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小鼠纸质盒过滤膜

发布时间:2022-05-25 12:17:57

① 如何检测番茄汁中的嗜热芽孢杆菌(凝结芽孢杆菌)

给你一些检测汁中的嗜热芽孢杆菌的资料参考一下:
耐酸耐热菌(库克)的检测方法
1 适用范围
本方法适用于清汁、浊汁、水和浓缩果汁中的耐酸耐热菌的检测。
2 仪器和试剂
2.1 恒温水浴:80±1℃。
2.2 恒温培养箱:40±1℃。
2.3 灭菌培养皿:直径为90mm。
2.4 灭菌试管:18×180mm。
2.5 滤膜:0.45um水系一次性滤膜。
2.6 酵母粉。
2.7 蛋白胨。
2.8 琼脂粉。
2.9 葡萄糖。
2.10 吐温80。
2.11 12.5%苹果酸。
2.12 灭菌蒸馏水。
2.13 K氏培养基平板:在1000ml的三角瓶中放入500ml蒸馏水,加入1.25g酵母粉、2.50g蛋白胨、6.50g琼脂粉、0.5g 葡萄糖和0.5ml吐温80,使其溶解,轻轻盖上三角瓶的盖子,在121℃灭菌25分钟;在一个小烧杯中加入10ml蒸馏水和1.25克的苹果酸,搅拌直至溶解,将苹果酸的水溶液用0.45um的滤膜过滤,将处理过的苹果酸水溶液加入到灭菌的K氏培养基中,搅拌均匀,使其pH值达到3.7±0.1。当冷却到大约50℃时,将K氏培养基倾注到培养皿中,凝固后在0-5℃的冰箱中储存,有效期60天,并记录配制日期。
3 操作步骤
3.1 样品处理
3.1.1 浓缩清汁:
打开水浴锅,调整温度到80±1℃。以无菌操作,取10ml浓缩清汁于15ml灭菌的试管中,再移取10ml浓缩清汁于另一带有温度计的15mL的试管中,作为温度控制用,盖上样品试管的盖子。将上述样品试管和温度控制试管放在水浴锅中,当温度达到80±1℃,开始计时,维持13分钟(用计时器计时)。冷却至室温,用90-100ml的灭菌蒸馏水将热处理过的样品转入灭菌容器中,摇匀。将稀释后的样品溶液用0.45um的滤膜真空过滤。
3.1.2 清汁、水:
打开水浴锅,调整温度到80±1℃。以无菌操作,取150ml清汁(或水)于已灭过菌的玻璃样品瓶中,再移取150ml清汁(或水)于另一带有温度计的玻璃样品瓶中,作为温度控制用,盖上样品瓶的盖子。将上述样品试管和温度控制试管放在水浴锅中,当温度达到80±1℃,开始计时,维持13分钟(用计时器计时)。将热处理过的样品冷却至室温,用0.45um的滤膜真空过滤。
3.1.3 浊汁:
打开水浴锅,调整温度到80±1℃。以无菌操作,取20ml浊汁于已灭过菌的试管中,再移取20ml浊汁于另一带有温度计的20mL的试管中,作为温度控制用,盖上样品试管的盖子。将上述样品试管和温度控制试管放在水浴锅中,当温度达到80±1℃时,开始计时,维持13分钟(用计时器计时)。冷却至室温,将热处理的样品用0.45um的滤膜真空过滤。
3.2 培养及计数
取掉过滤器的上部装置,用灭菌的镊子,将过滤膜从过滤器上取下放在K氏培养基上,轻敲数次,以保证滤膜与培养基接触。倒置于40-41℃恒温培养箱中,在恒温培养箱底部放置一个有水的盘子,以调整恒温培养箱的湿度,培养5天。培养结束后,记录该培养温度下滤膜上的菌落数。
根据对样品的污染情况,可选择稀释度。用灭菌吸管吸取25ml样品,加入到225ml灭菌蒸馏水中,做成1:10的稀释度;用灭菌吸管吸取1:10的稀释液25ml,加入到225ml灭菌蒸馏水中,做成1:100的稀释度,稀释后的样品的检测方法同上。培养结束后,记录滤膜上的菌落数,并按相应的稀释度进行计算。
4 数据处理
结果报告10ml的浓缩清汁样品中含有的菌落数,报告单位为cfu/10ml。
结果报告150ml的清汁(或水)样品中含有的菌落数,报告单位为cfu/150ml。
结果报告20ml的浊汁样品中含有的菌落数,报告单位为cfu/20ml。

