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纯化水冲洗色谱柱

发布时间:2022-08-22 00:34:45

❶ 在冲洗高效液相C18反相柱的时候,为什么不能用纯水

相C18色谱柱(即憎水柱子)如果用纯水冲洗后,如果立即停泵则由于其憎水(疏水专)的缘故使得柱子内属的水因而流失掉,长时间停泵使得柱子干掉(变干),会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷(也说成是失去支撑倒下),柱子就这样报废了。那么一旦冲洗柱子用了纯水相怎么办呢?诶!不要惊慌,只要你不停泵,上述情况不会立即发生,我们只要保证最后用有机相冲洗柱子,停泵后使柱子内留存的是有机相,就无大碍,

❷ 液相色谱柱应该怎样清洗

朋友,什么柱子规格,新柱旧柱?

正相or反相?

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❸ 离子色谱柱能用纯水冲洗吗,这样是否会影响柱子的性能。

按看说明书或咨询色谱柱厂商,防止损害色谱柱,离子柱都不便宜,小心为上。
用纯水短时间内冲洗色谱柱,通常不会对色谱柱造成较大的损伤,但如果长时间用水冲洗色谱柱则
可能引起固定相流失和相塌陷现象,所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱,建议在水中加入一定
量的甲醇或乙腈进行冲洗,通常水的含量<90%不会对色谱柱造成任何影响。
原因分析:
首先,由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质,硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一
定浓度有机溶剂的流动相中要大得多,所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失,引起柱效下降。
其次,对于常规的 C18 柱而言,由于C18 长链与水是不互溶的,C18 长链之间的相互作用力大于
C18 与水分子的作用力,长时间的用水冲洗,使得C18 长链之间相互靠近,水流的冲刷,导致相互联结
的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面,对疏水性物质的保留能力下降,即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出
现相塌陷的现象,有些厂家推出了纯水柱(如我公司的UltimateTM AQ-C18 柱),这种纯水柱可以用纯
水作流动相而不会产生相塌陷,这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。
第三,如使用过含缓冲盐的流动相的色谱柱,用纯水冲洗,并一定能将缓冲盐完全洗去。因为,由
于缓冲盐难溶于有机溶剂,C18 反相柱中用的填料是在硅胶表面上接上许许多多的C18 长链,相当于一
个疏水的有机相,而硅胶基体被有机物质包裹着,所以用纯缓冲盐水溶液做流动相时也许缓冲盐不容易
到达硅胶基质,不至损害基体。但所用的流动相通常会含一部分有机溶剂,而且这些有机溶剂与C18
长链是互溶的,因此有机溶剂的加入增强了流动相渗入硅胶基质的能力,能使部分缓冲盐达到硅胶基质。
同样的道理,用纯水冲洗只能洗掉表面的缓冲盐,而渗入深处的缓冲盐则仍然残留在那里。所以最好在
水中加入部分有机溶剂进行冲洗,一般的C18 柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要视分析
时使用的流动相来定,原则上,用于冲洗的流动相中水的比例应该等于或高于(缓冲盐用后清洗的情况,
推荐使用“等于”)分析时所用流动相中水的比例。

❹ 液相色谱C18柱堵塞后如何冲洗柱子,能用纯水 冲柱子吗

C18柱子不能用纯抄水冲洗,再说本来就堵了,压力很高应该选择压力低的溶剂。
如果你确定是堵塞了,就用纯乙腈反冲,先用低一点的流速,比如01ml/min,看压力情况,不要超过200bar,再慢慢提高流速,但不要超过1.的流速,如果是真的堵了,可能会压力慢慢降下来的。
如果上面方法不行,那还有可能是盐析堵的,那就用乙腈:水=90:10反冲。

❺ 为什么普通C18色谱柱不能用纯水冲洗

容易引起疏水坍塌,把强保留物质冲出来,会毁了柱子的,所以水相不能超过95%,最开始的梯度淋洗也是高有机相到高水相,但是不是纯水相。

❻ 高效液相色谱

请问你是使用什么牌子的高效液相色谱仪?我使用过安捷伦的和岛津的,定量内管2ML但是实际进样容量是根据你自己在仪器中设置的,一般为10-20UL,如果管道是空的那么不要上色谱柱,先用超声过的纯化水清洗系统,再根据所选择的色谱柱来选择下一个清洗系统的溶剂,如果你需要的流动相为乙腈那么使用甲醇清洗系统,也可以用乙腈,但是乙腈的价格是甲醇的4倍,所以一般用甲醇,冲洗完毕后上柱子,先脱气,然后再使用需要的流动相冲洗液(根据柱子来选择冲洗的液体)冲洗。一般冲洗的体积为柱子的10倍体积即可。然后上流动相和样品,再脱气,即可进样。(在任意一次断开系统循环之后一定要脱气,否则会引起走样的基线不稳或出现鬼峰或损伤色谱柱)特别要注意以下两种色谱柱冲洗液的选择(1.葡聚糖网状分子作为色谱柱的,不可使用有机溶剂清洗2.禁用水系溶剂的色谱柱)前一种情况会导致葡聚糖网状分子破裂,堵塞管路,后者会破坏色谱柱。都是极为麻烦的情况。现在的仪器都是自动进样的,在超声脱气和系统自动排气双保险之后基本没有空气进入柱子的可能,纯手打,望采纳

❼ 色谱柱能否用纯水冲洗冲洗后会有什么样的影响

如果流动相里本来就有水 短时间内没问题 切成流动相多冲一会儿就没事了

❽ 阴离子色谱柱能用纯水冲洗吗

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❾ 那些HPLC色谱柱可以用纯水

你问的应该是反相
色谱柱
,因为
凝胶过滤

纯水
相是司空见惯的。
Agilent的Bonus系列,Aichorm的Aqua系列,都是可以做纯水相的。
但你如果只是考虑
梯度
起点的高
水相
比例,那就不必了,普通的C18、C8都可以用纯水相短时间冲洗,不超过10个
柱体积
,是没什么问题的。

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