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凝胶过滤层析流速快吗

发布时间:2024-04-29 04:58:56

Ⅰ 凝胶过滤法提取蛋白质的洗脱图谱为什么只出现一个峰值阿本来应该是有两个的

我是做了两次实验才成功,第一次只得到一个峰,第二次得到了两个峰。
原因我总结有如下几点:
1)、每支管收集的溶液量不一致,误差较大,导致只有一个吸收峰。

2)、可能是流速过快,小分子物质来不及扩散,与大分子物质一起被洗脱出来;或者是流速过慢,层析时间过长,小分子物质追上了大分子物质一起被洗脱出来。
3)、也可能是未能及时去接被洗脱出来的物质,有些成分已流出,只接到了后面流出来的物质,则为一个峰。
4)、样品未洗脱完全就终止了反应,小分子物质还停留在层析柱内,所以只收集到一种物质,只得到了一个峰。

【希望能帮到广大查询此问题的朋友们,因为我是被做实验报告讨论题给逼出来的。^_^】

Ⅱ 用葡聚糖凝胶G-100层析,自己装柱,可是下液流速特别慢,半天才出一滴,请问是什么问题一开始还挺快

1、考虑一下被分离组分的物性,思考一下具有该物性的被分离组分是否适合于葡聚糖凝胶柱分离;
2、要选择合适的流动相;
3、装柱前,凝胶的处理也很重要,务必除尽气泡;装柱过程中,也得严格按正确操作进行;
4、流速,压力也值得探讨、摸索一下。

Ⅲ 凝胶过滤层析中凝胶颗粒的直径越小越好还是越大越好 为什么

这个要视你的要求而定,颗粒越小分离度越好,但同时柱压越大,流速越慢,一般在满足你分离度要求的情况下,颗粒直径越大越好,这样流速快,可以减少纯化时间。

Ⅳ SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和凝胶层析方法分离蛋白质的异同点。

凝胶层析的固定相是惰性的珠状凝胶颗粒,凝胶颗粒的内部具有立体网状结构,形成很多孔穴。

当含有不同分子大小的组分的样品进入凝胶层析柱后,各个组分就向固定相的孔穴内扩散,组分的扩散程度取决于孔穴的大小和组分分子大小。

比孔穴孔径大的分子不能扩散到孔穴内部,完全被排阻在孔外,只能在凝胶颗粒外的空间随流动相向下流动,它们经历的流程短,流动速度快,所以首先流出;

而较小的分子则可以完全渗透进入凝胶颗粒内部,经历的流程长,流动速度慢,所以最后流出;分子越大的组分越先流出,分子越小的组分越后流出。

聚丙烯酰胺凝胶电泳不是通过凝胶颗粒内部的孔穴保留小分子的,
聚丙烯酰胺凝胶是通过三维网状结构分离,所以小分子先出,大分子比较慢出。

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