② 仓鼠是不是很脏

其实仓鼠是很健康的,大部分的仓鼠还很爱干净的!仓鼠是一种人见人爱的动物,而且长期居住在人类家中,怎么会很脏和有很多病毒呢?加上现在只有极少部分的人因为仓鼠而过敏,我还没有听说过仓鼠会导致人类生病的事件呢!不要听他们说!这种说法只是人类不了解仓鼠而造成的!
以下有一些资料供你参考:
【饲养仓鼠的心理准备】
仓鼠是有生命的小动物,所以在没作好足够的心理准备前请不要盲目饲养
首先要回答以下问题:
1.你有一定的时间饲养它吗?
2.你的家人反对你饲养小动物吗?
3.你能保证在你长时间外出时有人照看仓鼠吗?
4.你能保证在最初的新鲜感过去后不抛弃它吗。在你无法继续饲养时,你能找到合适的收养者吗?
如果你对以上各点不能很肯定,建议你不要养。
【怎样挑选仓鼠】
如何才能挑选到一只比较健康的仓鼠呢?这边有几个方法让您参考一下:
1、要选择眼睛有神没有眼屎的仓鼠。
2、看看仓鼠有没有流鼻水,有的话不要挑。
3、耳朵的形状是否完好,有没有被咬过的痕迹。如果有表示这只仓鼠太软弱或生病而被其他的仓鼠给欺负咬伤。
4、牙齿没有伸到外面,毛色有光,察看有没有掉毛或肿瘤。
6、尾巴不可以有斑点,肚子的附近也不好,表示这只仓鼠可能拉肚子。
7、行走时正不正常,有没有僵硬的感觉,四肢健不健全也是重点。如果看起来都很好的话应该就没有问题了.
最后就是选一只您喜欢的仓鼠了,除了毛色以外也要考虑看看它会不会亲近人。
通常来说,黄金鼠和加卡利亚仓鼠饲养一段期间就容易亲近了,坎培尔仓鼠和罗伯罗夫斯基仓鼠就比较难一点,尤其是罗伯罗夫斯基仓鼠本身就是很胆小又敏感的动物,所以可能要多花一些时间才能取得它对你的信赖。
至于要养一只好还是一对好,基本上如果是多瓦夫仓鼠的话,养两只以上是比较好。如果是黄金鼠的话,那可能养一只就可以,要养一对的话要分开养比较好,等到要交配繁殖时再把母鼠放入公鼠的笼子内,待交配后再分开。
【仓鼠饲养十大禁忌】
(1)禁止喂食人吃的食物,盐份过高,调味过重,会增加鼠儿身体负担。
(2)禁止直接接触太阳,鼠儿们非常怕热,夏天到了,请使用散热片或大理石为他们消暑。
(3)若无必要,禁止水洗鼠儿身体。
(4)请了解自家鼠儿品种,独居鼠儿或不同品种禁止合笼饲养。
(5)若无心理准备或是经济能力,请勿将母鼠、公鼠合笼饲养,鼠儿繁殖能力非常可观。
(6)禁止使用来路不明的饲料,生虫或发霉请丢弃,不要喂食!
(7)禁止让鼠儿们饮用生水,请让他们喝煮沸过的冷开水。
(8)禁止使用竹筷、棒冰棍等东西让鼠儿们磨牙,请使用市面上鼠儿专用的磨牙用品、饲料。
(9)禁止使用报纸、面纸等做垫材。报纸油墨过多,面纸内含有漂白剂。
(10)禁止将鼠儿养在过小的空间,空间至少要有滚轮,水瓶、食盆、小窝等用品。
【仓鼠饲养环境】
最适宜温度20-28℃,避免阳光直射或直接被大风吹到的地方,但要注意通风透气。不要离电视,音响,电脑太近,仓鼠可听到人类听不到的声音,应避免辐射和嘈杂。
夏季:最好不开空调,因为你外出时关空调,进屋又开空调会使屋内温差过大,仓鼠对温度很敏感,容易感冒。
冬季:不要放在室外,仓鼠会因为太冷而冬眠。多铺木屑等垫材,为仓鼠配置木制或草制小屋用于保暖。或多给一些餐巾纸让仓鼠自己做窝。最简单的方法是把笼子整个放进纸箱或塑料箱内,但要注意透气。
【仓鼠的基本用品】
笼子 夏天时请使用通风的铁丝笼,或是半铁半胶的笼子,例如野外笼等。冬天时请注意鼠儿的保暖,全胶的笼子冬天较适合。
【★笼子底盘请勿使用铁丝网,鼠鼠容易因此骨折受伤】
食盆
大多数笼子中都自带食盆。如果需要自己选购,一般的小容器都可选用,只要是不容易打翻,且边缘不要太高,不然仓鼠爬不进去。常用的容器:玻璃烟缸,酱油碟子,各类小碗,微波炉盒子。目前价格:3-10元
饮水器
大多数笼子中都自带饮水器,DIY时也最好装一个,因为仓鼠是需要喝水的。饮水器的一般设计前端有不锈钢珠,购买时注意测试是否漏水。千万不要直接拿个碗盛水,因为仓鼠喝水时会弄湿毛,或进去游泳,容易着凉生病。实在没有就多给仓鼠喂些蔬菜和水果。
