⑴ 1%邻苯三酚溶液怎么配置
1g邻苯三酚溶于蒸馏水中,定容至100ml,邻苯三酚易氧化,白色有光泽结晶体,无味,在露光的空气中变成淡灰色,溶液易氧化为淡黄色,最好现配先用。 一般来说,可以贮存一周左右,在棕色瓶中时间会稍长一些。
⑵ 邻苯三酚用少量10mmol/L溶解,然后用水还是盐酸定容呀
盐酸定容好一些
⑶ 跪求!!!邻苯三酚如何溶解
清楚呢,卡梅隆啊,我非常保证有``
⑷ 邻苯三酚自氧化法存在哪些问题
SOD的活力测定方法很多,常见的有化学法、免疫法和等电点聚焦法。其中化学法应用最普遍,化学法的原理主要是利用有些化合物在自氧化过程中会产生有色中间物和O2 -,利用SOD分解而间接推算酶活力。
在化学方法中,最常用的有黄嘌呤氧化酶法,邻苯三酚法,化学发光法,肾上腺素法,NBT-还原法,光化学扩增法,Cyte还原法等。其中改良的邻苯三酚自氧化法简单易行较为实用。化学发光法和光化学扩增法不适用于测定Mn-SOD,但对于Cu/Zn-SOD反应极灵敏。Cyte还原法用于Mn-SOD活力测定结果稳定,重复性好。
但专一性和灵敏度不够理想,而且需要特殊仪器,实际应用受到限制。亚硝酸盐形成法与CN—抑制剂或SDS处理相结合,应用于Mn-SOD测定,灵敏度比Cyte还原法提高数倍,而且专一性强,重复性好,操作方便,不需要特殊仪器和设备,易于实际应用和推广,是目前较好的测定方法之一 。
⑸ 邻苯三酚与间苯三酚的区别
羟基的位置不同
⑹ 25mmol/L邻苯三酚溶液怎么配制
【】先确定配制的体积=1升;
【】计算 25mmol/L邻苯三酚 的质量 m=25M/1000
【】可以用少量水溶解,在稀释到1000ml,混匀。
⑺ 用邻苯三酚自氧化法时,如果自氧化速率超过0.06-0.08OD/min的话,有什么影响;谢谢
[原理]
SOD的活力测定方法很多,常见的有化学法、免疫法和等电点聚焦法。其中化学法应用最普遍,化学法的原理主要是利用有些化合物在自氧化过程中会产生有色中间物和O2 -,利用SOD分解而间接推算酶活力。在化学方法中,最常用的有黄嘌呤氧化酶法,邻苯三酚法,化学发光法,肾上腺素法,NBT-还原法,光化学扩增法,Cyte还原法等。其中改良的邻苯三酚自氧化法简单易行较为实用。化学发光法和光化学扩增法不适用于测定Mn-SOD,但对于Cu/Zn-SOD反应极灵敏。Cyte还原法用于Mn-SOD活力测定结果稳定,重复性好。但专一性和灵敏度不够理想,而且需要特殊仪器,实际应用受到限制。亚硝酸盐形成法与CN—抑制剂或SDS处理相结合,应用于Mn-SOD测定,灵敏度比Cyte还原法提高数倍,而且专一性强,重复性好,操作方便,不需要特殊仪器和设备,易于实际应用和推广,是目前较好的测定方法之一。
在一般情况下,SOD酶活性测定只能应用间接活性测定法。本实验采用邻苯三酚自氧化方法。
邻苯三酚在碱性条件下,能迅速自氧化,释放出O2 -,生成带色的中间产物,反应开始后反应液先变成黄棕色,几分钟后转绿,几小时后又转变成黄色,这是因为生成的中间物不断氧化的结果。这里测定的是邻苯三酚自氧化过程中的初始阶段,中间物的积累在滞留30~45s后,与时间成线性关系,一般线性时间维持在4min的范围内,中间物在420nm波长出有强烈光吸收。当有SOD存在时,由于它能催化O2 -与H+结合生成O2和H2O2,从而阻止了中间产物的积累,因此,通过计算即可求出SOD的酶活性。
酶活力单位定义:在25℃恒温条件下,每毫升反应液中,每分钟抑制邻苯酚自氧化率达50%的酶量定义为1个酶活力单位。
