od太大用超纯水什么稀释

❶ OD为2的引物怎么稀释

1nmol用10
ul
ddh2o稀释，饥备浓度为100
um,此浓度为储藏浓度，工作浓度要稀释磨肢到10
um.
订引物时候，填10
nmol就可以烂游毁了，不用管
od

❷ 我现在想要将引物加水稀释，OD：2.0，nmol/OD=5.17,MW=5784.83,请问我该如何加水稀释

以下使用方法希望对你有用：

1. OligoDNA是以OD₂₆₀为单位来计量的，是指在1ml体积1cm光程标准比色皿中，260nm波长下吸光度为1A_260nm 的Oligo溶液定义为1OD₂₆₀单位。根据此定义，1OD₂₆₀单位相当于33µg的OligoDNA，您可根据此数据和您的OligoDNA分子量计算得到摩尔数，以此计算不同摩尔浓度的溶液。2. 引物合成公司提供的序列报告中分子量计算公式如下： MW=(A碱基数×312)+(C碱基数×288)+(G碱基数×328)+(T碱基数×303)-61。例如 ：TGGGCGGCGGTGGTGTTACGTMW=（1×312）+（3×288）+（11×328）+（6×303）-61=65413. OligoDNA的分子量还可以用以下近似方法森察缺计算： OligoDNA中的每个脱氧核苷酸碱基的平均分子量近似为324.5，则一条OligoDNA的分子量=碱基数×324.5。例如，您得到一管标为1OD_260nm的20 个碱基OligoDNA分子量=20×324.5=6490质量数=1×33=33µg摩尔数=33/6490=0.0051µmol4. 引物在出厂时都标有1OD 相当于多少µmol 的计算结果，进行稀释时的引物加水量可以按以下公式计算：稀释成100pmol/µl时：1OD引没含物的加水量（µl）=1OD相此辩当于µmol 数×10000例如：您拿到的引物DNA合成报告单上标有1OD≈0.0035µmol，包装量是1OD/管，如果您希望将引物浓度定为100pmol/µl（µmol/L），那么只需用35µl无核酸酶的双蒸水将1OD的引物干粉溶解即可。5. 由于OligoDNA呈很轻的干膜状附在管壁上，打开时极易散失，所以打开管子前请先离心，然后再慢慢打开管盖，溶解时请加足量水后盖上管盖，充分上下振荡5-10分钟。6. 需对OligoDNA作电泳分析，必须采用含7M尿素的聚丙烯酰胺凝胶电泳和1倍TBE Buffer，琼脂糖电泳不适于OligoDNA电泳，另外为防止加样时的扩散和二级结构影响，样品上样前必须加饱和尿素处理再上样。7. OligoDNA的5’端和3’端均为羟基，若需磷酸基团的则要另外再处理或直接在合成时于5’和3’端标上磷酸。8. 由于溴化乙锭对单链寡聚DNA的染色效果与DNA的结构和长度关系密切，相等OD值的不同OligoDNA样品染色后深浅可大不相同，若电泳后EB染色不出现条带或出现的条带很浅，您可将电泳凝胶于荧光板上再在紫外灯下观察，往往会看到明亮的绿色荧光背景下清晰的黑色条带；若无此条件，也可用紫外分光光计度对OD值进行检测。9. 干粉状态的OligoDNA可长期贮存。溶解后建议分装成若干管，-20℃保存，用一管取一管。溶解后的引物4℃保存不超一周为宜。

❸ 2OD的引物怎么稀释

生工的报判档猜告单上应该有一个加水量，不过那个是每OD的，你对应的加上2倍的无菌水就蠢困可以了，然后是掘型100pm的母液，根据实验要求进行进一步的稀释。

❹ 菌液体培养基od值稀释

OD反应了细菌的浓含羡度.
接种后随着细菌的生长,培养基越肆灶来越浑浊,OD不断上升.
至于调节浓度,就是加入TE稀释啊,可以用细胞计数板计数.
不过我严重怀疑这个步骤裂老扮其实只需要凭经验去稀释,真的去数不是麻烦死,而且谁那么准一定能调到每毫升5×108个细菌啊?显然估计一下就行了.

