① 高效液相色谱柱柱头筛板怎么拆洗,感觉筛板是和柱子一体的，弄不下来
这个是不建议拆洗的，容易把柱头的硅胶破坏，除非是快报废的柱子，死马当活马医
② 什么情况下需要更换液相色谱柱有什么现象液相色谱保护柱的使用寿命是多少啊
转载：《分析测试网络网》
色谱柱预防性保护与柱寿命的延长
通常，一根色谱柱在分析数千个样品之后性能仍然保持良好，但也有的柱仅分析不多的样品后几乎就报废了。影响柱寿命和其它问题的因素很多，而有些因素是操作者很难控制的，如果被分析的样品（如分析生物样品），怎么净化样品也是“脏”的，好于色谱柱的影响是非常大的。然而采取下列措施后，在多数情况下总能够人为地减少柱上故障，达到延长柱寿命的目的。
1．加流路过滤器和保护柱
流路过滤器紧靠进样阀后面，位于分析柱前。0.5μm烧结不锈钢片夹在死体积很小的套子中，挡住来源于样品和进样阀垫圈的微粒入柱。因为每个样品都过滤既费事又带来误差，样品量少过滤更困难，因此流路上装过滤器是比较省事的办法。也可以在流路加上保护柱，放在流路过滤器和分析柱之间，或者代替流路过滤器。保护柱的使命是收集阻塞柱进口的来自样品的化学“垃圾”。这程垃圾最终隐藏低柱效能。保护柱应该是小体积，用分析柱的同种填料填装。保护柱使用得当，对分离无影响，好像未装保护柱一样。有些厂商的商品将保护柱都是用短柱、不超过3cm长，内径2～3mm，用较大粒度的填粒（15～20μm）干法填装，会使分析柱的效能有所降低。
2．避免高压冲击
一般色谱柱都能经得起高压，但经不起突然变化的高压冲击。引起高压突然冲击，主要是因样品阀的缓慢转动、泵起动快，柱切换操作等。等面已讨论过，转动六通进样阀时从泵到柱的液流会瞬时切断。在阀的泵侧压力升高，在阀的柱侧压力降低（变化超过20%）。阀转到底后压力突然冲击一下恢复正常，手动进样阀的变化不大，自动进样阀比较慢，可能造成压力冲击，可用氦气代替空气驱动进样阀。因氨压缩系数小。另外泵起动不应过快，可分步操作。如用3ml/min流速，先从1mL/min到2mL/min，然后再3ml/min，每个间隔应大于20s。
柱切换技术的应用也很广泛，切换过程中在色谱柱的入口处压力在零到很大数字之间变化，会很快使柱报废。
3．分离条件
多数色谱柱有很宽的试验条件范围，但具体应用又受到限制，主要是pH值、柱温和流动相的选择。
硅胶为基质的键合相要求pH在2.5～7之间，极端pH的流动相能“溶解”硅胶，使键合相流失。结果非碱性组分峰变宽。如果一定要用高或低pH的流动相，可加预柱（饱和柱）。预柱装在泵和进样阀之间，用分析柱相同的填料填装，或者用普通硅胶。硅胶饱和了流动相。减少了分析柱填料的损失。预柱不要求柱效高，用价格低的一般硅胶疏松地填装，按期检查硅胶的溶解情况。用预柱也有不利的影响。即新流动相难以平衡，保留时间不稳定或稳定慢。使用了预柱一定要加流路过滤器，以防止硅胶微粒引起的麻烦。
以硅胶为基质的柱和阴离子交换柱超过60℃后，会增加对流动相中化学物质的吸附。在高温下用小颗粒柱引起柱床塌陷，降低柱效，改变峰形。在4℃以上使用3μm柱，70℃以上使用5μm柱，会使N值降低50%。
有些流动相中的溶剂不能用于某些柱，如小颗粒的聚苯乙烯填料不能用于非水的排阻色谱。另一方面，有些柱与某些溶剂（如四氢呋喃）一旦达到平衡，不要随意改用其它溶剂。有关这些特殊填料，可以参见有关资料。