厕所
一般的塑料盒子装上猫砂就是比较简易的厕所了。每天取出结块的猫砂或全部换掉,这就按照个人的卫生习惯了。爱干净的人养出的仓鼠也比较爱干净。
沐浴房
有些仓鼠会在厕所里用猫砂沐浴,虽然不卫生,但这是仓鼠的喜好,此时就不再需要沐浴房了,但有些仓鼠很爱干净,主人就应该给它买个沐浴房,放上沐浴砂让仓鼠尽情地翻滚、打洞玩。沐浴砂要选用消过毒的,也可自己将细砂洗净,放微波炉里消毒烘干,混合上爽身粉做成浴砂使用。最好别直接使用爽身粉,因为刺激性太强,还容易弄伤仓鼠的眼睛。
跑轮
大多数笼子中都自带跑轮,因为野生的仓鼠一天要跑20公里,所以适量的运动对仓鼠来说是非常重要的,没有足量的运动,仓鼠会压力过大而出现互相打架,咬笼子等行为。所以细心的主人应该给仓鼠一个跑轮。同时,由于现在的主人给仓鼠的营养都非常好,往往使仓鼠过度肥胖,容易使仓鼠也得上心血管疾病,所以即便是仓鼠,也应该拥有正常健康的身材。购买时要注意,应该选择无缝隙的跑轮,仓鼠才不容易受伤。目前价格:10-80元。
木屑
做为鼠笼的垫材,很多材料都可选用,但大多数人都会选用木屑,因为它比较干净又容易得到。使用纸质垫材时要注意,不要选用印刷过的纸张,油墨是有毒的,仓鼠会中毒。
磨牙石/磨牙棒
仓鼠的牙齿会不断生长,所以需要用磨牙棒来磨掉过长的牙齿。
小屋
小屋有陶瓷的,木制的,草制的,塑料的,仓鼠都很喜欢的,因为仓鼠是爱打洞居住的动物,有条件的应该给仓鼠配个小屋。目前价格:10-45元。
【时间表】
把仓鼠带回家时,由于它离开了一直生活的环境,离开了母亲和兄弟姐妹,会有比较长时间显得非常敏感、紧张是失落,有时会出现咬人,发呆,不肯吃东西等情况,而这个时期是你和仓鼠建立信任的关键时期,如果处理不好以后就很难再建立良好的关系了,有可能你的仓鼠会变成一只一直咬人的坏仓鼠!以下有个时间表,不要心急,一点点和你的仓鼠相处:
第1天:让它适应新的环境,完全不要骚扰它,不要碰它,更不要把它拿来拿去。
2天:可用手喂它吃东西,轻声和它说话,让它熟悉你的气味和声音。
第5天:可将它轻轻抱起,放在手心(别让它摔落或跑丢)。
第10天:可尽情和它玩了。
抱仓鼠时要注意:睡着的仓鼠不喜欢受到骚扰,所以当你要抱起他之前先肯定它是清醒的,应该先把它的窝拨开以便它可以看到你,然后再轻轻地将它抱起,如果它不愿意,千万不要勉强。
【仓鼠的食物】
(1)请不要看鼠鼠太可爱,给与过多的葵瓜子或高热量食品,鼠鼠容易发胖,营养不均衡。过胖的鼠儿,夏天容易中暑,皮肤脂肪过厚,容易脱毛。
葵瓜子大约一个星期二到四颗便足够!可当做训练鼠儿的奖励食品。
(2)请不要认为鼠鼠是不用喝水的!水一定要供给,并且两三天换一次饮用水。
(3)蔬果部份请勿一次喂食太多,容易造成腹泄死亡。蔬果类大部份都含有农药,请以清水洗净拭干再喂食。
(4)点心部份与主食搭配,点心增加,主食请减少,不要给与过多的零食,发胖的鼠儿容易生病。
(5)请将饲料与零食等用密封罐密封保存,可放置冰箱,滋生虫蚁的食品请丢弃。
可食性食物:
蔬菜类 青菜类(如青江菜)、红萝卜、番瓜(绿黄色蔬菜为佳) 种子类 葵花子、花生、核桃、松子(不要给太多) 水果类 苹果、草莓、樱桃、香蕉(可能会粘住颊囊,请尽量不要给鼠鼠)、葡萄(因糖分很多请不要给太多) 谷物类 鸡的饲料、鸠的饲料、小鸟用饲料、小麦、玉米、小米 植物类 三叶草、蒲公英、葛类、车前草(请不要喂食可能受过污染的植物)动物性蛋白 牛肉、鸡肉、水煮蛋的蛋白、起司、牛奶、优酪乳、小虫、宠物用小鱼干。
喂食量:供给仓鼠的食物量易多不易少,因为仓鼠有储藏食物的习惯,如果食物少了它会很不安。所以,如果你每次加食物时发现食盆总是空着的话就说明食物加的太少了,同时也要注意及时清理未吃掉的食物,特别是水果等有水分的东西,防止变质。
