超滤浓缩的最小体积

① 【求助】超滤能否脱盐和浓缩一步完成啊

昨天有个millipore的技术人员就是这样说的~HarveyWang(站内联系TA)本人主要是从发酵液中提取酶,文献上一般的步骤是先用硫酸铵沉淀,然后透析,再用超滤浓缩,最后冷冻干燥, 这要看你需要做多大的体积了。:) (1)硫酸铵沉淀法：我的观点是，如果你1000 mL的发酵液的话，硫酸铵沉淀可以用，但是这浪费多少硫酸铵啊？！做学术研究可以，如果你的课题是计划做提取酶的工艺和中试的话，这种硫酸铵沉淀并不有太大的实用性。 （2）超滤步骤的选用要看你的酶溶液有多大的体积。 如果发酵液的酶的量并不是很浓的话，例如50 mL 10 mg/L的酶量，用这种超滤膜会损失掉大部分你的目地酶，都粘到膜上去了，很难洗下来（稀的NaOH可以）。不能轻信某品牌销售说的话，用用就知道了。如果你的浓缩液体积比较大，例如100-500 mL，酶的浓度也很高，这是可以用超滤膜的。 （3）对于小体积的脱盐透析，透析袋很好用的。这里是指10 mL-100 mL。从操作方便性上看，这个在小型试验中我最喜欢用。好简单啊。。。。 自己顶一个,解答的详细的有重奖!(金币可以再加) （1）发酵液的酶蛋白浓度大约是多少，纯度是多少？发个SDS-PAGE看看，注明上样量。 （2）硫酸铵沉淀后和透析后可上离子交换，这可以浓缩10-1000倍，还可以有纯化效果，然后再冷冻浓缩啊。HarveyWang(站内联系TA)哈哈哈哈，回帖就有金币拿:Ddaidai0124(站内联系TA)本人现在只是小规模的提取酶,马上要上发酵罐,需要大规模的提取酶液,不是做酶学性质,所以酶的纯度要求不高,和工业用酶的纯度差不多就可以了!希望大家推荐个适合工业化提取酶液的工艺,主要考虑成本问题.请版主帮忙在增加悬赏金币20个lvgl158(站内联系TA)起码知道 它的分子量 才能知道是否可以用同一个膜 如果小于一万可能就有点难度 可以先用少量的硫酸铵澄清 离心后 进行超滤 在超滤前 必须的保证液体 清澈hezhao999(站内联系TA)体积的在200ml以上用超滤仪，200ml以下可以用超滤离心管，如果不知分子量选用1000的膜完全可以了，如果知道分子量，则选择酶分子量1/5的超滤膜。zhaocy8903(站内联系TA)多大规模的发酵 多大规模的发酵

② 最小的体积单位是什么

目前最小的体积单位是：立方纳米。
1，举个例子，1个棱长为1纳米的正方体，它的体积就是1立方纳米。通常的1个细胞，体积就有0.01立方毫米，相当于10000立方纳米。
2，1立方纳米=1/1000000000立方微米=1/1000000000000000000立方毫米。
3，立方纳米应用于医学上和科学上，其它学科一般不用。因为它太小了。
4，常用的体积单位
立方米
立方分米
立方厘米
立方英尺
立方毫米
1立方米=1000立方分米=1，000，000立方厘米=10，00000，000立方毫米；
1立方米=1000升=1000立方分米=1，000，000毫升=1000000立方厘米=1，000，000，000立方毫米；
1升=1立方分米=1000毫升=1000立方厘米=1，000，000立方毫米；
立方英尺（cubic
feet/CUF/CUFT）=1立方英尺=1（ft3）=0.0283立方米（m3）=28.317升（liter）=28.317立方分米（dm3）=28317立方厘米=28317000立方毫米
每相邻两个单位之间进率1000

③ 15ml，10kd超滤管转速要多大

1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，最常见的是Ultra-15（10kD）。
通常应截版留分子量不应大于权目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同，表格中有。

2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。

3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。

注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开
离心机，否则离心机出问题时，无法第一时间处理，后果不可预测！膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。

④ 怎么计算罐体的最大最小体积

罐体体积公式是πr²xh

⑤ 电脑什么压缩软件压缩最小到体积！！！

目前常用的压缩软件 压缩率都差不多的，压缩效果最主要取决于你要压缩文件的格式，比如 如果是rm的视频格式 你再怎么压缩也压不了多少

⑥ 化粪池大小怎么确定，最小多少，

化粪池抄计算与，化粪池设计袭总人数N，每人每日污水定额q，污水在化粪池内的停留时间t，以及实际使用卫生器具的人数与设计总人数的百分比α，d；分流系统每人每天污泥量a＝0.4L/人。d有关。