❺ 微生物检测手段及注意事项

1. 微生物计量法

1.1 体积测量法

又称测菌丝浓度法，通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量肆团的待测培养液(如10 mL)放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间(如5 min)和转速(如5000 rpm)，离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为(10-v)/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。

1.2称 干重法

可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10~20%。在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1~5次，进行干燥。干燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80 ℃或40 ℃下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40 ℃下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母(Activity Dry Yeast, ADY),一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。

1.3 比浊法

微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的蚂让吸光值，判断微生物的生长状况。对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时，可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其生长情况，而不必取菌液。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。如使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计，在波长600 nm处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600，以此监控E.coli的生长及诱导时间。

1.4 菌丝长度测量法

对于丝状真菌和一些放线菌，可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度，或是利用一只一端开口并带有刻度的细玻璃管，到入合适的培养基，卧放，在开口的一端接种微生物，一段时间后记录其菌丝生长长度，借此衡量丝状微生物的生长。

2. 微生物计数法

2.1 血球计数板法

血球计数板是一种有特别结构刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四条沟和两条嵴，中央有一短横沟和两个平台，两嵴的表比两平台的表面高0.1 mm，每个平台上刻有不同规格的格网，中央0.1 mm2面积上刻有400个小方格。通过油镜观察，统计一定大格内微生物的数量，即可算出1 mL菌液中所含的菌体数。这种方法简便，直观，快捷，但只适宜于单细胞状态的微生物或丝状微生物所产生的孢闷雹局子进行计数，并且所得结果是包括死细胞在内的总菌数。

2.2 染色计数法

为了弥补一些微生物在油镜下不易观察计数，而直接用血球计数板法又无法区分死细胞和活细胞的不足，人们发明了染色计数法。借助不同的染料对菌体进行适当的染色，可以更方便的在显微镜下进行活菌计数。如酵母活细胞计数可用美蓝染色液，染色后在显微镜下观察，活细胞为无色，而死细胞为蓝色。

2.3 比例计数法

将已知颗粒(如霉菌孢子或红细胞)浓度的液体与一待测细胞浓度的菌液按一定比例均匀混合，在显微镜视野中数出各自的数目，即可得未知菌液的细胞浓度。这种计数方法比较粗放。并且需要配制已知颗粒浓度的悬液做标准。

2.4 液体稀释法

对未知菌样做连续十倍系列稀释，根据估计数，从最适宜的三个连续的10倍稀释液中各取5 mL试样，接种1 mL到3组共15只装培养液的试管中，经培养后记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查最大或然数表MPN(Most Probable Number)得出菌样的含菌数，根据样品稀释倍数计算出活菌含量。该法常用于食品中微生物的检测，例如饮用水和牛奶的微生物限量检查。

2.5 平板菌落计数法

这是一种最常用的活菌计数法。将待测菌液进行梯度稀释，取一定体积的稀释菌液与合适的固体培养基在凝固前均匀混合，或将菌液涂布于已凝固的固体培养基平板上。保温培养后，用平板上出现的菌落数乘以菌液稀释度，即可算出原菌液的含菌数。一般以直径9 cm的平板上出现50~500个菌落为宜。但方法比较麻烦，操作者需有熟练的技术。平板菌落计数法不仅可以得出菌液中活菌的含菌数，而且同时将菌液中的'细菌进行了一次分离培养，获得了单克隆。

2.6 试剂纸

在平板计数法的基础上，发展了小型商品化产品以供快速计数用。形式有小型厚滤纸片，琼脂片等。在滤纸和琼脂片中吸有合适的培养基，其中加入活性指示剂2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑(TTC，无色)待蘸取测试菌液后置密封包装袋中培养。短期培养后在滤纸上出现一定密度的玫瑰色微小菌落与标准纸色板上图谱比较即可估算出样品的含菌量。试剂纸法计数快捷准确，相比而言避免了平板计数法的人为操作误差。

