㈠ DEAE纤维素阴离子交换柱,看到很多地方讲到流穿模式,什么叫做流穿模式呢
流穿模式指的是样品没挂柱,都留下来了。
㈡ Deae52阴离子交换柱上样量怎么确定,想尽可能上很多样品,但是不会影响分离效果
阴离子交换器 又叫阴床,作用是用阴树脂中的氢氧根交换掉水中的其他阴离版子。离子交换器分为权:钠离子交换器、阴阳床、混合床等种类,。离子交换柱(器)外壳一般采用硬聚氯乙烯(PVC)、硬聚氯乙烯复合玻璃钢(PVC-FRP)、有机玻璃(PMMA)、有机玻璃复合透明玻璃钢(PMMA-FRP)、钢衬胶(JR)、不锈钢衬胶等材质。主要用于锅炉、热电站、化工、轻工、纺织、医药、生物、电子、原子能及纯水处理的前道处理,工业生产所需进行硬水软化、去离子水制备的场合,还可用于食品药物的脱色提纯,贵重金属、化工原料的回收,电镀废水的处理等。 有机玻璃离子交换装置耐腐蚀、无色透明、适用于食品、医药、制糖及电子工业小规模纯水制备。碳钢衬胶离子交换装置具有制水量大、强度高、成本低等特点,适用于大型锅炉软化水及大规模纯水制备。
㈢ 离子交换柱有气泡对纯化有影响吗
有影响,会导致复蛋白纯化的纯度可能制产生影响。
因为离子柱中有气泡,液体会直接通过这部分高度的离子柱,既含气泡的离子柱没有起到交换作用,如果全部的离子柱高度不够,就有可能使杂质离子吸收不彻底,既会对最终产物的纯度产生影响。
㈣ deae阴离子交换柱去除内毒素需要在一定的缓冲体系中吗
DEAE是阴离子交换柱,一般适合于等电点比较低的酸性蛋白。
另外DEAE在结合内毒素上有很好的效果,所以在很多蛋白去除内毒素时可以用到DEAE。
㈤ 酶分离纯化离子交换柱预装柱怎么使用
如果不限定纯化方法,可以考虑亲和层析或离子交换,但根据你问题的意思,是内选定离子交换。
此时容就要考虑你蛋白的等电点了,如果等电点在你稳定pH之上,就用阳离子交换柱:
设计阳离子交换层析:将你的样品置换到你所指的稳定pH的running buffer。同时装柱,平衡,然后上样,平衡,洗脱(因为你的pH不稳定,建议盐洗脱),收峰。得你的蛋白;
如果你的等电点在稳定pH之下,就用阴离子交换柱,其步骤如上,只是改变柱子类型。
㈥ 蛋白挂在阳离子交换柱上洗脱不下来,怎么办
疏水层析目的蛋白结合太紧,一般需要降低疏水作用,可以考虑降低结合时中性盐的浓度。使用疏水力较弱的层析填料,比如丁基疏水、辛基疏水的填料。 洗脱时可以用蒸馏水直接洗脱,如果还是那以洗脱的话可以尝试添加低浓度乙醇
㈦ 纯化多糖时,纤维素和纤维素阴离子交换柱的区别
库仑首宰 youtuoh142
㈧ 设计一个利用阴离子交换柱纯化一个等电点为7.5的蛋白质的实验
既然是抄阴离子交换,就要让目标蛋白带负电,那么缓冲液PH就要大于等电点。缓冲体系的选择也很重要,一般用TRIS-HCl,特别是弱阴离子柱不可选用带负电强的磷酸盐缓冲液,否则上样液中被交换的将是磷酸根而不是目标蛋白。一般用NaCl平衡后上样进行离子交换,然后再用较强的阴离子洗脱。
㈨ 蛋白纯化离子交换柱一般多大体积
如果蛋白来质等电点是6.2,用DEAE柱子,应自选用8.0左右的pH值上柱子DEAE是阴离子交换柱,当环境pH高于蛋白质等电点的时候,蛋白质可以结合上阴离子柱。考虑到要稳定的结合一般选择的环境pH要高于等电点值1.5左右。同时考虑维持蛋白质的稳定,环境pH一般选择偏中性的值。
㈩ 水的净化实验中为什么要用蒸馏水将离子交换柱洗至PH为中性
水的净化实验中,用蒸馏水去将离子交换树脂,其实就是利用水中氢离子及氢氧根离子去交换树脂上的重金属离子。