水溶性流动相会引起微生物生长而造成阻塞柱。色谱柱应存放在纯有机溶剂或加了50%有机溶剂的水中。凝胶柱可存放在水溶性缓冲液中，同时加0.01%叠氮钠以防止微生物的生长。
4．净化样品
用溶剂溶解的样品，多数组分在一定的时间内能完全从柱中流出来，不会造成危害。
有些样品可能含有微粒物质，样品中的某种组分（如蛋白质）在柱头上沉积下来，组分在固定相上保留很强，溶剂带走柱填料，等等，这些都会造成柱效能下降或柱寿命的影响，有必要采取措施防止柱变坏。
如在光线照射下观察样品是浑浊的或带有乳白色，进样前必须要过滤。虽然流路上装有过滤器和保护柱，但不能代替样品的前处理，样品中过多的微粒会使过滤器和保护柱超载，很快阻塞，或者微粒进入分析柱，所以在进样前必须过滤样品。
若怀疑样品与流动相混合有沉淀而对色谱柱有阻塞，应先试验一下，看样品溶液加入流动相中有无变浑或乳白色出现。如果进样后压力突然增加而后又慢慢减小，表明样品中有微粒或发生沉淀。如有沉淀要设法改变分离条件，包括换样品溶剂和流动相；或处理样品去掉不溶物质。应尽量用小体积的样品。
有些样品能很强地吸附在柱填料上，这样会降低塔板数，改变样品的保留时间、峰形，并且使得基线变差。除了用预处理的方法除去强保留物质外，还要加保护柱，定期清洗色谱柱。有时因为疏忽，用对柱有害的溶剂溶解样品，比如用6mol/L的氢氧化钠溶解样品，这样的样品只要进50～100μL到硅胶基质柱中，硅胶就很快溶解而使柱报废。在这种情况下，应立即中和样品，或除去原溶剂中的有害成分。
5．用强溶剂定期冲洗柱
每次工作结束，用强溶剂冲洗柱是良好的习惯。可用甲醇、乙腈冲反相柱，冲去留在柱上的强吸附组分。用甲醇/水为流动相时也应冲洗。冲洗的程序在以下章节中介绍。
柱头的烧结不锈钢滤片，要求平整，死体积小，孔径适当（2～5μm）。过滤片选择不好会改变色谱峰形，增加阻力或起不到阻挡污染物的作用（填料很快变色）。
此外，对柱硬件的保养也不可忽视。实际操作中应注意以下几点：
1、 接头要配套，用同一厂商的组接件；
2 、接头之间、柱压帽螺母与密封卡磁之间无微粒（填料），否则收紧时容易咬死；
3 、密封卡套与柱管一次性卡紧后再也不能松动，所以拆开柱头再上紧时要小心，不能使卡套移动，原来柱端的不锈钢滤片和垫片的厚度和强度也不能改变（改变这些附件的性能就促使卡套移动）；
4 、接头等组接件不要拧得过紧，适当上紧后接上泵试验，分步拧紧，直到不漏为止。还有非常重要的是柱硬件的损坏往往会造成不可挽回的损失。
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③ 液相色谱柱柱压很高怎么办
你得分析一下为什么柱压高。
有的色谱柱出厂的时候柱压就很高，比如同样是迪马的色谱柱，一代柱压力低，二代柱压力高。虽然填料差不多，不过二代柱是国内填充的。可能工艺上不好。或者pH耐受范围广的，压力可能会高。这种情况不能改变。只能更换色谱柱。
如果是压力不高，而是之后实验过程导致，那也有很多可能。反正就是堵住了。因为不通所以压力高，处理的话通开了就好。
a.气泡堵住了。这种情况不但柱压高，而且波动大。用纯的甲醇或者乙腈低流速冲洗，色谱柱出口朝上，尽量让气泡从上面流出来
b.盐堵住了。这个只能是10-15%的甲醇水冲洗，把柱温加到35℃。看看能不能把盐溶出来
