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离子交换色谱保留时间影响因素有

发布时间:2023-04-05 19:12:10

A. 在液相色谱中,什么因素对保留时间的影响最大

一般是被测物的极性影响较大激肢,极性越强蠢铅衡,越容易被极带做性流动相(液相色谱流动相大多是强极性的)洗脱,保留时间越短,极性约弱,极性流动相的洗脱能力就越弱,保留时间约长。

B. 决定色谱仪保留时间的因素有哪些

    所谓保留时间锁定,就是使特定化合物的保留时间在不同仪器、不同色谱柱(但标称固定相和相比相同)之间保持不变。

一、概述

决定保留时间的因素如下:

1、化合物的性质、固定唤宽液的性质。

2、操作条件。即载气流速、柱温、毛细管柱规格和检测器类型等。

二、详细说明

1、载气控制

对于同种载气来说,压力和流速是影响保留时间的参数;

不同厂家的压力表和流量计的制造精度有所不同,故当不同仪器的压力祥链伏和流量显示完全一致时,柱内流量也不尽相同;

现在有了EPC,这一问题基本得到了解决;虽然同一厂家制造的EPC不可能每项都严格一致,但差异微小,通过压力的自动调节完全可以补偿这一差异。

2、温度控制

保留时间对温度极为敏感,过去采用水银温度计测量柱温时,重现性显然有问题。现在都用热敏元件与电子线路来控制温度,精度大为提高。不同仪器间温度重现性令人满意。即使有0.5℃的温度差异,我们仍能通过调节柱前压的办法来使保留时间达到重现。

3、色谱柱规格

不同厂商的色谱柱,尽管标称规格一致,但难免有内径的不均匀、固定液膜厚的变化、以及柱长的不精确,这些都会造成保留时间的波动。

同一根色谱柱在使用过程中会发生变化,比如重新安装或因柱污染而截去1~2cm后,若其他操作条件不变,保谨携留时间就不能重现了。

目前,同一厂商的色谱柱制造重现性已相当高,而不同厂家的色谱柱尚不能完全重现,尤其是极性柱。但我们如果采用同一厂家的色谱柱,就可基本解决这一问题。至于色谱柱长度的变化,可以通过调节柱前压来补偿。

4、检测器类型

常规检测器:常压下工作;

MS:高真空下工作;

AED:高于大气压(如,10kPa)下工作。

这样,当比较常规检测器和MS或AED所得结果时,即使柱前压严格一致,柱压降也不同,保留时间就不能重现。采用EPC时,就很容易通过调节压力使柱压降保持相同。

C. 操做液相色谱时影响保留时间的变化的因素有哪些

影响液相色谱保留时间的因素:
1、流动相的比例与极性缓高。对于不同的柱子,分离度和保留时间往往扰段尺都会有点差别,所以在操作的时候:a、可以适当调整流动相的比列,如甲醇—水(90:10),如分离效果与保留时间延长,可以调整88:12或者92:8或者95:5等。b、有时候还需要更换流动相的组成,甲醇就可以换成乙腈,看具体的实际操作而定。
2、柱子与柱温。不同的柱子保留时间会有所差别,主要是载体的吸附性和固定液的纯度不同,但保留时间一般不会相差太大,可以根据对照品或者标准品的保留时间指定。柱温在HPLC操作时,一般就调整到室温或者30度。
3、流速。流燃颤速的大小,液相色谱一般调整在0.8mL/min或者1.0mL/min。
4、进样量。进样量大,保留时间往往会延长。
5、输液系统的压力,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,保留时间将会缩短。
具体的影响因素还要在实际操作中慢慢考察,经过调整后才可以的到较好的色谱条件。

D. 影响色谱柱寿命的因素有哪些

1.流动相
在以水溶液为流动相时,水溶液中的微生物例如细菌容易生长,当用水溶液或有机酸缓冲液保护柱子时,一些霉菌可能在色谱柱中滋生,堵塞固定相颗粒间的空隙。由于湿法填充技术的问世,目前普遍使用的色谱柱填料直径一般都小于10um,流动相中的颗粒杂质很容易先沉积在柱头然后慢慢堵塞柱子。流动相的pH值对色谱柱也有影响,特别是对化学键合硅胶填料,水溶液的pH最适范围在2~7.5之间,当pH>8时,硅胶会释出生成絮状物堵塞柱子,且难以复原,柱效很快降低,甚至完全失效。当在缓冲液中加入有机溶剂例如甲醇或乙腈时,盐类的溶解度下降,会析出盐沉淀,堵塞柱子。同时流动相中的有机溶剂和盐会腐蚀色谱柱头的筛板,产生柱头凹陷。流动相的极性对柱子也有一定影响,对于硅胶柱,甲醇、水、冰乙酸等极性较大物质会破坏填料,反之,对于化学键合硅胶,极性小的物质如正丁醇、二氯甲烷等也起同样的作用。碱性溶液会破坏阳离子交换树脂色谱柱,而酸性溶液容易损坏阴离子交换树脂柱。
2. 样品和固定相
如果有少量或微量的样品不能够溶解在流动相中,在通过固定相会堵塞柱子。样品中的颗粒杂质也会堵塞柱子。样品组分例如糖、蛋白质等通过柱子时会产生不可逆吸附,这样固定相的活性点被覆盖。样品组分还会与固定相产生反应,尤其是对于氨基柱的影响较为严重,因为氨基易与酐、酮形成希夫(Schiff)缩合而减少活性点,使保留时间缩短。色谱柱键合相基团脱落、固定相分解和活性基团变性以及会影响柱效和保留时间的显著改变。大多数键合相都是通过硅氧硅键(Si-O-Si)连接在硅基质上,形成带有有机基团的固定相Si-O-Si-R(R为CnH2n+1),硅氧硅键可能在水溶液中水解而断裂,使键合基团脱落。

