我在做deae纤维素离子交换层析吸光度的峰宽有什么意义

㈠ DEAE纤维素柱的原理

DEAE纤维素柱原理，基于离子交换层析：离子交换层析中，基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。

阴离子交换基质结合，带有负电荷的蛋白质，然后这类蛋白质被留在柱子上，然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施，将吸附在柱子上的蛋白质从而洗脱下来。

(1)我在做deae纤维素离子交换层析吸光度的峰宽有什么意义扩展阅读：

基本信息：

性状：干燥纤维状。

用途：用于柱色谱分析，用以分离提纯多糖、肽、核苷酸、酶、血清组分和病毒等，阴离子交换填料。

保存：常温干燥封袋保存。

DEAE—纤维素的使用方法：

称取IgDEAE32或52，放入5ml量筒中，加蒸馏水浸泡过夜，观察溶胀后DEAE的体积。根据所需层析柱的柱床体积计算所需DEAE的用量，称取所需DEAE用蒸馏水浸泡过夜，其间换几次水，每次除去细小颗粒。

抽干，改用0.5mol/LNaOH溶液浸泡1h以上，抽干（可用布氏漏斗），用无离子水漂洗，使pH至8左右（用pH试纸检查）。再改用0.5mol/LHCl溶液浸泡1h以上，去酸溶液，用无离子水洗至pH6左右。本实验中在用前应以0.0175mol/L，pH6.7磷酸盐缓冲液，浸泡平衡后使用。

㈡ DEAE纤维素柱的原理

DEAE-纤维素为二乙氨乙基纤维素,是阴离子交换剂.其原理基于离子交换层析：离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成.由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同.阴离子交换基质结...

㈢ 离子交换纤维素色谱法的实验操作

（一）交换剂的处理，再生与转型
新出厂的树脂是干树脂，要用水浸透使之充分吸水膨胀。因其含有政绩一些杂质，所要要用水、酸、碱洗涤。一般手续如下：新出厂干树脂用水浸泡2小时后减抽压去气泡，倾去水，再用大量无离子水洗至澄清，去水后加4倍量2N HCl搅抖4小时，除去酸液，水洗到中性，再加4倍量2N NaOH搅抖4小时，除碱液，水洗到中性备用。将树脂带上所希望的某种离子的操作称为转型。如希望阳树脂带Na+，则用4倍量NaOH搅拌浸泡2小时以上；如希望树脂带H+，可用HCl处理。阴树脂转型也同样，若希望带Cl-则用HCl，希望带OH-则用NaOH。用过的树脂使其恢复原状的方法称为再生。并非每次再一都用酸、碱液洗涤，往往只要转型处理就行了。
（二）柱上操作
⑴交换剂装柱最简单的交换层析柱可用碱式滴定管代替。处理过的树脂放入烧杯，加少量水边搅拌边倒入保持垂直的层析管中，使树脂缓慢沉降。交换剂在柱内必须分布均匀。
⑵上样向层析柱内倾入样品液⑶洗脱与收集
不同样品选用的洗脱液不同。原则是用一种比吸着物质更活泼的离子，把吸着物交换出来。由于被吸着的物质往往不是我们所要求的单一物质，因此除了正确选择洗脱液外还采控制流速和分布收集的方法来获得所需的单一物质。

㈣ DEAE纤维素柱层析分离多糖的过程中遇到了很多问题，请做过的同学看看我的问题出在哪里，谢谢谢谢。。。。

.1...DEAE是要先泡，然后碱酸碱的顺序洗涤的， 每次都要洗涤到中性才能进行下一个步骤，你洗涤的时候可以使劲的搅拌， 然后静置。麻烦你多泡 多搅拌。自然会开的
2如果静置上面还有漂浮物可以考虑不要！
3，你要多看资料，人家抽滤只是为了抽干（不是绝对的干），然后方便换水洗涤，这样能减少静置时间，所以不是绝对的干啊，你给抽滤的漏斗底下加上滤纸。
4. 经过这些处理后肯定是会 沉淀的，我觉得你是急性子，这些东西和后来你需要的凝胶装柱子都是湿法装住，都需要慢慢装，过一会才会沉淀下来，不要看你随便倒一些进柱子，就感觉已经满了，你过一会看就发现，在柱子最底下其实只慢慢沉淀了一点。