饲养仓鼠可以使用50厘米见方的养热带鱼用的水槽,上面用铁丝网做成盖子(夏季容易闷热,要加以注意)。用铁丝笼子时,仓鼠抓住铁丝向上攀登,会有跌落的危险,所以最好笼子不要很高,并要把笼底的铁丝取下后使用。笼子底部铺上麦秸、干草或锯末等。喂食盆可用陶制的,最好重一些。可以提供一些树枝供啃咬用,防止牙齿长得过长。巢箱可以用木头或纸等制作。除了笼子附带的以外,还可以利用鸟巢箱。巢箱中铺上干草、锯末、碎布等。水槽不会刮脚,但是容易积存湿气,所以要注意保持其干燥。另外,水槽有足够的深度,可以放进大量能让仓鼠潜入的麦秸、干草等笼底料,放上土,再在上面铺上干草。营造一个非常自然的环境,让仓鼠可以挖洞做巢。
饮水可用给水器,安装在容易饮用的高度上,往器皿型的水罐里加水。夏季可以让仓鼠玩水,但是不要把笼子弄得太湿。仓鼠有在固定的地方便溺的习惯,在它经常使溺的地方放上便盆,在里面放上尿或者粪,使便盆带上臭味,它就会把这里当成厕所来使用。如果不用厕所的话也不要强迫它,只要注意经常清洁笼子就行了。
仓鼠是杂食性动物,可以给它吃南瓜等黄绿色蔬菜、卷心菜、莴笋等淡色蔬菜;薯类、豆类、水果、野草、种子类等。也有仓鼠专用的饲粮。但是,在以饲粮为主的时候,也要注意喂一些蔬菜和水果。作为蛋白质的来源,可以喂它煮鸡蛋、熟干鱼、煮熟的鸡肉和奶酪、豆腐等,也可以喂一些狗粮、猫粮等。
仓鼠有把食物贮存在腮里的习性。要注意勤更换水。每天要清洗食盆和给水器,更换新鲜的食物和水。还要更换巢材。检查巢箱,在仓鼠积蓄食物的地方,要留一些果实或固体饲料等食物给仓鼠吃。每周更换一次笼底敷料,每月清洗1—2次笼子并消毒。
炎热的夏季水槽内温度容易升高,夏季,最好移到笼子中饲养。要把笼子放在通风良好的地方,注意不要让阳光直射。热的时候,仓鼠不爱吃固体饲粮,应喂食蔬菜等富含水分的食物。秋季贮备粮食,不要忘记经常检查巢箱,防止仓鼠因温度过低而进入冬眠状态。放在有暖气的房间里时,注意昼夜的温差不要太大。可以给笼子套上塑料袋,或者把笼子放入纸壳箱里保温。
仓鼠的情绪
仓鼠和猫狗比起来,是比较不容易和饲主取得沟通的动物。但是,只要每天仔细观察,仍然可以了解仓鼠的情绪。而且仓鼠也会表达自己的情绪,仔细的看这些动作及讯息,以了解仓鼠的情绪。
【整理体毛】
仓鼠整理体毛的时候就是放松的状态。否则就是饲主抚摸仓鼠之后,仓鼠本身的味道消失,想要再度将味道涂在身体上面的状态。仓鼠最喜欢自己的味道。
【翻过身来】
饲主的手伸到笼子里面时会翻过身来。这是因为手伸进来时被吓一跳,或是觉得讨厌的状态。仓鼠几乎没有对抗敌人的武器,所以会翻过身来用四只脚抵抗。这个时候只要慢慢的过去,让仓鼠放心即可。尤其是仓鼠睡觉的时候,千万不要吓到仓鼠。
【卷成圆形】
一看就知道这是仓鼠睡觉的姿态,这个时候要小声一点。但是身体状况不好时也会卷起来,要多加注意。天气寒冷时也会卷起来,这个时候就是在保暖。
【咬笼子】
啃咬笼子的铁丝时,可能是仓鼠想逃走,有些仓鼠还会用鼻子上面的毛在铁丝之间摩擦,使得鼻子上面变秃。这种行为是可以让仓鼠磨牙,控制牙齿的长度。
【耳朵下垂】
要了解仓鼠的情绪,最容易看出来的就是耳朵。如果耳朵下垂,则一定是感觉讨厌或恐怖的时候,刚睡醒时耳朵也是下垂的。
【身体硬直】
在转轮上转动后会突然静止不动,这是仓鼠想要利用转轮移动到远处,停下来静止不动是要确认自己到达什么地方。
【站起来摇晃】
站起来是要了解远方的状况,感觉观察四周,注意听声音,对饲料袋的声音有反应时也会站起来。
【趴在地上】
从笼子出来时,身体所在一起,趴在地上,到处闻一闻。这是对新的场所紧张,想要闻出周遍的情况。这时候千万不要突然发出很大的声音 。
【躲在狭窄的地方】仓鼠原本是野生的动物,生活在狭窄的隧道里面。在室内玩耍时,仓鼠为了放心下来,会一直寻找狭窄黑暗的地方,如果仓鼠跑到房间角落就要注意了。
购买时:
1.最好选用同一品种的仓鼠,因为不同品种的仓鼠很容易打架。
2.由于它们是夜行动物,一天大概要睡12-14个小时,到了晚间才活动和进食,所以选购的时间最好选在傍晚或者晚上,那样才可见到仓鼠活泼好动的一面。
