养出的菌落可以计数,并和样品量相关。
滤膜法的优点:
- 与直接法比较,可以检测大量的样品
- 浓缩效应使微生物检测的准确度提高
- 带有菌落的滤膜,可作为检测的永久记录存档
- 可见的菌落和样品量直接对应,得出定量结果
操作具体一点就是:薄膜过滤法检测,一个样过滤一份,就是200ml的纯化水通过滤膜,将该滤膜浸泡在灭菌好的l生理盐水中,再接种到平皿中,制成10级、100级、1000级稀释倍数的细菌、霉菌和酵母菌稀释培养皿,即可
『伍』 无菌水可以用饮用纯净水来代替么
严格的来讲不可以,因为无菌水是经过特殊处理的水。而纯净水只是相对的纯。两种水的质量是不一样的。
『陆』 纯化水中的微生物检测怎么做 要详细
采用滤膜法进行微生物检测是一种国际公认的微生物标准检验方法,其得到AOAC、美国、欧洲和日本等国家的药典、FDA和EPA等组织的承认,广泛应用于环境监测、食品及饮料工业、化妆品、制药工业品质控制和电子工业等领域.赛多利斯公司的滤膜法微生物检测产品成功地应用于滤膜法已有20多年的历史,实用而且方便实用,它简化了微生物检测程序.
滤膜法微生物检测:
将适当孔径的滤膜放入滤器,过滤样品,由于滤膜的作用而将微生物保留在膜的表面上.样品中微生物生长抑制剂可在过滤后用无菌水冲洗滤器而除去.然后,将滤膜放在培养基上培养,营养物和代谢物通过滤膜的微孔进行交换,在滤膜表面上培养出的菌落可以计数,并和样品量相关.
滤膜法的优点:
- 与直接法比较,可以检测大量的样品
- 浓缩效应使微生物检测的准确度提高
- 带有菌落的滤膜,可作为检测的永久记录存档
- 可见的菌落和样品量直接对应,得出定量结果
操作具体一点就是:薄膜过滤法检测,一个样过滤一份,就是200ml的纯化水通过滤膜,将该滤膜浸泡在灭菌好的l生理盐水中,再接种到平皿中,制成10级、100级、1000级稀释倍数的细菌、霉菌和酵母菌稀释培养皿,即可