c.强保留物质。这个几乎没办法冲洗，每一根就柱子的柱前都不是填料本身的白色，而是黄色的。这个就是……样品溶液中的强保留物质。所以样品进入仪器前一定要过滤！拿甲醇反冲冲冲看吧，运气好可以冲掉。
d.微生物。一般老实验员不会犯这种错误，纯水或者纯盐的流动相，即便过滤了，最多放置一天。再久就会长细菌了。这个你自己看看流动相的瓶子，把里面的流动相倒出来，摸摸瓶壁如果滑滑的，那就是长细菌了。这个挺麻烦的，先用纯甲醇冲洗，然后用DMF低流速冲洗，据说可以冲掉70%的细菌和细菌尸体。
目前就想到这些，再多了只能你结合试验情况自己分析了。
④ 怎么看液相色谱柱柱头塌陷怎么办
看一下柱子是怎么封装的 如果柱头能打开 找点填料填充一下塌陷 还用用一段时间 不可拆卸的那种柱子就只能换新的了
⑤ 液相过滤试剂用的那个东西叫什么名称
如果过滤的是流动相：
装置是抽滤瓶、减压抽滤瓶或者不是漏斗。使用的时候还需要一个抽滤泵。
膜的话是微孔滤膜，0.2μm或0.45μm孔径。
过滤样品就用注射器就可以。用的是微孔过滤头。
⑥ 液相样品怎么过滤
注射器链注射针吸样品，然后移去针头套上滤头（0.45、0.25um）弃去初滤液4、5滴取续滤液即可；
微量注射器也能套上啊，注射头不都是统一规格的吗？如不行用封口膜密封
⑦ 大虾们我想请教一下，接在液相色谱柱前的虑柱和在线过滤器的有什么区别它们的作用一样吗
在线过滤放在泵和进样阀或自动进样器之间，纸过滤流动相，不版过滤样品。预柱或保护柱权放在分析柱前。
但也有把在线过滤放在柱前用的，比如某公司的工程师经常把在线过滤接在GPC柱或保护柱前。
在线过滤器：过滤流动相
保护柱：抵挡样品对柱子的损伤
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⑧ 液相色谱柱应该怎样清洗
朋友，什么柱子规格，新柱旧柱？
正相or反相？
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⑨ 高效液相色谱纯化蛋白质一般都用什么柱子
色谱柱在HPLC中是非常关键的部件.一台色谱仪如果没有色谱柱几乎什么工作也做不了.色谱柱是消耗品,有一定寿命,使用中也非常容易出问题.普通的正相反相色谱柱使用得当可用一、两年.使用不得当用两、三个月就可能损坏.所以使用中应该非常注意.
1.
在使用一根新的色谱柱之前,一定要看柱说明书,将柱子的使用压力、pH值、温度范围和所用流动相种类都要弄清楚.接触最多的是C18色谱柱,它对试剂应用的范围非常广,甲醇、水、乙腈、四氢呋喃、三氯甲烷、正乙烷、各种缓冲盐都适用.但其他的色谱柱所使用的试剂就有一定的要求,有的色谱柱只能使用水,不能使用有机试剂,有的色谱柱只能使用有机试剂,而且使用指定是某一种,象GPC色谱柱.这些事情一定搞清楚,如果流动相使用不对,柱子很快会损坏.另外在更换柱子时不能让不能使用的流动相进入柱子.
2.
柱子是有方向的,柱子上箭头的方向就是流动相流动的方向.当换新柱子时,不要马上就接到检测器上使用.将柱子入口处接在进样器的出口,柱子出口处（即箭头的一端）先不接检测器,按箭头方向垂直朝上,用流动相（甲醇）以1ml/min的流速冲洗1min左右.将柱子里的小气泡全部赶走以后再接到检测器上,否则小气泡跑到检测池里,就很难赶走,检测器产生噪声信号,基线也就走不好.
3.