E. 离子交换色谱中缓冲液浓度的影响

主要体现在以下几个方面:
1、分离能力:缓冲液浓度的变化会影响离子交换树脂上的离子交换作用,从而影响不同离子之间的分离效果。通常情况下,随着缓冲液浓度的增加,同种姿森早离子之间的排斥力会增强,而不同离子之间的吸引力会减弱。
2、保留时间:缓冲液浓度的变化还会影响离子交换的保留时间。一般来说,缓冲液浓度越高,保留时间越长,反之亦然。
3、pH值:缓冲液的浓度和组成也会对溶迹雀液的pH值产生影响,进而影响离子交换的分离效果和保留时间。在离子交换色谱分析中春陵,选择合适的缓冲液浓度和组成可以通过调节溶液的pH值来优化分离效果。

F. 保留值受哪些因素影响

保留值受溶质分子结构、烷基键合固定相的特性、流动相性质影响。

1、溶质分子结构

在反相键合相色谱法中,溶质的分离以它们的疏水结构差异为依据的,溶质的极性越弱,疏水性也强,保留值越大。根据疏溶剂理论,溶质的保留值与其分子中非极性部分的总表面积有关,其与烷基键合固定相结出的面积愈大,保留值越大。

2、烷基键合固定相的特性

烷基键合固定相的作用在于提供非极性作用表面,察茄因此键合到硅胶表面的烷基数量就决定着溶质容量因子的大小。烷基的疏水特性随碳链的加长而增加,溶质的保留值也随着烷基碳链长度的增加而增人。

随着烷基碳链的增长,增加了键合相的非极性作用的表面积,其不仅影响溶质的保留值,还影响色谱柱的选择性,即随烷基碳链的加长其对溶质分离的选择性也增大。

3、流动相性质

流动相的表面张力愈大,介电常数愈大,其极性越强,此时溶质与烷基键合相的缔合能力越强,流动相的洗脱强度弱,导致溶质的保留值越大。



(6)离子交换色谱保留时间影响因素有扩展阅读

保留值主要由固定相比表面积、键合相种类和浓度决定困没数。

保留值通常随链长增长或键合相的疏水性增强而增大,对于非极性化合物通常遵循以下规则:(弱)非键合硅胶《氰基<C1(TMS)<C3<C4<苯基<C8≈C18(强)。

溶质保留值与固定相表面积成正比,普通载体(80A°)的比表面积约为250m²/g,而300A°孔径载体的比表面积约为60m²/g。

当其他条件相同时,溶质在300A°孔径(低表面积)色谱柱上的保留值大约为80A°孔径色谱柱上保留值的1/4(60:250),小孔隙柱如高保留的C18柱或石墨柱有利于强亲水性样品洗脱。

样品的保留值也可以通过改变流动相组成或溶剂强度来调整,溶剂强度取决于有机溶剂的性质和其在流动相中的浓度。在反相色谱中,采用高汪首溶剂强度、低极性的流动相时可获得较低的保留值。

固定相的不同也可以导致选择性发生变化,氰基柱、苯基柱、C8柱、C18柱等的选择性有很大差异,一般应优先考虑C8柱、C18柱,然后是氰基柱,再次是苯基柱。

G. 影响气相色谱中保留时间的因素有什么

流速越快保留时间越靠前,培慧越慢越靠后。 升温速率越快,保留时间越靠前,越慢保留时间越靠后。 高沸点的化合物保留时间靠后,低沸点的化合物保留时间靠前。 色谱柱的极性越强,极性的化合物保留时间越靠后,非极性的化合物保留时间越靠前。
影响的因素很多,大致分为客观因素和主观因素。客观因素是:GC的载气流速,柱温,电路因素,色谱柱类型,分流比,采集频率,样品的性质,仪器的老慎念龄化等。
主观因素:进样技术,采集与进样时间的差异。
但是,一般我们宽中困分析时看的相对保留时间,所以保留时间多少会有些差异也是正常的现象。

H. 影响高效液相色谱组分保留时间因素

色谱柱类型,这是最关键的因素,关系到分离效率的好坏,也关乎各个组分的答戚保留时间;
流动相组成,改变流动相组成,就可以改变流动相的极性(正相、反相色谱)或者流动相的离子比例(离子色谱),从而有效改善不同组分的保留时间;
流动相流速,一般在保证分离度的前提下,流动相流速越快,保留时间越短;
流动相中贺行含盐量,对于某些有机碱或者有机酸来说,调变流动相中含盐量可以有效改变分离效率,从而改变保留时间;
流动相温度,温度越高,保留时间提前禅举哗。

I. 离子色谱测定中,ph值如何影响分离度和保留时间重点是如何

因为在激闭不同的pH下待测离子的解离状态会不同,因此会造就填料对它们稿铅桥的吸附能力改键猛变,导致分离度和保留时间的不同。

J. 影响离子色谱分析结果的主要因素有哪些

1.流动相浓度
2.流速(不用说越高越快)
3.柱温(一般柱温箱越高出峰越快)
4.室温(派运室温越高出峰时间越快)
5.系尘丛梁统压力郑春等等

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