2.7 膜过滤法

用特殊的滤膜过滤一定体积的含菌样品，经丫叮橙染色，在紫外显微镜下观察细胞的荧光，活细胞会发橙色荧光，而死细胞则发绿色荧光。

3. 间接测定法

微生物的生长伴随着一系列生理指标发生变化，例如酸碱度，发酵液中的含氮量，含糖量，产气量等，与生长量相平行的生理指标很多，它们可作为生长测定的相对值。因此可利用生理指标等间接参数来测定生物量。

3.1 测定含氮量

大多数细菌的含氮量为干重的12.5%，酵母为7.5%，霉菌为6.0%。根据含氮量×6.25，即可测定粗蛋白的含量。含氮量的测定方法有很多，如用硫酸，过氯酸，碘酸，磷酸等消化法和Dumas测N2气法。Dumas测N2气法是将样品与CuO混合，在CO2气流中加热后产生氮气，收集在呼吸计中，用KOH吸去CO2后即可测出N2的量。

3.2 测定含碳量

将少量(干重0.2~2.0 mg)生物材料混入1 mL水或无机缓冲液中，用2 mL 2%的K2Cr2O7溶液在100 ℃下加热30分钟后冷却。加水稀释至5 mL，在580 nm的波长下读取吸光光度值，即可推算出生长量。需用试剂做空白对照，用标准样品做标准曲线。

3.3还原糖测定法

还原糖通常是指单糖或寡糖，可以被微生物直接利用，通过还原糖的测定可间接反映微生物的生长状况，常用于大规模工业发酵生产上微生物生长的常规监测。方法是，离心发酵液，取上清液，加入斐林试剂，沸水浴煮沸3分钟，取出加少许盐酸酸化，加入Na2S2O3临近终点时加入淀粉溶液，继续加Na2S2O3至终点，查表读出还原糖的含量。

3.4 氨基氮的测定

离心发酵液，取上清液，加入甲基红和盐酸作指示剂，加入0.02 mol/L的NaOH调色至颜色刚刚褪去，加入底物18%的中性甲醛，反应数刻，加入0.02 mol/L的使之变色，根据NaOH的用量折算出氨基氮的含量。根据培养液中氨基氮的含量，可间接反映微生物的生长状况。

3.5 其他生理物质的测定

P，DNA，RNA，ATP，NAM(乙酰胞壁酸)等含量以及产酸，产气，产CO2(用标记葡萄糖做基质)，耗氧，黏度，产热等指标，都可用于生长量的测定。也可以根据反应前后的基质浓度变化，最终产气量，微生物活性三方面的测定反映微生物的生长。如在BMP-2的发酵生产上，随时监测溶氧量的变化和酸碱度的变化，判断细菌的长势。

4. 商业化快速微生物检测法

微生物的检测，其发展方向是快速，准确，简便，自动化，当前很多生物制品公司利用传统微生物检测原理，结合不同的检测方法，设计了形式各异的微生物检测仪器设备，正逐步广泛应用于医学微生物检测和科学研究领域。例如：

4.1 试剂盒，培养基等手段

抗干扰培养基和微生物数量快速检测技术结合解决了传统微生物检测手段不能解决的难题，为建立一套完整的抗干扰微生物检测系统奠定了坚实的基础。如：抗干扰微生物培养基，新型生化鉴定管，微生物计数卡，环境质量检测试剂盒等，可方便的用于多项检测。