3.一般来说,健康仓鼠的特征是四肢健全、眼睛有神、耳朵正常竖起而无分泌物、毛质平均柔顺、粪便呈干硬粒状的。
4.仓鼠也会怕生人,刚回家时显得比较敏感,需要二三天的适应期才能跟你“亲密接触”。
仓鼠是夜行性动物,喜欢在白天睡觉,晚上出来活动,当它们睡觉时,千万不要吵醒它们呀!四个星期大的仓鼠已经成年。它们与老鼠不同,它们有一条很短的尾巴,甚至没有尾巴。仓鼠最有趣之处是懂得把食物藏在腮两边, 在安全的地方才吐出。
【医疗事项注意】
(1)只要鼠鼠有什么身体不适,请不要慌乱,不要急病乱投医,尽量减短鼠鼠送医时间。
八、 鼠妈妈生产时期注意事项:
(1)母鼠怀孕期间,切记一定要与公鼠分笼。公鼠有时会吃掉鼠宝宝;最主要的就是公鼠此时仍有可能继续发情,不分笼的话会造成还在哺育期间的母鼠再次怀孕,从而影响到母鼠体质甚至寿命。母鼠还有蓄精的能力,会有一胎接着第二胎的可能。 因此,及时将公鼠分笼是非常必须的。
(2)请帮鼠妈妈好好补补身体,生产很伤身,可使用火麻仁、营养膏、营养水、小鱼干、面包虫等,让鼠妈妈增加营养。
(3)在小鼠满月之间,尽量请不要更换鼠妈妈笼内的摆放物品、垫材等。很容易惊吓到鼠妈妈,导致不哺乳小宝宝或是回收(吃掉小鼠),小鼠满月前,请不要用手去摸他们喔!
(4)小鼠满月后,长毛、开眼断奶后便可离开鼠妈妈,这时,可试试去摸鼠宝宝!
(5)小鼠最好是等到满月后再喂食面包虫,面包虫有壳。
此时小宝宝的消化系统未完全,请勿喂食面包虫,容易消化不良。母鼠会自己喂食小鼠,请勿刻意帮小鼠喂食。
(6)鼠妈怀孕期间,滚轮记得一定要拿起,有时鼠妈妈会为了玩滚轮而忽略哺乳。
【自我检查鼠鼠身体】
(1)牙齿:鼠鼠的门牙是不断在生长的,有时牙齿过长,会导致无法进食。这时可以自己剪牙,请使用小动物剪牙用具,若不敢剪,可带去给医生剪牙。
(2)香腺:公鼠才有,在腹部中间,有黄黄的一粒东西,那就是香腺,公鼠发情时,这里的味道会特别重。有时香腺会囤积太多,要记得定时使用双氧水调食盐水以1:10混合,帮他们擦擦喔!若囤积太多,请带去兽医院请医生清。
(3)眼睛:鼠鼠若是健康的,眼睛应该是非常水亮有光泽的,若是红红的,流眼油或有眼屎,这时就要注意一下,带去给医生看看吧。
(4)便便:鼠鼠的便便应该是有点硬度,米粒般大小,黑色无臭味。有时会变成绿色、红色等,这时不要太紧张,请回想一下鼠鼠们的饲料中,是否有绿色或红色的饲料,若有的话,便便呈绿色是正常的。若发生软便,或带有臭味,这时请尽速送医。
(5)颊囊:有时要注意一下颊囊的东西是否有吃完,若没有吃完,请不要再给食。食物若在颊囊中腐败发臭,容易导致颊囊炎。定期注意颊囊是否有食物腐败的臭味,并定时帮他将颊囊中的食物清出,使用食盐水调水以1:3的方式,使用喂食针筒伸入颊囊内冲洗。
(6)毛色:鼠鼠的毛通常都是柔软有光泽的。如果有脱毛现象,请注意是否是过敏,并尽速带给医生检查。
(7)体温:鼠鼠的体温一般用手摸,大约比我们的体温稍高一些,但感觉并不明显,若明显感觉到鼠鼠体温过高,请立即送往医院,非常有可能是中暑的前兆!
【给准备养鼠鼠的人的建议】
1,信任我,这是很重要的
2、我的一生只有短短的几年,和你分开的每一分钟都是痛苦的,在迎接我成为你家庭成员之前请记住这一点
3、在让我理解,让我成为你所期望的同伴之前,给我一点时间。
4、有空的时候请对我说说话,即使我还不能懂得你的语言,但当你说话时,我能够明白你的声音
5、不要一直骂我,也不要把我锁起来惩罚我。你有你的朋友,你的家人,你的事业。但我,只有你。
6、你怎样对待我,我永远不会忘记
7、在你举手打我之前,请不要忘记,我有足以咬你的力气,但我绝对不会选择去伤害你。
8、当我日渐衰老时,也请一定照顾我好。因为你也有衰老的一天。
9、当我面临死亡的时候,请守候在我身边。不要说“我不忍心看下去”或者是“我不在的时候让它去吧”。你在我身边,我可以坦然的面对任何事情。
祝你好运!