㈤ DEAE纤维素离子交换柱后面的数字意义

DEAE-纤维素 DEAE cellulose DEAE-纤维素 DEAE cellulose 二乙氨乙基纤维素阴离交换纤维素 DEAE—纤维素化：称取IgDEAE32或52放入5ml量筒加蒸馏水浸泡夜观察溶胀DEAE体积根据所需层析柱柱床体积计算所需DEAE

㈥ 请问羧甲基纤维素和DEAE纤维素分离蛋白有什么区别

羧甲基纤维素是弱阳离子交换填料，要求使用时的pH值要低于目的蛋白质等电点起码0.5个pH值单位，为了达到较好的分离效果，实际使用时最好是低于1个以上pH值单位。在低pH值下，有的不耐酸的杂质蛋白质会变性，届时离心除去，可首先去除一部分杂质蛋白质。
DEAE纤维素是弱阴离子交换层析填料，要求使用时的pH值要高于目的蛋白质等电点起码0.5个pH值单位，为了达到较好的分离效果，实际使用时最好是高于1个以上pH值单位。大多数蛋白质的等电点在6.0左右，可以耐受8.0，所以依据pH提高使得某些杂质蛋白质变性的做法多数情况下不可行。
这两种填料的工作pH值不同，但都可以用氯化钠来洗脱。交换基团不同，分离效果也不同，可以先用一种来纯化，得到初步纯化的产物之后再用另一种来纯化。因为有些蛋白质不能耐受酸，所以我建议先用羧甲基纤维素弱阴离子交换层析，再用DEAE纤维素弱阳离子交换层析，产物的纯度比单用一种时更高。
在对蛋白质的破坏方面，弱交换填料比强交换填料好，有的蛋白质用强离子交换来纯化，蛋白质结合再交换之后会损失很多活力，但是弱离子交换则损失的活力较少。但是弱离子交换的分辨率比强离子交换差一些。如果纯化得不好，又有强离子交换的，就试一下吧。lxj341401(站内联系TA)一个是阳离子交换填料，一个是阴离子交换填料，用哪个跟蛋白值的等电点pI还有所用缓冲液的pH有关，pH>pI时带负电荷，蛋白质能吸附到阴离子交换填料，相反的用阳离子交换。所以能不能代替看具体情况了。悦迷008(站内联系TA)Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-07-15 06:00:21:
这两个填料虽然都是离子交换用的，但一个是弱阴一个是弱阳，效果不同，没有一个能代替另一个的说法。

㈦ DEAE-纤维素阴离子柱层析分离多糖的原理是什么

DEAE纤维素阴离子柱层板分离多糖的原理主要是其可吸附离子型物质，比如蛋白质、酸性多糖等，而作为大多数的中性多糖则可顺利流出，从而去粗取精、达到分离的目的。当然，DEAE的细度很细，也可起到分子筛的作用，但其分离效果会和柱高、洗脱溶剂、粒径的关系很大，效果并不很好，且在大量水冲的情况下，中性多糖基本均可洗脱下来。

㈧ DEAE纤维素

DEAE—纤维素的再生

用过的离子交换剂可以反复使用，使其恢复原状的方法俗称“再生”。再生并非每次用酸、碱反复处理，通常只要“转型”处理即可。所谓转型就是使交换剂带上所希望的某种离子，如希望阳离子交换剂带上NH+4则可用NH4OH浸泡，如希望阴离子交换剂带上Cl—则用NaCl溶液处理。