4.2 借助新型先进仪器

BACTOMETER全自动各类总菌数及快速细菌检测系统可以数小时内获得监测结果，样本颜色及光学特征都不影响读数，对酵母和霉菌检测同样高度敏感原理是利用电阻抗法(Impedance Technology)将待测样本与培养基置于反应试剂盒内，底部有一对不锈钢电极，测定因微生物生长而产生阻抗改变。如微生物生长时可将培养基中的大分子营养物经代谢转变为活跃小分子，电阻抗法可测试这种微弱变化，从而比传统平板法更快速监测微生物的存在及数量。测定项目包括总生菌数，酵母菌，大肠杆菌群，霉菌，乳酸菌，嗜热菌，革兰氏阴性菌，金黄色葡萄球菌等。

微生物OD值是反映菌体生长状态的一个指标，OD是Optical Density(光密度)的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度。通常400～700 nm 都是微生物测定的范围，需要紫外分光光度计测最大吸收波长。用得最多的是：505 nm测菌丝菌体、560 nm测酵母、600 nm测细菌。用测OD方法画微生物生长曲线时，同一株菌的起始培养浓度可以准备多管(根据检测点的需要，如需检测10个点，就准备10管)，然后每个点取一管出来测OD值就行了。

一般测菌体密度的OD的波长范围是580 nm-660 nm，如枯草芽孢杆菌用600 nm，已经属于可见光区(200 nm～400 nm为紫外光区，400 nm～800 nm为可见光区)。空白如用水做，需要离心洗涤菌体;空白如用不接种的培养基做就不需要洗涤，但是不接种的培养基要和接种的同时培养以求条件一致，最后注意一般OD值在控制在0.1~0.4最好，在这个区内的值就可靠，如果OD大于1.0，一般要稀释后再测，因为OD太大，分光光度计的灵敏度就会显著降低。

一般都测吸光值，而且最好是整个实验过程中，保持发酵液或菌体的稀释倍数一致，吸光值与稀释倍数不一定成正比，可保证整个实验点有可比性。且取值的时候要连续读数，重复3次的数最好。

另，用分光光度计测微生物的OD值为什么要把波长设为600 nm

这个波长其实只是针对浊度，而分光光度计在600 nm处对浊度的反应比较灵敏。测吸收峰的实际意义并不大，比如LB摇瓶培养过夜的大肠杆菌，其实在400多纳米处的吸收最大，但那很可能是培养液的吸收峰。

❻ OD为2的引物怎么稀释

OD为2的引物怎么稀释
在引物单的正面上应数晌该写了： to make 100uM solution ,add xxxul ddH2O,是不昌链是?
我们平时用的是10uM的,所以你把xxx乘以10加进去就好,别忘了薯迅锋引物是粉末结晶,在加入双蒸水稀释前要先13000rpm离心3-5分钟~

❼ 引物合成时nmol为1，OD为0.2，怎么稀释

引物合成时nmol为1，OD为0.2，怎么稀释消灶猛

稀释引物要达到的浓度（pmol/ul）＝母液浓度（pmol/ul）×汲取母液的体积（ul）÷（汲取母液的体积（ul）＋加水量（ul））
引物一般来的时候是干粉.这种状态能储存最长的时间.
如果用的话要先离心,5分钟（12000转）.然后用它上面写的nmol*1000/你的终浓度=你要加的水量
溶解液有TE和dd水.TE其实就是tris盐酸和EDTA的混合液.理论上用TE储存好,不容易降解.
一般配的时候要先配成储存液（浓度是100umol/L）,在配成使用液（浓度是10umol/L）.这样的好处是引物不容易降解.
引物忌讳反复冻溶,大家要注意.如果你都配成了使用液就应该分装.使用液放在4度（2/3个月没问题的）,储存液放在-20度.
引物稀释很简单,一般装引物的管子上都标有引物的量如3.6nmol/OD,可直接往管中加360ul的无菌双蒸水溶解就可以了,在加水之前要先高速离心管子几分钟,加水后要高速漩涡混匀几分钟就可以用了,此时的储存浓度是10umol/L,如果体系是20ul一般加1ul引物(引物辩镇的使用浓度最大为10pmol/ul,但一般在0.5-5pmol/ul即可 ).
引物的浓度设定,不同的人有不同习惯,有的喜欢稀释成100uM的,有的习惯于稀释成20uM,也有的稀释成10uM的.建议稀释成20uM的浓度,因为如果你稀释成100uM,当你所做PCR的体系不是很大的时候,体积太小了引物就不好加,容易产生误差；如果是稀释成10uM,引物浓度过低,容易降解.不过不管你稀释成多大浓度的,最好分装储存,免得反复冻融容易降解.

