A. 关于离子交换色谱中弱阳离子交换的填料,只要是羧甲基(CM)的填料都行
这个我知道的也不多,我们公司代理的就有,TOSOH的,他的Toyopearl弱阳离子交换树脂,这个不错,资料有些,你要的话可以发给你,留个邮箱啥的
B. 某蛋白质等电点为8.14,如采用离子交换色谱法来纯化,如何选择填料和缓冲体系
我的话,第一步会选择pH7.0-7.4左右过阴离子交换,让大多数杂蛋白(大多数杂蛋白pI在6左右)、核酸、色素等杂质结合,收集流穿液,此时蛋白溶液的纯度和澄清度会大大提高,再校pH7.0或更低pH过阳离子交换进行纯化。讲究一点的话,在缓冲选择上可以区分一下阴阳离子缓冲,多数情况影响不大,不必纠结。
C. 我要分离纯化一种未知酶,一切未知,想用凝胶层析和离子交换层析分离,不知选用什么填料合适有好的建议
建议用离子交换层析。凝胶过滤层析流速慢,上样量低,而且分离效果一般,凝胶回过滤答一般用于层析的后期包括除盐,去除降解片段之类的。
离子交换一般就用到DEAE,因为大部分蛋白都偏酸。要是你的酶是碱性蛋白,那就更好办,上个CM柱,其他杂蛋白就留不下多少了。
所以先拿DEAE试试吧。
D. 做酶的分离纯化是做离子交换和凝胶层析时使用普通的玻璃层析柱,只选择填料行不行
没问题的。
普通的玻璃层析柱只是做离子交换、凝胶层析压力没问题,一般也用不到什么有机溶剂,所以放心用吧。
E. 有关固相萃取填料的离子交换容量
名称: Macro-Prep50系列离子交换填料
详细信息
货号 名称 包装 功能基团 载量mg/ml pH范围 高温消毒 最高流速cm/h
158-0040 Macro-Prep High Q 25ml ―N+(CH3)3 40(BSA) 1~14 可以 3000
156-0040 100 ml ―N+(CH3)3 40(BSA) 1~14 可以 3000
156-0041 500 ml ―N+(CH3)3 40(BSA) 1~14 可以 3000
156-0042 5L ―N+(CH3)3 40(BSA) 1~14 可以 3000
156-0043 10L ―N+(CH3)3 40(BSA) 1~14 可以 3000
158-0020 Macro-Prep DEAE 25 ml ―N+(C2H5)2 35 (BSA) 1~14 可以 3000
156-0020 100 ml ―N+(C2H5)2 35(BSA) 1~14 可以 3000
156-0021 500 ml ―N+(C2H5)2 35(BSA) 1~14 可以 3000
156-0022 5L ―N+(C2H5)2 35(BSA) 1~14 可以 3000
156-0023 10L ―N+(C2H5)2 35(BSA) 1~14 可以 3000
158-0030 Macro-Prep High S 25 ml ―SO3- 70(lgG) 1~14 可以 3000
156-0030 100 ml ―SO3- 70(lgG) 1~14 可以 3000
156-0031 500 ml ―SO3- 70(lgG) 1~14 可以 3000
156-0032 5L ―SO3- 70(lgG) 1~14 可以 3000
156-0033 10L ―SO3- 70(lgG) 1~14 可以 3000
158-0070 Macro-Prep CM 25 ml
―COO- 35 1~14 可以 3000
156-0070 100 ml ―COO- 35
1~14 可以 3000
156-0071 500 ml ―COO- 35
1~14 可以 3000
156-0072 5L ―COO- 35 1~14 可以 3000
156-0073 10L ―COO- 35 1~14 可以 3000
Macro-Prep 50系列:
在低压和中压下操作良好,在不同pH和离子强度时仍具有最小的体积变化。
l.对生物分子具有较高载量
2.对复杂生物混合物具有高分辨率
3.坚硬的多聚物基质,为中压介质中最耐压者,从而流速最高
4.亲水基质减少了非特异结合
5.大孔径增强了离子进入位点
6.化学、机械和热稳定性优异
7.孔径均为50μm
F. 离子交换树脂作为药物载体应具备哪些优点
1、高效离子交换色谱 应用离子交换的原理,采用低交换容量的离子交换树脂来分离离子,这在离子色谱中应用最广泛,其主要填料类型为有机离子交换树脂,以苯乙烯二乙烯苯共聚体为骨架,在苯环上引入磺酸基,形成强酸型阳离子交换树脂,引入叔胺基而成季胺型强碱性阴离子交换树脂,此交换树脂具有大孔或薄壳型或多孔表面层型的物理结构,以便于快速达到交换平衡,离子交换树脂耐酸碱可在任何pH范围内使用,易再生处理、使用寿命长,缺点是机械强度差、易溶胀易、受有机物污染。 硅质键合离子交换剂以硅胶为载体,将有离子交换基的有机硅烷与基表面的硅醇基反应,形成化学键合型离子交换剂,其特点是柱效高、交换平衡快、机械强度高,缺点是不耐酸碱、只宜在pH28范围内使用。离子交换色谱是最常用的离子色谱。 2、离子排斥色谱 它主要根据Donnon膜排斥效应,电离组分受排斥不被保留,而弱酸则有一定保留的原理,制成离子排斥色谱主要用于分离有机酸以及无机含氧酸根,如硼酸根碳酸根和硫酸根有机酸等。它主要采用高交换容量的磺化H型阳离子交换树脂为填料以稀盐酸为淋洗液。3、离子对色谱 离子对色谱的固定相为疏水型的中性填料,可用苯乙烯二乙烯苯树脂或十八烷基硅胶(ODS),也有用C8硅胶或CN,固定相流动相由含有所谓对离子试剂和含适量有机溶剂的水溶液组成,对离子是指其电荷与待测离子相反,并能与之生成疏水性离子,对化合物的表面活性剂离子,用于阴离子分离的对离子是烷基胺类如氢氧化四丁基铵氢氧化十六烷基三甲烷等,用于阳离子分离的对离子是烷基磺酸类,如己烷磺酸钠,庚烷磺酸钠等对离子的非极性端亲脂极性端亲水,其CH2键越长则离子对化合物在固定相的保留越强,在极性流动相中,往往加入一些有机溶剂,以加快淋洗速度,此法主要用于疏水性阴离子以及金属络合物的分离,至于其分离机理则有3种不同的假说,反相离子对分配离子交换以及离子相互作用。 二、离子色谱系统IC系统的构成与HPLC相同,仪器由流动相传送部分、分离柱、检测器和数据处理4个部分组成,在需要抑制背景电导的情况下通常还配有MSM或类似抑制器。其主要不同之处是IC的流动相要求耐酸碱腐蚀以及在可与水互溶的有机溶剂(如乙腈、甲醇和丙酮等)中不溶胀的系统。因此,凡是流动相通过的管道、阀门、泵、柱子及接头等均不宜用不锈钢材料,而是用耐酸碱腐蚀的PEEK材料的全塑IC系统。离子色谱的最重要的部件是分离柱。柱管材料应是惰性的,一般均在室温下使用。高效柱和特殊性能分离柱的研制成功,是离子色谱迅速发展的关键。
G. 色谱柱的填料有哪些阳离子交换柱
阳离子是指功能基团,有很多选择,强阳弱阳;基质又有多种,主要可分为硅胶和聚合物,聚合物种类比较多,如PSDVB,聚甲基丙烯酸酯等。
H. 为什么说弱离子交换填料分辨率高
强、弱酸(碱)交换器没什么区别,区别的是交换器体内的载体(离子交换树脂),当然弱酸(碱)型离子交换树脂的使用主要特点是周期制水量大,减少了排废量,自然节约了再生剂用量…。一杰水质
I. 如何选择合适的填料进行离子交换层析
具体看你的溶液情况,可以分步处理,最终达到满意。一般填料前段都回是要砂碳滤、精滤答,目的是为了保护离子交换树脂,让其发挥最大的效果。至于到底选用什么树脂,看溶液的出水要求,都可以得到一个针对性的处理,操作起来也很简单
J. 既有分子排阻作用,又有离子交换功能的填料
色谱分析法基本原理
色谱法,又称层析法。根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。