③ 进入动物房的小鼠包装盒的特点

摘要 亲你好很高兴为您解答;

④ DSS小鼠怎么养

对环境要求很高;
一、设施环境
温度:小鼠临界温度为低温10℃,高温37℃。最适温度为20~26℃,每日温度不宜波动太大。一般小鼠饲养盒内温度比环境高1~2℃。
湿度:饲养间相对湿度应控制在40%~70%,最适相对湿度为50%~60%。一般小鼠饲养盒内湿度比环境高5%~10%。
空气清新度:通常以氨浓度作为动物饲养间空气清新度的指标,要求氨浓度不超过20ppm。以通风换气来控制饲养间的空气清新,换气次数根据饲养的动物种类和饲养密度进行调整,一般控制在10~20次/h,小鼠饲育笼旁气流速度小于0.2m/s。
光照:小鼠适宜光线暗的环境,强光会对其正常生理活动产生影响,尤其白化小鼠的视网膜在强光下会造成损伤。饲养间的光照强度以15~20lx为宜,明暗交替为12h/12h或10h/14h。
噪声:小鼠喜欢安静的环境,饲养间的噪声应控制在60dB以下。此外,超声波对动物的影响常常比人感受的要大,应避免电器的蜂鸣、笼具与地面摩擦、脚轮的摩擦声等。
笼具:宜用无毒塑料制成的透明或不透明的鼠盒,不锈钢丝编制的笼盖,饮水器为玻璃或塑料瓶,瓶塞上装有可自动吸水的金属或玻璃饮水管。笼架一般可移动,主要采用不锈钢材质。笼具应可经受多种方法消毒灭菌。
层流柜和独立通风笼具(IVC)是常用的小鼠饲养设备,这些设备通过高效过滤器可保持饲养笼盒内空气的净化。
小鼠笼具的内外边角均应圆滑、无锐口,每只小鼠所占笼具的最小面积和笼具高度要达到国家标准的要求。

⑤ 有《发酵脱脂大豆肽的清除和抗疲劳活性》英文文献的翻译吗

发酵脱脂大豆肽的清除和抗疲劳活性

摘 要:许多生物活性肽具有特定成分,使这些促进健康的食品存在潜在的生物学特性。越来越多的关注让我们集中研究来自大豆蛋白质的生理活性肽。在这项研究中,枯草芽孢杆菌SHZ发酵生产脱脂豆粕再用超滤和凝胶色谱进行纯化得到大豆肽。分别在体外和体内对自由基的清除和肽的抗疲劳作用进行了评价。20天的大豆肽给药后对小鼠游泳耐力进行了测试及对小鼠血乳酸和肝糖原进行了测定。结果表明,在10mg/ml的浓度显示了纯化肽(P<0.01)的超氧效力(62%)和羟基(96%)的清除作用。小鼠游泳(P <0.01)后经大豆肽给药可显着加速清除其体内的血乳酸。中,高剂量组的肝糖原储存明显增加 (P<0.05)。这表明,大豆肽发酵法生产可显着减轻老鼠的身体疲劳。
关键词:大豆肽;发酵;清除自由基;抗疲劳;脱脂大豆肽;枯草芽孢杆菌

