城镇污水酶底物法

① 酶底物法测定水质粪大肠菌群是国标方法吗

酶底物法测定水质粪大肠菌群是还不是我国现行的国标方法.

但酶底物法科立得回TM(Colilert)试剂检测中粪大肠菌群是ISO9308-2:2012和美答国EPA标准,

我单位是社会检测机构,这两个标准也是可以使用的.

② 酶底物法

大肠埃希氏菌酶底物法 (enzyme substrate technique for escher) 是指在选择性培养基上能产生 β-半乳糖苷酶 (β-D-galactosidase) 分解色原底物释放出色原体培养基呈现颜色变化，并能产生 β-葡萄糖醛酸酶 (β-glucuronidase) 分解荧光底物释放出荧光产物，使菌落能够在紫外光下产生特征性荧光，以此技术来检测大肠埃希氏菌的方法为大肠埃希氏菌酶底物法。

本法可在 24h 判断水样中是否含有的大肠埃希氏菌的最可能数 (MPN) 值。可同时检测总大肠菌群，方法见 82.6.3。

仪器和装置

紫外光灯 6W、波长 366nm 的紫外灯，用于观测荧光反应。

其他仪器同 82.6.3。

培养基与试剂

培养基与试剂同 82.6.3。

检验步骤

检验步骤同 82.6.3。

结果观察与报告

1) 结果判读。结果判读同 82.6.1，对照表82.5 与表82.6。水样变黄色同时有蓝色荧光判断为大肠埃希氏菌阳性，水样未变成黄色而有荧光产生不判定为大肠埃希氏菌阳性。

2) 定性反应。将经过 24h 培养颜色变成黄色的水样在暗处用波长为 366nm 的紫外光灯照射，如果有蓝色荧光产生判断为阳性反应，表示水中含有大肠埃希氏菌。水样未产生蓝色荧光判断为阴性反应。结果以大肠埃希氏菌检出或未检出报告。

a.10 管法。将培养 24h 颜色变成黄色的水样的试管在暗处用波长为 366nm 的紫外光灯照射，如果有蓝色荧光产生则表示有大肠埃希氏菌存在。

计算有荧光反应的试管数，对照表82.4 查出其代表的大肠希氏菌最可能数。结果以MPN /100mL 表示。如所有管未产生荧光，则可报告为大肠埃希氏菌未检出。

b.51 孔定量盘法。将培养 24h 颜色变成黄色的水样的定量盘在暗处用波长为 366nm的紫外光灯照射，如果有蓝色的荧光产生则表示该定量盘穴中含有大肠埃希氏菌。

计算有荧光反应的孔穴数，对照表82.5 查出其代表的大肠埃希氏菌最可能数。结果以 MPN/100mL 表示。如所有孔未产生荧光，则可报告为大肠埃希氏菌未检出。

③ 酶底物法总大肠菌群超过24小时结果有影响吗

mpn
为最大可能数(most
probable
number)的简称。这种方法，对样品进行连续系列进行稀释，加入培养基进行培养，从规定的反应呈阳性管数的出现率，用概率论来推算样品中菌数最近似的数值。

④ 粪大肠菌群检测为什么不能用酶底物法

请参考：
http://wenku..com/link?url=jdeu85jJFDFu2kROJdmQk2Y-RZ9ZvSooIK_pqzFCeULgv2ACjqkaMFLV-7uLq__tk8n84z-4m

⑤ 粪大肠菌群固定底物酶底物法需要无菌环境操作吗

如果使用酶底物法检测水中的大肠菌群， 是可以在一般洁净环境中操作的 因为：1.粪大肠菌群不易在空气中传播 2.酶底物法检测操作步骤少 时间短 不易污染！5.12汶川地震和雅安地震中帐篷实验室使用很多，在ISO和EPA中对酶底物法科立得（Colilert )无需无菌室有详细的说明和验证，上海环监也有对“HJ酶底物法的行标”征求意见稿说明和验证了在一般洁净环境中酶底物法数据不影响，我们公司是社会检测机构，在今年使用酶底物法科立得（Colilert )顺利扩项成功4项微生物检测，提供的就是是以上资料，供参考！

⑥ 粪大肠菌群的测定可以使用针头过滤器吗

最新有标准的:CJ/T-2018 城镇污水水质标准检测方法 中有新增酶底物法检测粪大肠菌群

⑦ 水中粪大肠菌群的测定

化妆品检测项目中粪大肠菌群的检测流程：
10g/mL样品+90mL灭菌生理盐水 →10mL+10mL双倍乳糖胆（含中和剂）培养基→粪大肠菌群 44.5℃，48h培养
注：在化妆品检测项目中，如果样品含有油脂性的成分，如精油，在样品前处理中需加入液体石蜡、吐温80、生理盐水进行均质，使样品能够均匀分散开来。
粪大肠菌群又是一个什么样的微生物呢？下面我们来详细介绍下：
大肠菌群：大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。
定义（GB2010）：在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。
粪大肠菌群：大肠菌群的一种，又称耐热大肠菌群，培养温度：44.5±0.5℃，粪大肠菌群是化妆品检测项目中必检的微生物项目。
大肠埃希氏菌：（(Escherichia. coli )通常称为大肠杆菌。根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为5类：
致病性大肠杆菌(EPEC)、
肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、
肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、
肠出血性大肠杆菌(EHEC)、
肠黏附性大肠杆菌(EAEC)。
您可能感兴趣的检测服务：

