⑴ 生物化学实验
牛血清白蛋白热乙醇法提取工艺:分离血浆,在牛血中加入枸橼酸钠离心,提取,将收集的血浆放入夹层反应罐内,加热加入辛酸钠,缓慢搅拌,温度在55℃~65℃,加入盐酸调pH值至4.0~6.5,然后加乙醇,过滤,脱盐和浓缩,冻干为成品。具体为以下步骤:A、分离血浆,取新鲜牛血放入带制冷功能的离心机中,加入血量的10%的浓度为3.8%的枸橼酸钠,离心,温度在2℃以下,分离血浆、血球,收集血浆,血球另用; B、提取,将血浆放入夹层反应罐内,夹层内加热水,边加热边加入牛血清容积的0.2-0.3%的辛酸钠,缓慢搅拌,温度在55℃~65℃,溶解后调PH值,加入浓度为1摩尔的盐酸,将PH调至4.0~6.5,然后加入血清总量的5.5%的浓度为95%的乙醇,过滤,滤渣弃之; C、脱盐和浓缩,将滤液用20000分子量以下的超滤器洗脱盐类及其它小分子杂质,同时进行浓缩; D、冻干,将浓缩液按冻干曲线冻干,即将浓缩液迅速冷却至-40℃,持续1小时左右,升到-25℃,持续10-20小时,再缓慢升温到0℃,再持续1-4小时升到保存温度20℃。,为成品。
⑵ 在培养基中想加入牛血清白蛋白 想问问牛血清白蛋白需要除菌吗 除菌的话用滤膜除菌的方法吗
不用除菌!
牛血清白蛋白,是从生物公司买来的,是已经制备好的,无菌。直接添加到培养基中即可。
⑶ 哪些因素会影响超滤膜组件截留分子量
会影响超滤膜组件截留分子量的因素:
1、进水压版力对纳滤膜的影响
进水压力本身并权不会影响盐透过量,但是进水压力升高使得驱动纳滤膜的净压力升高,使得产水量加大,同时盐透过量几乎不变,增加的产水量稀释了透过膜的盐分,降低了透盐率,提高脱盐率。当进水压力超过一定值时,由于过高的回收率,加大了浓差极化,又会导致透过量增加,抵消了增加的产水量,使得脱盐率不再增加。
2、进水TDS含盐量对纳滤膜的影响
渗透压是水中所含盐粉或有机物浓度的函数,含盐量越高渗透压也增加,进水压力不变的情况下,净压力将减小,产水量降低。透盐率正比于膜正反两侧盐浓度差,进水含盐量越高,浓度差也越大,透盐率上升,从而导致脱盐率下降。
纳滤膜的应用非常广泛,在医疗、环保等等的行业都有所涉及,为了确保其应用性能的稳定性,应注意进水压力及进水TDS含盐量对纳滤膜的影响。
⑷ 我在做牛血清白蛋白,冻干后复溶就变浑浊了,如何解决呀
每10g加100ml水。还是用pbs溶解也可以,看你的用途。
按一周内能用完的分量,分装成小支放在负20或负30度冰箱应该起码可以放好几个月。
不是冷冻保存的话,如果想放4度冰箱放久一点,则需要加防腐剂,比如可以用0.1%
nan3
(sodium
azide)
也要看你的用途,有些实验会受防腐剂影响。
⑸ 聚醚砜滤膜可以过滤BSA(牛血清白蛋白)溶液吗
下午好,没问题。PES和PA、PP一样属于对水相完全封闭对绝大多数溶剂相耐受也很好的内非极容性高聚物,它可以过滤BSA,唯一需要注意的就是看看孔径是多大适合了请酌情参考。理论上蛋白水溶液或者极性溶剂只要不是纯水相材质都可以使用(我一般都是直接用PP的0.22和0.14um)。