㈨ 寡聚dT-纤维素柱层析的用处

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g-25层析柱填料是葡聚糖交联的凝胶柱，g-x,
x：（1）交联度。x越小，交联度越大，网孔越小，适用于分离低分子量产品，反之亦然。（2）吸水量。为凝胶得水值的10倍.例如,g-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克.凝胶柱使用一次后，必须反冲疏松一次，平衡后再使用。若使用数次，就需要再生处理。用0.1mol/l
naoh-0.5mol/l
nacl溶液浸泡，然后用蒸馏水洗至中性备用。若实验完毕，将再生后的凝胶在布氏漏斗上用蒸馏水洗涤抽干，再用95%乙醇洗两次，在60℃烘箱中烘干，回收保存。
deae-纤维素为二乙氨乙基纤维素，是阴离子交换剂。基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。离子交换层析中，基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂；而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点，当蛋白质处于不同的ph条件下，其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质，所以这类蛋白质被留在柱子上，然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施，将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质，结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的ph值洗脱下来。离子交换剂的再生与保存离子交换剂可在柱上再生。如离子交换纤维素可用2mol/：nacl淋洗柱，若有强吸附物则可用0.1mol/lnaoh洗柱；若有脂溶性物质则可用非离子型去污剂洗柱后再生，也可用乙醇洗涤，其顺序为：0.5mol/lnaoh-水-乙醇-水-20%naoh-水。保存离子交换剂时要加防腐剂。对阴离子交换剂宜用0.002%氯已定（洗必泰），阳离子交换剂可用乙基硫柳汞（0.005%）。有些产品建议用0.02%叠氮钠。
两种填料的抗酸碱性和抗腐蚀性能不同。

㈩ DEAE 层析原理是什么

给你找了以前的文章，你可以看一下。如下。。
层析技术是以离子交换纤维素或以离子交换葡聚糖凝胶为固定相，以蛋白质等样品为移动相，分离和提纯蛋白质、核酸、酶、激素、多糖等的一项技术。
在纤维素与葡聚糖分子上结合有一定的离子基团，当结合阳离子基团时，可换出阴离子，则称为阴离子交换剂。如二乙氨乙基(Dicthylaminoethyl，DEAE)纤维素。在纤维素上结合了DEAE，含有带正电荷的阳离子纤维素—O—C6 H14N+H，它的反离子为阴离子(如Cl-等)，可与带负电荷的蛋白质阴离子进行交换。当结合阴离子基团时，可置换阳离子，称为阳离子交换剂，如羧甲基(Carboxymethy， CM)纤维素。纤维素分子上带有负电荷的阴离子(纤维素－O－CH2－COO一)，其反离子为阳离子(如Na+等),可与带正电荷蛋白质阳离子进行交换。
溶液的pH值与蛋白质等电点相同时，静电荷为0，当溶液pH值大于蛋白质等电点时，则羧基游离，蛋白质带负电荷。反之，溶液的pH值小于蛋白质等电点时，则氨基电离，蛋白质带正电荷。溶液的pH值距蛋白质等电点越远，蛋白质的电荷越多。反之则越少。血清蛋白质均带负电荷，但各种蛋白质带负电荷的程度有所差异，以白蛋白为最多，依次为 球蛋白， 球蛋白和 球蛋白。
在适当的盐浓度下，溶液的pH值高于等电点时，蛋白质被阴离子交换剂所吸附；当溶液的pH值低于等电点时，蛋白质被阳离子交换剂所吸附。由于各种蛋白质所带的电荷不同。它们与交换剂的结合程度也不同，只要溶液pH值发生改变，就会直接影响到蛋白质与交换剂的吸附，从而可能把不同的蛋白质逐个分离开来。
交换剂对胶体离子(如蛋白质)和无机盐离子(如NaCl)都具有交换吸附的能力，当两者同时存在于一个层析过程中，则产生竞争性的交换吸附。当Cl一的浓度大时，蛋白质不容易被吸附，吸附后也易于被洗脱，当Cl一浓度小时，蛋白质易被吸附，吸附后也不容易被洗脱。因此，在离子交换层析中，一般采用两种方法达到分离蛋白质的目的。一种是增加洗脱液的离子强度，一种是改变洗脱液的pH值。pH值增高时，抑制蛋白质阳离子化，随之对阳离子交换剂的吸附力减弱。pH值降低时，抑制蛋白质阴离子化，随之降低了蛋白质对阴离子交换剂的吸附。当使用阴离子交换剂时，增加盐离子，则降低pH值。当使用阳离子交换剂时，增加盐离子浓度，则升高溶液pH值。