① tris-甘氨酸如何配置电泳缓冲液
所用试剂:Tris碱,甘氨酸和SDS
含量配方:30.3Tris碱,188g甘氨酸,10gSDS,此产品为干粉混合物。用时可以用双蒸水溶解成1L,配成10倍浓缩液,用时再稀释10倍,配好的电泳液用于SDS-PAGE蛋白电泳,可反复使用三到五次,如果发现有明显沉淀或者漂浮时,请丢弃换新的。
电泳缓冲液是核酸、蛋白质凝胶电泳系统的一个重要组成, 是电泳场中的导体,也是维持电泳系统恒定pH值的必要条件,成分及其离子强度影响物质的电泳迁移率,应避免与被分离的样品发生化学反应而改变样品的理化性质或使 其丧失生物活性。
电泳缓冲液中的EDTA可螯合Mg离子等二价阳离子,防止电泳时激活DNA酶及Mg离子与核酸生成沉淀。
(1)电泳缓冲液一定要纯水吗扩展阅读:
注意事项:
1、所有试剂、溶液以及样品的包装上必须要有标签。标签要完整、清晰,表明试剂的名称、规格、质量。
2、溶液除了表明品名外,还应表明浓度、配置日期等。万一标签脱落,应照原样贴牢。决定不允许在容器内装入与标签不相符的物品。
3、无标签的试剂必须取小样检定后才可使用。不能使用的化学试剂要慎重处理,不能随意乱倒。为了保证试剂不受污染,应当用清洁的牛角勺或不锈钢小勺从试剂瓶中取出试剂,绝不可以用手抓取。若试剂结块,可用洁净的玻璃棒或瓷药铲将其捣碎后取出。
4、液体试剂可用洗干净的量筒到取,不要用吸管伸入原试剂中吸取液体。从试剂瓶中取出的、没有用完的声誉药品,不可再倒回原瓶。
5、为了安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
参考资料来源:网络-电泳缓冲液
参考资料来源:网络-聚丙烯酰胺凝胶电泳
② 电泳法的电泳缓冲液
电泳缓冲液还有一个组分是EDTA(乙二胺四乙酸),加入浓度为1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+
等离子,防止电泳时激活
DNA酶,此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀。
此外,我们常常用“电泳法”判断液体的性质,是胶体还是溶液。在高中化学中我们就用过这种方法判断给定的液体是否为胶体。
③ 配制western blot 的各种缓冲液不用去离子水可以吗
1.配制电泳试剂用水蒸馏水单蒸水,条件允许,用更纯水;
2.般实验室都蒸馏水,双蒸水,其实双蒸水能满足数实验室要求,纯水才所谓离水
感觉这样的提问没有什么意义
不要多想,想多了累
④ 聚丙烯酰胺凝胶电泳可不可以不需要加水
你说的是制完胶待凝之前吧,不能的,必须加水,否则聚丙烯酰胺凝固后在上面会由于干涸出现凹面甚至断裂,影响后续跑带结果~
⑤ 电泳后有两道水洗,依次是UF洗和纯水洗,请问第二个水洗必须用纯水洗还是可以用自来水。
我认为,电泳后的第一道水洗(UF0)是部件刚出电泳槽,洗下的电泳漆直接回到电泳槽内,回然后再答经UF1和UF2水洗,因为UF1和 UF2水洗,洗下来的水中还含有电泳漆固体份0.8--0.5%电泳漆,为了电泳漆回收利用,最好不要省去这些工序,经过UF0、UF1、UF2水洗后再用纯水喷淋洗,效果很好。
⑥ TBE缓冲液可以用自来水配吗还是必须得是超纯水
配试剂不能用自来水的。最好是用蒸馏水或超纯水。
⑦ 全细胞反应为什么要用缓冲液,纯水不行吗
您好,缓冲液是为了调节细胞反应的ph值,如果用纯水,反应之后会产生影响反应继续进行的物质,可能ph发生变化,从而使细胞失活。
⑧ 电泳缓冲液的配制方法
50×TAE Buffer 配制方法:
1。称量氨基丁三醇 242g,Na2EDTA.2H2O 37.2g 于1L烧杯中;
2。向烧杯中加入约600ml去离子水,充分搅拌均匀;
3。加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解;
4。用NaOH调pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存。
使用时稀释50倍 即1×TAE Buffer
10×TBE Buffer配制方法:
1。称量氨基丁三醇 108g,Na2EDTA.2H2O 7.44g,硼酸55g 于1L烧杯中;
2。加入约700ml去离子水,搅拌均匀;
3。用NaOH调pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存。
使用时稀释10倍 即1×TBE Buffer
⑨ 丙烯酸电泳漆用什么水可以调,非要用纯水,和蒸留水吗,自来水可以吗
如果想涂装线长期稳定运行的话,必须用纯水或蒸馏水。
以下是个人经验内,仅供参考,后果容自负。
根据个人经验,如果采用自来水配槽是可行的,前提是自来水电导率不能超过300,此为其一;其二,电泳槽液更新周期短,也就是说,每天电泳的生产量大,补加新漆的量也大,如果更新周期在一个月之内的话,可以用电导率低于300的自来水配槽及生产过程中加水;其三,维持电泳槽液溶剂含量在标准的上限,如厂家建议溶剂含量范围为0.8-1.5%,那平时生产时,须将溶剂含量维持在1.5%左右;其四,电泳前的水洗可用电导率低于300的自来水,前提是更换的频次要多,一般建议一班至少更换一次,上限不能超过400;其五,泳后水洗用自来水清洗时,建议在下线用高压水枪再喷洗一次,会对漆膜外观有好的改善。大概就这些。
再说一次,用自来水的话,有一定的风险性,建议不懂的人,不要轻易采用,否则后果自负!!
⑩ 电泳脱水剂一定要加纯水吗
电泳脱水剂-定要加纯水。