OD为2的引物怎么稀释

OD为2的引物怎么稀释
在引物单的正面上应该写了： to make 100uM solution ,add xxxul ddH2O,是不是?
我们平时用的是10uM的,所以你把xxx乘以10加进去就好,别忘了引物是粉末结晶,在加入双蒸水稀释前要先13000rpm离心3-5分钟~

100倍的引物稀释怎么稀释成1倍的

取一份需要稀释的母液 加入九十九份稀释剂就可以了

求助 takara合成的引物如何稀释

做PCR吗？看看管子上有多少nmol，然后加对应的ddH20.比如4nmol就加400μl的ddH2O，那么终浓度就是100p

鼎国引物怎么稀释

一般用OD值乘10，单位是ul的纯水或TE溶解成100μM（忘了，也可能是nM）的液体。当然，开盖前要短暂离心，溶解后最好分装下。

生工引物怎么稀释？

你的引物合成报告单上肯定有每OD含有的DNA的量的。一般来说，如果你定的引物是1OD的话，直接加入每OD×10倍的水，就可以得到100uM的DNA溶液。
举个例子，比如你的引物是5nmol/OD的，那么加入50μL的水，可以得到100uM的DNA溶液。

引物稀释时用TE好还是双蒸水好（引物稀释，双蒸

如果需要设计定量PCR引物，可以在微信小程拿桥式搜寻“引物库”，提供30多个植物、动物的定量PCR引物，并且列出了每一对引物所在的外显子，并进行了非特异性扩增的检测（ePCR）

网页连结

列出了引物浓度计算等

引物合成时a和s代表什么?

s: sense 正向引物
a: anti-sense 反向引物

鼎国引物怎样稀释

简单的演算法。比如每管的含量是10nmol，就加100微升TE配成储存溶液，使用的时候再用水稀释10倍，成为工作浓度。PCR时根据情况每50微升反应加1-2微升。

❽ od为1.47稀释多少od为1

您好，要想将OD从1.47稀释为1，需要进行逆向计算，即求出所需的稀释倍明则数。根据比例关系，OD与稀释倍数成反森散比，即OD越大，稀释倍数越小。

首先，计算出OD的比值：1.47/1 = 1.47。这个比值表示需要将样品中的浓度稀释为原来的1/1.47。

然后，将比值转化为稀释倍数。稀释倍数等于1除以比值，即1/1.47 = 0.68（保留两位小数）。

因此，将OD为1.47的样品稀释0.68倍，即可得到OD为1的样品。例如，取1 mL的OD为1.47的样品，加入0.68 mL的稀释液（如纯水），混匀后即可得到OD为1的样品。

需要注意的是，稀释倍数只是一个估算值，具体的稀释倍数还需此槐氏要根据实验条件和目的进行调整。

❾ od为1.0大概要稀释几倍才能在显微镜下看

至少稀释尘知20倍，因为人眼只能分旅行辨出0.1微米的细菌细胞，od为1.0，至少稀派镇消释20倍以上，才可以，以上仅供参考，希望能够帮助到你

❿ 合成的引物该怎么处理，用超纯水还是什么稀释

如果短期内不用，不开管-20度保存就行，开管了，用超纯水稀释就可以，一般按照说明书稀释就行，稀释后-20度保存，我用的-20度保存5年还能用，不过没评价效果降低到什么程度