以上参数根据规范GB50015－2003p71－72页确定。

W1=N*q*t*α/(24*1000)

W2=1。2*(a*N*α*T(1-b)*k)/((1-c)*1000)

具体的卫生器具数量并不能很准确计算化粪池，要确定总的人数才行。

(6)超滤浓缩的最小体积扩展阅读：

化粪池的作用：

化粪池是基本的污泥处理设施，同时也是生活污水的预处理设施，它的作用表现在：

1、 保障生活社区的环境卫生，避免生活污水及污染物在居住环境的扩散。

2、 在化粪池厌氧腐化的工作环境中，杀灭蚊蝇虫卵。

3、 临时性储存污泥，有机污泥进行厌氧腐化，熟化的有机污泥可作为农用肥料。

4、 生活污水的预处理（一级处理），沉淀杂质，并使大分子有机物水解，成为酸、醇等小分子有机物，改善后续的污水处理。

⑦ 如何保证WinRAR压缩包的体积最小

选择多个文件，全选后单击右键，选择WinRAR中的“添加到压缩文件”选项，在打开的对话框中将“压缩方式”选择“最好”，然后在“压缩分卷大小，字节（V）”下选择“自动检测”。最重要的是选择“创建固实压缩文件”，这样可以把多个文件当一个文件压缩，减少压缩包体积。推荐勾选“测试压缩文件”，这样WinRAR会自动测试压缩包是否有错误，确定后开始压缩文件。

⑧ 超滤离心管能够通过最小的分子量是多少

离心管就是一来个简单的可以承受高转速自压力的管子,比如离一些样品,分离出上清沉淀. 离心超滤管会有一个类似于内管和外管的两个部分,内管中是带有一定分子量的膜,当高速离心时,分子量比它小的就漏到下面的管子（即外管）中了,分子量比它大的就截留在上面（即内管中）,就是超滤的原理.常用于浓缩样品.

⑨ 超滤离心管怎么使用

蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。
1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的Buffer，直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。
6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作，用黄枪头（200ul）取，轻轻顺着边缘插入枪头，轻轻吹打、混匀蛋白液，注意不要碰到超滤膜，然后吸取浓缩液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取，否则难度太大，有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中，没过超滤膜，防止膜失水变干。
7、以下是处理超滤管，重复利用超滤管的步骤。
8、倒出超滤管里的水，用milliQ水轻轻润洗几次，【若管底有可见的蛋白沉淀，可以先加入水，然后用枪头吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀悬起，然后倒掉，不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液，室温放置20min，期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液，将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时，不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗，内壁再用MilliQ水洗干净。
9、取出浸没的管芯，加至接近满的MilliQ水，50ml管也加满MilliQ水，将管芯慢慢放入50ml
离心管，排出部分水，然后盖上盖子，放4度保存，直到下次使用。一般来说，按照上述步骤和注意事项，每根管用三四年不会坏。

⑩ 膜过滤是按大小筛选分子，为什么超滤是说分子量筛选，而微滤则是体积筛选

你这个问题算是找对人了。
1.“膜过滤是按大小筛选分子”这句话说的是不完全对版的。因为膜按照分离权物质的大小来分为微滤（0.1um以上，通常指0．2um以上）、超滤（0．1um一下）、纳滤和反渗透（离子级别，通常是10nm以下）。
2．“超滤”通常是用于分离和浓缩蛋白质＼胶体。微滤通常用于细菌（0．2um膜）或者过滤微小颗粒（0．45um）。细菌和微小颗粒不是分子级别的，蛋白质的可以说是分子级别的。
换句话说吧，其实上面所说的超滤和微滤的孔径是用物理孔径来分的，这对于微滤来说是没有问题的，但是对于超滤来说，但说孔径是多少um是不合适的。因为在电镜下分析超滤的孔径是很困难的（即使是能观察到膜表面孔径也不能证明这个孔是通透的），现在在学术界通常用蛋白质＼葡聚糖＼聚乙二醇等来评价膜的过滤效果。这些评价物质是用分子量来标定的，比如对于牛血清蛋白（64000）的截留率为90％，那么就说这个超滤膜是6．4w。但是这个和孔径的具体关系并没有完全建立起来，这个问题比较复杂，就不细说了。
微滤就是小孔截住大颗粒物质，孔大小就用直径或者半径来表示，这个就没有必要多说了。