大豆肽是一种由3-10个氨基酸残基与来自大豆蛋白水解物组成的短链肽。由于它的抗高血压和抗血栓性质等各种生物活性,它不仅被视为是一种营养物而且也作为一个人类健康的功能因子。
在不同类型的生物活性肽(免疫刺激,阿片类药物,抗微生物肽等),大豆肽与氧自由基的清除活动已被广泛研究,由脂质过氧化自由基链反应所造成的细胞或组织伤害目前被认为是各种疾病中一个最重要的诱因。疲劳是一种表明健康可能或已经受到伤害的症状。生理上,在生物胺水平疲劳能引起糖皮质激素的变化。众所周知,糖皮质激素是主要调解人应激反应和调节许多信号事件的免疫反应。因此,疲劳能引起有关生物调节,自主神经,内分泌和免疫系统各种疾病。这些疾病可导致运动强度的减少,甚至活动的中断。所以疲劳是值得现代通常在压力下的人们的关注。许多报告表明,肽在运动过程中能立即提供能量而且在广泛的运动中也是有益的。然而,没有任何有关大豆肽的抗疲劳作用的详细资料。由于大豆蛋白质具有许多不同的前体生物活性肽,有许多对商业酶制剂大豆蛋白水解大豆肽生产的研究。然而,由于它的高生产成本使它不能在发展中国家大规模的应用。很长一段时间,微生物被认为是一种好的酶原料,微生物发酵的食物蛋白质如牛奶和大豆已被证明是一种用纯化酶水解蛋白的较经济的替代方法。脱脂大豆粉富含蛋白质(40-50%),但通常在石油生产过程中被作为低价值的副产品,应作为大豆肽生产中一种良好的蛋白质来源。在本研究中,我们生产由脱脂豆粕发酵大豆肽。超滤和凝胶色谱纯化后,通过小鼠的游泳运动对大豆肽的自由基清除性能和抗疲劳的效果进行了研究。
脱脂豆粕发酵
取培养在斜面上的一圈草坪转移到含有100ml培养基(3g牛肉膏,10g蛋白胨和5g氯化钠加入1000ml的蒸馏水,PH=7.2)的250ml烧瓶中进行种子培养,在37。C下种子培养36h。发酵培养基由5%(w/ v)的脱脂豆粕组成。灭菌后,在500ml烧瓶中每100ml的发酵培养基接种10ml的种子液并在30。C下培养36h。 大豆蛋白水解物的制备
发酵后,发酵液在121。C消毒20min,以杀死微生物。发酵液中未水解的脱脂大豆粉

2
渣经5000r离心30min除去。上清收集,通过0.45um的过滤膜过滤除去杂质,收集得到大豆蛋白水解物(SPH)。 大豆肽的超滤和SPH凝胶色谱制备
三氯乙酸(TCA,0.4M)溶液中加入等体积的SPH。在室温下半个小时后不溶性蛋白经10000r离心10min除去。收集上清并用0.4M的NaOH调pH至7.0。由此产生的上清液经分馏成3种有不同的截留分子量范围(10,3,1 kDa)的超滤膜,小碎片分别通过3 kDa的膜渗透,但冻干的大豆肽不能经1 kDa的膜渗透。为进一步净化,冻干大豆肽分别溶解于去离子水(10mg/ml),装上Sephadex G-25 凝胶过滤柱(2.6*100 cm)。分离获得的去离子水在流率0.5ml/min,在220 nm处测量后洗脱组分(5ml)汇集。该柱子用蓝葡聚糖2000MW(2000 kDa)、胰蛋白酶(233kDa)、简化谷胱甘肽(GSH)(307Da)和甘氨酸(75Da)校准。该部分展示了纯化大豆肽和经体内实验冻干收集的自由基的超强的清除作用。
动物及实验饲料
96只昆明种小鼠(3周龄,20 ± 2g,雄雌数相等)由中国南京实验动物繁育中心供应。这些动物被关在一个温度控制在22±2。C,光暗循环1212h的房间里。这些动物根据南京农业大学动物科学与技术学院的动物中心的道德指引对待。该实验协议是经南京农业大学动物科学与技术学院的批准。小鼠随机分为四组,每组包括12只雌性小鼠和12只雄性小鼠。这些动物经过3d适应环境和标准的饮食后维持了20d按以下规定的饮食。
所有的动物在实验过程中被允许自由食用标准实验室颗粒饲料(由600g/kg淀粉、150g/kg酪蛋白、100g/kg蔗糖、50g/kg豆油、50k/kg纤维素、35k/kg的矿物、10k/kg维生素组成)和水。除了自由食用标准的饮食和水,第一组被指定为每天用5ml蒸馏水灌胃给药的控制剂量组(CD),第二组被指定为每天用大豆肽100mg/ml体重给药的低剂量组(LD),第三组被指定为每天用200mg/kg体重给药的中剂量组(MD),第四组被指定为每天用400mg/kg体重给药的高剂量组(HD)。每组所用的大豆肽溶解在指定浓度的蒸馏水中,然后每5ml的蒸馏水每天对小鼠灌胃。
游泳耐力实验
从各组中取出八只小鼠来,经不同剂量大豆肽给药20d后进行游泳试验,雄性小鼠和雌性小鼠数相等。每个小鼠尾巴负载着其体重5%的镀锌铁丝,然后分别把它们放到充满了水(温度:25 ± 0.5。C、深度:30cm的不同游泳箱中(90 *60 *60 cm),对小鼠的游泳耐力进行观察。耐力时间被定义为小鼠一直保持游泳活动直到小鼠陷入游泳箱底部,并停止至少10s的移动的游泳时间。每个组小鼠的平均时间以及不同群体的数据进行T-检验。
血乳酸分析
不同剂量大豆肽给药20d后,从每个小组选出四只雌性与四只雄性小鼠进行血乳酸分析。最后大豆肽给药后从小鼠的尾静脉收集20ul血液。小鼠游泳10min后立即采集另20ul血液样本。小鼠休息20min后采集第三批血样。
大豆肽对小鼠肝糖原的影响