[试剂和器材]
1、试剂
(1)pH8.2、50mmol/L Tris-HCl
称取Tris 0.61g,EDTA-2Na 0.037g,用双蒸水溶解至80mL左右,用HCl调节pH =8.20(用pH计校正),最后定容至100mL。
(2)10mmol/L HCl
(3)50 mmol/L邻苯三酚
称取邻苯三酚0.063g,用10mmol/L HCl溶液溶解,定容至10mL,避光保存。
(4)SOD样液
2、器材
(1)恒温水浴槽
(2)紫外分光光度计
(3)试管、刻度吸管、微量注射器
[方法和步骤]
1、邻苯三酚自氧化速率的测定
取两支试管按下表加入25℃预热过的缓冲液,然后加入预热过的邻苯三酚(空白管用10mmol/L HCl代替邻苯三酚 ),迅速摇匀,立即倾入1cm比色杯中,在325nm波长处测定光吸收值,每隔30s读数一次,测定4min内每分钟光吸收值的变化。要求自氧化速率控制在每分钟的光吸收值为0.07(可增减邻苯三酚的加入量,以控制光吸收值)。
试剂 空白管(mL) 自氧化管(mL)
pH8.2、50mmol/L
Tris-HCl 2.98 2.98
10mmol/L HCl 0.02 0.01
50 mmol/L邻苯三酚 - 0.01
2、SOD样液的活性测定
样品管取代自氧化管。样品管测定时先加入预热的待测酶液,再加邻苯三酚。其余步骤同邻苯三酚自氧化速率的测定。
试剂 空白管(mL) 样品管(mL)
pH8.2、50mmol/L
Tris-HCl 2.98 2.98
10mmol/L HCl 0.02 -
SOD样液 - 0.01
50 mmol/L邻苯三酚 - 0.01
(3)计算
参考资料:http://bbioo.com/bio101/2006/8158.htm
⑻ 关于苯酚的问题
苯酚在空气中久置会变为粉红色,是因为生成了苯醌。
苯酚的氧化产物一般是对苯醌。这个反应也可以用Br2作氧化剂。
1,4-苯醌(常称为对苯醌)是一种有机化合物,分子式为C6H4O2。纯的对苯醌为亮黄色晶体,带有与氯气相似的刺激性气味;不纯的样品常常由于醌氢醌(对苯醌与氢醌所形成的1:1电荷转移络合物)的存在而颜色黯淡。对苯醌含有非芳香性的六元环,它是氢醌(对苯二酚)的氧化产物。[1]这个分子反映出多种反应性:它既表现出酮的性质(可以形成肟),又可以表现出氧化性(还原产物为氢醌),还表现出烯的性质(可以发生加成反应,尤其是α,β-不饱和酮的典型反应。对苯醌在强的无机酸或强碱存在下都不稳定,发生缩聚与分解等反应。
1,2-苯醌(常称为邻苯醌)是一种红色固体,无色无味,不易挥发,可以在苯、乙醚、丙酮溶解。
还有一个水
⑼ SOD酶的活力的测定
SOD酶的活力的测定方法如下:
1.直接法 原理是根据O2 或产生O2 的物质本身的性质测定O2 的歧化量,从而确定SOD的活性。经典的直接法包括:脉冲辐射分解法、电子顺磁共振波法(EPR)、核磁共振法。由于所需的仪器设备价格昂贵,一般较少应用。
2.一般化学法 这些方法的共同特点是要有一个O2 的产生体系和一个被O2 还原或氧化的可检测体系。在SOD存在下,一部分O2 被SOD歧化,因而O2 还原或氧化检测体系的反应受到抑制。根据反应受抑制程度,测定SOD的活性。一般化学法有邻苯三酚自氧化法、细胞色素C还原法、羟胺法、黄嘌呤氧化酶-NBT法、肾上腺素法、没食子酸法、6-羟多巴胺法、亚硝酸盐形成法和碱性二甲亚砜法。