关于压力对色谱柱的影响：常用的正反两相色谱柱一般耐压在12～20MPa之间,生产厂家不同,耐压也不同,从理论上讲耐压高的色谱柱柱效就高,但柱效高低不仅与耐压的高低有关,还有其他因素.从使用中看,在保证柱效的同时,耐压不要太高,仪器所显示的压力是流路、混合器、自动进样器、柱压、流通池总体的压力,检查柱压力应分段检查.压力过高不仅柱子受不了,其他的部件也会出问题,例如自动进样器.
4.
色谱柱对pH值是有一定的使用范围.以硅胶为担体的柱子一般使用范围在2～7pH.
耐碱性能不太好,流动相的pH大于8会使硅胶溶解.有些分析条件须用碱性流动相,这时一定要选耐碱性好的色谱柱,流动相的PH值过高或过低,流动相使用纯水,使用高浓度磷酸盐缓冲溶液,使用离子对试剂等,均可能造成色谱柱填料被化学破坏,这种对色谱柱固定相及键合相的破坏通常是不可修复的.
5.
色谱柱的使用温度不要超过说明书上规定的温度.一般使用温度在60℃以下,典型硅胶基质色谱柱的使用温度在5℃与60℃之间,高温使用会缩短柱寿命.
6.
色谱柱使用过程中压力的骤然波动,温度的骤然变化或机械撞击都会对色谱柱床产生影响.进样过程中,进样阀转动太慢引起压力波动；流速的突然增大都应在日常分析中尽量避免.一般说来,在低柱压下操作可大大减少由压力波动造成的柱效损失.这种问题是不可修复的
7.
色谱柱内存在缓冲盐时,如果用高浓度甲醇或其他有机溶剂冲洗色谱柱,会导致柱内缓冲盐结晶析出,造成柱压明显升高.出现该问题时,反相色谱柱首先应使用20%左右有机溶剂的水溶液低流速冲洗色谱柱,使柱内的盐全部溶解冲出,再换成高浓度甲醇或其他有机溶剂的流动相.
8.
样品的预处理,许多样品,特别是生物样品与中药材,其组分复杂,样品预处理是影响色谱柱寿命的关键.样品经过常规的前处理后,进样前还需进行以下步骤：a.用微孔过滤膜出除去样品中的不溶颗粒,以免赌塞柱头筛板及柱内填充床,使柱压升高.b.将样品用流动相溶解或用与流动相互溶的溶剂溶解.
9.
为了保护色谱柱,在色谱柱前接了一个保护柱.保护柱通常是比较短的分析柱,通过吸附可能污染分析柱的强保留杂质,达到保护色谱柱的目的.保护柱的筛板与在线过滤器一样可以阻挡微粒杂质.为了达到最好的保护效果同时避免导致色谱结果的改变,最好选用与分析柱相同或相似的填料填充保护柱.
10.
色谱柱用合适的溶剂保存,若为C18柱推荐用甲醇保存.在日常分析中,流动相含有的不纯物质和样品中的某些组分会吸附在色谱柱中,随着分析时间的延长,吸附量会越多,所以柱子要经常清洗,一般柱子使用一两个星期洗一次,柱子不同清洗的流动相就不同,C18柱子常用甲醇清洗,不要用水清洗这对柱子不好,一般清洗3～4小时,另外色谱柱长时间不用,存放时要将柱子洗干净,脏柱子放置时间越长,柱效会大大降低.存放时,柱内应充满溶剂（甲醇或乙腈）,两端封死.
近几年化验室用的液相色谱仪是越来越多,所用色谱柱的种类也越来越多,问题出的也较多,值得注意的是,不论怎样对色谱柱进行处理,一般都很难恢复到原有水平,因此,大家再使用色谱柱之前一定要看说明书,把以上几项问题搞清楚后再使用,尽量避免发生如上问题.
⑩ 高效液相用的新过滤头可以直接用吗
你指复的是过滤流动相的过滤头？制
还是过滤样品的过滤头？
安捷伦还有一种过滤白头。
过滤流动相的那种可以插上直接用，前提是拿来的时候是密封包装的，别落了灰尘什么的。然后用前需要排气。
过滤样品的不可以，要求规定滤掉3滴以上样品，然后才能用。
安捷伦的过滤白头安上就能用。