❶ 细胞培养液没用封口膜封口会污染吗
有很大的可能会污染,所以在做细胞培养的时候最好使用封口膜。
封口膜主要特点在于密封漏御性能效果好,防止产品内容物挥发以返猛岩及知帆污染。
❷ 细胞实验培养基拿出操作台贴封口膜有影响吗
没有。封口膜是一种复合如返材料,游橡轿具有密封性能,防伪效果,防止产品内容物挥发、污染,无气味析出。细胞实验培养基拿出操作台贴封口膜防止产品内神肆容物挥发以及污染,不要担心封口膜会带来更多的污染,是没有影响的。
❸ 含细胞因子的培养基污染了,过滤后还能用吗
1、血清要做灭活处理;
2、灭活后的血清要经过.45和.22虑膜过滤;
3、培养基是不可以紫外祥备照射的。
还要注意一点的是血清一般不推荐直接过滤除菌的,基余如果怀疑血清染菌,过滤时要谨锋毁把血清按比例加入到培养液中,然后才可以过滤除菌!!
❹ 培养基配制好后隔天再用会不会有什么影响
营养损耗肯定有的,但是这个损耗值相对灭菌来说要小。
至于对实验的影响程度,要看你的旦茄氏培养基配方了。
如果是有糖类的,或者酵母粉和MgSO4和磷酸盐一起纳誉的话,最好模散现配现用。
❺ 配好的细胞培养基用过滤么
孔径为0.22微米的滤膜
这种滤膜可以过滤掉细菌和病毒。
孔径0.45微米的滤膜已经可以过滤掉细菌,但是不能过滤病毒。
为了防止噬菌体污染,一般还是用0.22微米的滤膜比较好。
❻ 配制培养基的操作过程中易出现哪些差错如何防止
你好!
1.计算,在配制之前一定要计算清楚,一般是按比例计算,比如要配1000ml,那你就根据配方成比袜腊例的算一下,各种药品需要多少
2.称量,对一些药品要特被注意,蠢好世要严格按书上的要求来,比如说丙酸,琼脂
3.如果需要加热的,必须保证不能糊掉,否则就没有做下去的必要啦
4.灭菌,这步最关键,弄杂了也白忙活带肢,灭菌前要注意检查高压蒸汽灭菌锅,还有不能提前放气,会冲坏培养基
5.倒平板和放斜面,前者要注意必须在无菌操作箱中操作。
差不多就这些,有问题追问
打字不易,采纳哦!
❼ 培养基封口膜会影响细胞换气吗
会。
用封口膜纯乎封起来会影响空气流通,细胞无法换气导致搭衫细胞死亡。
培养基(Medium)是供微生物、植物组织和动物组织生长和维做枝悉持用的人工配制的养料。
❽ 细胞培养基中的添加剂及其作用
培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,首选MEM做粘附细胞培养;RPMI-1640做悬浮细胞和人白血病细胞单层培养是一个好的开始,它也广泛应用于哺乳动物细胞和杂交瘤细胞的培养,如人骨髓瘤细胞、鼠杂交瘤细胞、人白细胞以及B细胞和T细胞;各种目的无血清培养最好首选AIM V(12005)培养基(SFM)。选择细胞的培养基也可以到ATCC上查询,ATCC (American Type Culture Collection) 收集了绝大多数细胞的详细资料。打开ATCC网页的Cells and hybridomas链接,输入细胞名称就可以搜索ATCC的细胞数据库。数据库中有每一种细胞的详细描述,包括细胞的来源,培养和冻存条件,燃滚高以及相关文献等资料。 同一种培养基也会因其添加物的不同而应用于不同的细胞培养和不同的实验需求,下面就详细介绍下培养基中各种添加剂的功能。1. L-谷氨酰胺(L-Glutamine)在细胞培养中重要吗?它在溶液中不稳定吗?是细胞生长的必须氨基酸,为培养的细胞提供重要的能量来源。脱掉氨基后,L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解,降解率随保存温度而变。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成,而氨对于一些细胞具有毒性。2. GlutaMAX-I是什么?培养细胞如何利用GlutaMAX-I?这个二肽有多稳定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,是一个L-谷氨酰胺的衍生物,其不稳定的alpha-氨基用L-丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽,释放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I二肽非常稳定,即使在121磅灭菌20分钟,GlutaMAX-I 二肽溶液有最小的降解,如果在相同条件下,L-谷氨酰胺几乎完全降解。3. 培养基中丙酮酸钠的作用是什皮尺么?丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是,如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢丙酮酸钠。4. Hank′s 平衡盐溶液(HBS)和Earle′s平衡盐溶液(EBS)有什么本质的功能差别?HBS和 EBS 的主要差备卖别在于碳酸氢钠的水平,在Eagle′s (2.2g/L)中比在Hanks′ (0.35g/L) 中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡,以维持溶液的PH值。Eagle′s液在空气水平的CO2 中,溶液会变碱,Hanks′液在CO2培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织,需要用Eagle′s液,。如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织,用Hanks′液就可以了。5. 培养液pH对细胞生长的影响?由于大多数细胞适宜pH为7.2-7.4,偏离此范围可能对细胞生长将产生有害的影响。但各种细胞对pH的要求也不完全相同,原代培养细胞一般对pH变动耐受差,无限细胞系耐受力强。但总体来说,细胞耐酸性比耐碱性强一些。在配制培养用液时,需要注意一点:培新配的培养基在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时,溶液的pH还会向上浮动0.2左右。6. 培养细胞时应使用5%还是10%CO2,或者根本没有影响?答:一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作为pH 的缓冲系统,而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7g时,细胞培养时应使用10% CO2;当培养基中NaHCO3为每公升1.5g 时,则应使用5%CO2培养细胞。7. Hepes的作用HEPES溶液:是一种弱酸,中文名字是羟乙基哌秦乙硫磺酸,主要作用是防止培养基pH迅速变动。在开放式培养条件下,观察细胞时培养基脱离了 5%CO2的环境,CO2气体迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此时可以维持pH7.0左右。一般在进行克隆化培养时要添加HEPES。神经细胞原代培养的过程中能用到8. NaHCO3培养基中使用了NaHCO3-CO2缓冲系统,并采用开放培养,使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养瓶,再通过稳定调节温箱中CO2浓度(5%),与培养基中的NaHCO3处于平衡状态,从而调节培养基的PH值。9. NEAA:非必须氨基酸NEAA(非必需氨基酸)是含几种非必需氨基酸的合剂,添加到的原培养基不同,NEAA也有不同的种类,比如添加至MEM的NEAA,含L-Alanine、L-Asparagine、 L-Aspartic Acid、L-Glutamic Acid、L-Glycine、L-Proline、L-Serine。10. 氯化钙氯化钙对成骨细胞培养有毒性,所以成骨细胞的培养基中应不含氯化钙。11. 什么培养基中可以省去加酚红?酚红在培养基中用作pH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。酚红本身对生物制品质量并不会产生影响,可以通过纯化技术去除,但酚红在无血清培养基可能带来胞内钠/钾失衡,影响细胞生长,当然这种作用能被血清所中和或减轻。酚红并不是培养基中必需的一种成分,很多国外的疫苗或抗体生产企业在生产过程中都使用无酚红培养基。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用,(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加有酚红的培养基。 你可以到生物帮那里详细的了解一下,那里有介绍的,如果有问题,那里还有在线交流核心版块,可以帮助你找到答案,看看 www.bio1000.com/zt/cell/45828.html 会有帮助的。
❾ 滤膜跟培养基间有气泡会有什么影响
还是有一定影响的,而且这种影响是比较大的,如果在使用的时候影响强度。
❿ 在培养基紧缺的情况下,污染后的培养基能用0.22um的滤膜过滤后,在用吗
原理上可以,但实际上不行,污染的培养基如果有孢子就麻烦了