⑧ 水中微生物检测，酶底物法好还是滤膜法好

酶底物法要好很多。ISO国际标准上规定，滤膜法仅适用于干净水体，酶底物法适用于所有水体。而且由于方法本身限制，滤膜法结果一般偏低

⑨ 酶底物法

总大肠菌群酶底物法()是指在选择性培养基上能产生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)的细菌群组，该细菌群组能分解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化，以此技术来检测水中大肠菌群的方法。

本法可在24h判断水样中是否含有总大肠菌群及含有的总大肠菌群的最可能数(MPN)。

可同时检测大肠埃希氏菌，见大肠埃希氏菌检测。

仪器和装置

量筒100mL、500mL、1000mL。

吸管1mL、5mL及10mL的无菌玻璃吸管或塑料一次性吸管。

稀释瓶100mL、250mL、500mL及1000mL能耐高压的灭菌玻璃瓶。

试管可高压灭菌的玻璃或塑料试管，大小约15mm×10cm。

培养箱(36±1)℃。

高压蒸汽灭菌器。

干热灭菌器(烤箱)。

定量盘定量培养用无菌塑料盘，含51个孔穴，每一孔穴可容纳2mL水样。

程控定量封口机用于51孔或97孔法(MPN法，最可能数法)定量盘的封口。

培养基与试剂

1)培养基。在此酶底物法采用固定底物技术(ddfinedsubstratetechnology，DST)，本方法采用Mini-malMdeiumONPG-MUG(MMO-MUG)培养基，可选用市售商品化制品。

每1000mLMMO-MUG培养基所含基本成分为:硫酸铵［(NH₄)₂SO₄］5.0g，硫酸锰(MnSO₄)0.5mg，硫酸锌(ZnSO₄)0.5mg，硫酸镁(MgSO₄)100mg，氯化钠(NaCl)10g，氯化钙(CaCl₂)50g，亚硫酸钠(Na₂SO₃)40mg，两性霉素B(AmphotericinB)1mg，邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷(ONPG)500mg，4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷(MUG)75mg，茄属植物萃取物(Solanium萃取物)500mg，N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸钠盐(HEPES钠盐)5.3g，N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸(HEPES)6.9g。

2)试剂

生理盐水(8.5g/L)用于稀释水样。称取8.5gNaCl，加蒸馏水至1000mL溶解后，分装到稀释瓶内，每瓶90mL，103.43kPa(121℃)20min高压灭菌。

检验步骤

1)水样稀释。检测所需水样为100mL。若水样污染严重，可对水样进行稀释。取10mL水样加入到90mL灭菌生理盐水中，必要时可加大稀释度。

2)定性反应。用100mL无菌稀释瓶量取100mL水样，加入(2.7±0.5)gMMO-MUG培养基粉末，混摇均匀使之完全溶解后，放入(36±1)℃培养箱内培养24h。

a.10管法。用100mL无菌稀释瓶量取100mL水样，加(2.7±0.5)gMMO-MUG培养基粉末，混摇均匀使之完全溶解。准备10支15mm×10cm或适当大小的灭菌试管，用无菌吸管分别从前述稀释瓶中吸取10mL水样各试管中，放入(36±1)℃培养箱内培养24h。

b.51孔定量盘法。用100mL无菌稀释瓶量取100mL水样，加入(2.7±0.5)gMMO-MUG培养基粉末，混摇均匀使之完全溶解。将前述100mL水样全部倒入51孔无菌定量盘内，以手抚平定量盘背面以赶除孔穴内气泡，然后用程控定量封口，放入(36±1)℃的培养箱内培养24h。

结果报告

1)结果判读。将水样培养24h后进行结果判读。如果结果为可疑阳性，可延长培养时间到28h进行结果判读，超过28h之后出现的颜色反应不作为阳性结果。

2)定性反应。水样经24h培养之后如果颜色变成黄色，判断为阳性反应，表示水中含有总大肠菌群。水样颜色未发生变化，判断为阴性反应。定性反应结果以总大肠菌群检出或未检出报告。

a.10管法。将培养24h之后取出试管观察，如果试管内水样变成黄色则表示该试管含有总大肠菌群。

计算有黄色反应的试管数，对照表82.5查出其代表的总大肠菌群最可能数(MPN)。结果以MPN/100mL表示。如所有管未产生黄色，则可报告为总大肠菌群未检出。

表82.5 10管法不同阳性结果的最可能数(MPN)及95%可信范围

b.51孔定量盘法。将培养24h之后的定量盘取出观察，如果孔穴内的水样变成黄色则表示该孔穴中含有总大肠菌群。

计算有黄色反应的孔穴数，对照表82.6查出代表的总大肠菌群最可能数(MPN)。结果以MPN/100mL表示。如所有孔未产生黄色，则可报告为总大肠菌群未检出。

表82.6 51孔定量盘法不同阳性结果的最可能数(MPN)及95%可信范围

续表

续表

⑩ 我单位要买酶底物法检测试剂，哪个好。

我们单位才买了不久，我比较了解可以帮你分析一下。我们单位购买的是来自美国爱德士公司的，很好用我们很多兄弟单位都的这个很不错，很稳定。