天津拓扑超纯水

『壹』 星三角变换 能不能解决非平面的纯电阻拓扑结构的等效

能用。只要是拓扑同构就等效

至于变换之后是否能够解决问题，就不好说了

『贰』 语瓶实验室洗瓶机安装使用需要有超纯水机么

实验室里面了一般都配备的有实验室超纯水设备的，最好配上。

『叁』 RNA分离及提取的方法

分子克隆技术（华农）

实验一 质粒的制备

质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体，它在基因操作中具有重要作用。质粒的分离与提取是最常用、最基本的实验技术。

质粒的提取方法很多，大多包括3个主要步骤：细菌的培养、细菌的收集和裂解、质粒DNA的分离和纯化。本实验以碱裂解法为例，介绍质粒的抽提过程。

实验目的：掌握碱裂解法抽提质粒的原理、步骤及各试剂的作用。

实验材料：含有质粒pUC18载体的大肠杆菌菌液，克隆有水稻外源片段的BAC的大肠杆菌菌液。

实验原理：在pH 12.0 ~ 12.6碱性环境中，细菌的线性大分子量染色体DNA变性分开，而共价闭环的质粒DNA虽然变性但仍处于拓扑缠绕状态。将pH调至中性并有高盐存在及低温的条件下，大部分染色体DNA、大分子量的RNA和蛋白质在去污剂SDS的作用下形成沉淀，而质粒DNA仍然为可溶状态。通过离心，可除去大部分细胞碎片、染色体DNA、RNA及蛋白质，质粒DNA尚在上清中，然后用酚、氯仿抽提进一步纯化质粒DNA。

实验步骤：

1. 取含有pUC18质粒的大肠杆菌菌液于LA培养基上37℃过夜培养；

2. 用无菌牙签挑取单菌落，接种于含有Amp抗生素的LB培养基中，37℃摇床~250 r/min过夜培养；

3. 吸取1.5 ml菌液，12000 g离心2分钟，收集菌体，倒掉菌液；吸取1.5 ml菌液，再次收集菌体，尽量将菌液倒干净；

4. 加入300 ml溶液 I振荡打匀，重新悬浮细胞，震荡混匀（注意：应彻底打匀沉淀或碎块）； （剧烈）

5. 加入300 ml溶液II，轻柔颠倒混匀，放置至清亮，一般不超过5分钟；

6. 加入300 ml溶液III颠倒混匀，放置于冰上10分钟，使杂质充分沉淀；（温和）

7. 12000 g离心10分钟；

8. 吸取800 ml上清液（注意：不要吸取到飘浮的杂质）至另一Eppendorf管中，加入2/3体积的异丙醇，室温下放置5分钟；

9. 12000 g 常温离心15分钟；

10. 倒尽上清，加75％乙醇浸洗除盐（放置片刻或离心3分钟后倒去上清）；

11. 室温放置或超净台上风干DNA；

12. 加40 ml灭菌超纯水或TE溶解；

13. 质粒、BAC的质量检测，于-20℃保存。

附注：质粒检测

电泳检测：质粒电泳一般有三条带，分别为质粒的超螺旋、开环、线型三种构型

吸光值检测：采用分光光度计检测260nm、280nm波长吸光值，若吸光值260nm/280nm的比值介于1.7－1.9之间，说明质粒质量较好，1.8为最佳，低于1.8说明有蛋白质污染，大于1.8说明有RNA污染。

实验二 DNA的琼脂糖凝胶电泳

带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳的种类多，应用非常广泛，它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。琼脂糖凝胶电泳由于其操作简单、快速、灵敏等优点，已成为分离和鉴定核酸的常用方法。

实验目的：掌握琼脂糖凝胶电泳的原理，学习琼脂糖凝胶电泳的操作。

实验材料：质粒DNA、BAC、植物总DNA

『肆』 RNA的提取方法步骤及原理.

RNA抽取一般使用Trizol法抽提:

Trizol是一种总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速裂解细胞，抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。

Trizol作用原理:

在匀质化或溶解样品中，Trizol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后，裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。

水相转移后，RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后，用乙醇可从中间相沉淀得到DNA，加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。

(4)天津拓扑超纯水扩展阅读

与DNA不同，RNA一般为单链长分子，不形成双螺旋结构，但是很多RNA也需要通过碱基配对原则形成一定的二级结构乃至三级结构来行使生物学功能。

RNA的碱基配对规则基本和DNA相同，不过除了A-U、G-C配对外，G-U也可以配对。

在细胞中，根据结构功能的不同，RNA主要分三类，即tRNA（转运RNA），rRNA（核糖体RNA），mRNA（信使RNA）。mRNA是合成蛋白质的模板，内容按照细胞核中的DNA所转录；tRNA是mRNA上碱基序列（即遗传密码子）的识别者和氨基酸的转运者；rRNA是组成核糖体的组分，是蛋白质合成的工作场所。

『伍』 RNA的提取方法

1、酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎细胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯萃取，高速离心后取上清，所得DNA大小为100-150kb

2、甲酰胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得DNA可得DNA200kb左右。

3、玻璃棒缠绕法：用盐酸胍裂解细胞，将裂解物铺于乙醇上，然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅，DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。

4、异丙醇沉淀法：基本同1法，仅用二倍容积异丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在异丙醇中可溶状态）

5、表面活性剂快速制备法：用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。

6、加热法快速制备：加热96℃-100℃，五分钟，然后离心后取上清，可用于PCR反应。

7、碱变性快速制备：先用NaOH作用20分钟，再加HCI中和，离心后取上清，含少量DNA。

(5)天津拓扑超纯水扩展阅读：

DNA提取原则：

1、保证核酸一级结构的完整性；

2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；

3、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度；

4、其他核酸分子，如RNA，也应尽量去除。

『陆』 请问拓扑中的胞腔是什么定义，跟单纯性有什么关系和区别么

粗略的说如果一个拓扑空间和某个n维的单位球B^m同胚的话，我们称之为是一个n维胞腔（如果同胚于开球的话就称为开胞腔）。胞腔可以用来定义CW复形和CW链复形之类的东西，用以构造相应的上同调，额，可以参看相应的代数拓扑的书。

与单纯性有什么关系？你大概是打错了吧？单纯形还差不多，这是单纯形的一个推广，明显单纯形是同胚于某个单位球的。

『柒』 在拓扑学中任意一个三维空间是否可以完全单纯剖分

什么是单纯剖分？

『捌』 请问拓扑中的胞腔是什么定义，跟单纯性有什么关系和区别么

粗略的说如果一个拓扑空间和某个n维的单位球B^m同胚的话，我们称之为是一个n维胞腔（如果同胚于开球的话就称为开胞腔）。胞腔可以用来定义CW复形和CW链复形之类的东西，用以构造相应的上同调，额，可以参看相应的代数拓扑的书。
与单纯性有什么关系？你大概是打错了吧？单纯形还差不多，这是单纯形的一个推广，明显单纯形是同胚于某个单位球的。

『玖』 纯金属晶体最密堆积数位12,拓扑密堆相（合金相）的最高堆积数能达到多少

12 只要前提是合金组成成分的原子半径很接近.