❶ 取小白鼠肝脏匀浆进行菌落计数
实验原理:
利用密度梯度法和差素分离法经行粗分离细胞器。得到纯化的线粒体,经行超活染色,其原理是Janus Green B可以将线粒体猛族经行染色磨型,由于线粒体中存在相关的氧化酶,故Janus Green B在线粒体中不会被还原,而在细胞质中则会被还原成无色物质。
过程:处死小白鼠 解刨取出肝脏 剪碎肝脏组织 加入少量0.25M冷的蔗糖溶液,转移至匀浆器里 充分碾磨,制成肝脏匀浆,过滤 准备一5ml离心管,加入0.34M冷冻蔗糖溶液 沿管壁缓慢加入肝脏匀浆,可见其分层。平衡离瞎知猜心杯,开启低速离心机
❷ 新鲜的动物肝脏匀浆是有机催化剂吗
是的。
新鲜的动物肝脏内含过氧化氢酶棚裤吵。
过氧化物酶是过氧化物酶体的标志酶纯简,是其一类氧化还原酶,它们能催化很多反应。过氧化物酶是以过氧化氢为链侍电子受体催化底物氧化的酶。主要存在于载体的过氧化物酶体中,以铁卟啉为辅基,可催化过氧化氢,氧化酚类和胺类化合物和烃类氧化产物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类、醛类、苯类毒性的双重作用。
❸ 为什么鸡肝要制成匀浆之后再进行酶脆化试验
为什么鸡肝要制成匀浆之后再进行酶脆化试验
鸡肝在制成匀浆之后,才能充分释放细姿唤渗胞中的过氧化氢链闹酶,从而加速过氧化氢的分解,这时候再进去没碎化,实验会更加的快捷,否则的话,实验现象不迹脊明显
❹ 已知pI值为6.2,如何从肝中分离提取纯化鉴定某种酶
1).脱脂肝粉制备:将新鲜动物肝脏切成碎块、搅碎、充分匀浆,然后加入丙酮后离心,收集沉淀,干燥。然后将肝粉颗粒研磨、过筛、收集细粉,加入三氯甲烷充分搅拌,抽滤,重复两次,收集滤饼、干燥。
2).酶粗品制备:将肝粉用氨水溶液恒温抽提两次,合并滤液。将所得水溶液用乙酸溶液酸化、离心,收集上清液。然后调PH至中性,用硫酸铵初次盐析、离心、收集橘备上清,再次盐析、收集沉淀,得弊做酯酶粗品。
3).精制:将粗品用磷酸盐缓冲液溶解后,经过阴、阳圆卜毁离子交换层析柱纯化,接收主峰,浓缩,然后再经过凝胶层析柱分离,接收主产物峰。
4)超滤、浓缩、冻干。将收集的溶液用微孔滤膜预过滤后,超滤、浓缩、冻干。