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要确定小鼠的肝糖原,在最终大豆肽给药后从每组取出四只雌性和四只雄性小鼠在30。C的水中强迫游泳30min。游泳90min后,每只小鼠用高浓度丙烯酸塑料防盗乙醚麻醉致死并尽快收集其肝脏。利用蒽酮化比色法分析的方法,对不同组中小鼠的肝糖原一个接一个的直接测定。
大豆肽对小鼠体重的影响
为了进一步了解大豆肽对体重的影响,每天给小鼠称重并仔细观察它们的增长速度。小鼠经不同剂量的大豆肽给药20d后,不同组中小鼠体重的增加以T-试验进行分析。
数据分析
统计分析采用的是版本8.02的Windows SAS系统。配对的T -检验被用于所有的比较。结果表示的平均值和平均值的标准误差, 被认为是显著P<0.05。
结果与讨论
大豆肽纯化及自由基的清除活性
大豆蛋白水解物制备如上所述是用来净化和清除在每个纯化步骤中测试的自由基的活性。凝胶过滤后,根据分子的大小分离成三个峰。随着进一步的净化,部分自由基清除活性增加,第二部分池,其中三组分的结果具有最高的自由基清除活性。该纯化肽在羟基浓度为10mg/ml时显著展出清除超氧效力,超氧自由基和羟自由基清除活性大约是众所周知的自由基清除剂——生育酚的1.5倍。如超氧阴离子自由基和羟自由基的自由基在正常的新陈代谢下因缺氧而生成的连续减少。超充足的自由基引起的氧化压力,这会导致细胞损伤和组织损伤。此外,氧化应力的产生可能在许多病理条件病因中起着重要的作用。自由基清除剂是一种预防性抗氧化剂其清除活性可以作为预防增加氧化压力和疲劳恢复的征兆。在这里,我们验证了大豆肽具有超氧阴离子和羟自由基清除活性,所以肽用于在小鼠体内实验中可估计其抗疲劳的属性。 大豆肽对小鼠体重和游泳时间的影响
实验期间小鼠体重的增加。小鼠经不同剂量的大豆肽给药20d后,测量他们的体重。结果表明,实验组体重的增加与CD(P > 0.05)组相比无显着差异,因此,大豆肽对体重没有显着影响。治疗组小鼠的装载重量游泳的平均时间均显著比对照组延长。低剂量组,中剂量组和高剂量组游泳的平均时间分别增加了20.91%,45.45%和70%。这些结果表明在实验中大豆肽对小鼠的耐力具有显着影响。 大豆肽对小鼠血乳酸的影响
在游泳前、游泳后和休息20min后对小鼠的血乳酸浓度进行不同处理再测量。发现各组的血乳酸浓度在游泳前没有显著差异(P> 0.05)。然而,在游泳后,低剂量组,中剂量组和高剂量组的血乳酸浓度的比例增加均低于CD组(0.70) (P < 0.05 或 0.01)。低剂量组,中剂量组和高剂量组的比例减少分别为0.30,0.32和0.33。
在厌氧条件下血乳酸是糖酵解的碳水化合物产品,在很短的时间内糖酵解是激烈运动的主要能量来源。因此,血乳酸是衡量疲劳程度的重要指标。血乳酸比例的增加是在游泳

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后的血乳酸增加的百分比,而游泳前,可作为疲劳程度的指标。血乳酸减少比例反映了休息20min后血乳酸的减少,代表着的疲劳程度的恢复指标。在这项研究中,数据显示,游泳后大豆肽的膳食补充剂可以有效地延缓,降低血乳酸产生和推迟疲劳的出现和加快从疲劳中恢复过来。
结论
我们的研究首次报告了脱脂豆粕发酵的生物活性肽的生产。经超滤和凝胶层析纯化后的大豆肽显示出强的清除活性,可以延长小鼠的游泳时间,有效延缓乳酸在血液中的增加 ,并增加肝糖原的储存 。因此,发酵脱脂大豆肽可以认定为是一种获取生物活性肽的潜在方法。

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