目前所有的高压灭菌器都要求工作时使用蒸馏水或纯水,因为蒸馏水具有纯净、无杂质、无离子,不会产生水垢等特性。
苏州海思源
实验室纯水机
② 凯驰高压高温清洗机为什么不能用蒸馏水
多名消费者反映,这款“蒸汽清洁机”对较顽固的油渍清洗数次仍不能清洁干净,使用中还出现漏汽、开关失灵、喷头断裂、指示灯不亮、手柄烫手等问题。还有的消费者质疑使用安全问题,消费者称:“拿到产品后才发现蒸汽清洁机温度高、气压大,但产品上
③ 为什么高压灭菌器必须使用纯水或蒸馏水
因为蒸馏水具有纯净,无杂质,无离子,不会产生水垢等特性.如果灭菌器不使用蒸馏水,会对机器造成内损伤.如细管容路堵塞,干燥后在手机表面形成水垢,水斑,并沉积在灭菌器内的蒸汽传感器,温度传感器表面上,使传感器工作失常,影响灭菌器的正常使用,所以使用纯净的蒸馏水很重要。
按照国际标准,灭菌器使用的纯净水的电导率不要超过15us/cm
④ 蒸馏水怎样提取
蒸馏水的制取非常简单,家里如果有高压锅的话,可以轻松取得,
方法是:高压版锅里装入水,要根据权锅的容量和你需要的数量来确定谁的假如量。然后将锅放到炉子上,点火,要点是在安全伐处安装一条能够耐温的塑料管子,塑料管的材质最好是聚酯的,长度可以大于1米,这样水开锅以后,蒸汽通过塑料管输出。由于管道温度低,蒸汽冷凝就变成蒸馏水了。我的回答你是否满意,你不妨试试/
⑤ 我用高压锅接塑料管自制的蒸馏水,一次蒸馏的电阻值1.5兆欧,二次蒸馏的电阻值才1.68兆欧,
应该有问题的!去买一瓶也没有多少钱啊!
⑥ 酵母醋酸锂转化不用鲑鱼精dna可以吗
酵母醋酸锂转化不用鲑鱼精dna可以
1、毕氏酵母氯化锂转化法
(1)试剂 1M LiCl(用去离子蒸馏水配制,滤膜过滤除菌;必要时用消毒去离子水稀释) 50% PEG3350(Sigma P3640 用去离子蒸馏水配制,滤膜过滤除菌,用较紧的盖子的瓶子分装) 2mg/ml salmon sperm DNA / TE(10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA)-20℃保存 注:醋酸锂对毕氏酵母无效,仅氯化锂有效;PEG3350可屏蔽高浓度LiCl的毒害作用;
(2)感受态毕氏酵母的制备 接种Pachia pastoris到50ml YPD培养基中,30℃摇菌过夜(约24~28h)培养到OD值为0.8~1.0(约108 Cells/ml); 收获细胞,用25ml无菌水洗涤一次,室温下1500g离心10min; 重悬细胞于1ml 100mM LiCl溶液中,将悬液转入1.5ml离心管; 离心机最大速度离心15秒沉淀菌体,重悬菌体于400ul 100mM LiCl溶液中; 按50ul/管分装,立即进行转化; 注:不要将感受态酵母菌冰浴;
(3)毕氏酵母的转化 煮沸1ml鲑鱼精DNA 5min,迅速冰浴以制备单链担体DNA; 将感受态酵母菌离心,以Tips去除残余的LiCl溶液; 对于每一个转化,按以下顺序加入: 50% PEG3350 240ul 1M LiCl 36ul 2mg/ml 单链Salmon sperm DNA 25ul 5~10ug/50ul H2O 质粒DNA 50ul 剧烈旋涡混匀直至沉淀菌体完全分布均匀(约1min); 30℃水浴孵育30min; 42℃水浴热休克20~25min; 6000~8000rpm离心收集酵母菌体; 重悬酵母于1ml YPD培养基,30℃摇床孵育; 1~4h后,取25~100ul菌液铺选择性培养基平板,于30℃培养2~3天鉴定;
2、毕氏酵母PEG1000转化法
(1)试剂 缓冲液A:1.0M Sorbitol,10mM Bicine,pH8.35(sigma),3%(v/v)ethylene glycol 缓冲液B:40%(w/v)PEG1000(sigma),0.2M Bicine,pH8.35 缓冲液C:0.15M NaCl,10mM Bicine,pH8.35 未污染的新鲜、试剂级DMSO,-70℃保存 注: 缓冲液A、B、C均用滤膜过滤,-20℃保存; 将DNA直接加在冻结的酵母细胞上是本实验的关键之处(即使在冰上解冻的待转化细胞,其摄取外源DNA的能力也在解冻过程中迅速下降;如进行多样品的转化,建议按6样品/组进行);
(2)待转化毕氏酵母的制备 接种环接种Pachia pastoris于YPD平板,30℃培养2d; 挑取单克隆酵母菌株于10mlYPD培养基中,30℃振荡培养过夜; 取步骤2中小量菌液接种到100mlYPD培养基中振荡培养,待其OD值从0.1升到0.5~0.8; 室温下3000g离心收集酵母菌体,50ml缓冲液A洗涤一次; 重悬菌体于4ml缓冲液A中,按0.2ml/管分装于1.5ml的离心管中,每管加入11ulDMSO,混合后迅速于液氮中冷冻, -70℃保存
(3)毕氏酵母的转化 将约50ug线性化质粒DNA溶于20ul TE或水中,直接加于冻结的酵母细胞中;加入担体DNA(40ug变性超声线性化鲑鱼精DNA)以获得最大转化率; 37℃水浴孵育5min,中间混合样品1~2次; 取出离心管,加入1.5ml缓冲液B,彻底混匀; 30℃水浴孵育1h; 室温下2000g离心10min,去除上清液,菌体沉淀重悬于1.5ml缓冲液C中; 离心样品,去除上清液,轻微操作将样品重悬于0.2ml缓冲液C中; 将所有转化液铺于选择性平板,于30℃孵育3~4天后,鉴定;
⑦ 高压灭菌器必须使用纯水或蒸馏水的原因
因为普通的自来水或矿泉水是含有金属离子杂质等物质的,这些东西会使灭菌器的药水发生反应而使其效力减弱,而纯水却不会~呵呵~我是猜的~但我想也就能是这个原因了~
⑧ 醋酸锂转化法te的ph过高有什么影响
酵母转化试剂盒peg文名意思
1、毕氏酵母氯化锂转化
(1)试剂 1M LiCl(用离蒸馏水配制滤膜滤除菌;必要用消毒离水稀释) 50% PEG3350(Sigma P3640 用离蒸馏水配制滤膜滤除菌用较紧盖瓶装) 2mg/ml salmon sperm DNA / TE(10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA)-20℃保存 注:醋酸锂毕氏酵母效仅氯化锂效;PEG3350屏蔽高浓度LiCl毒害作用;
(2)受态毕氏酵母制备 接种Pachia pastoris50ml YPD培养基30℃摇菌夜(约24~28h)培养OD值0.8~1.0(约108 Cells/ml); 收获细胞用25ml菌水洗涤室温1500g离10min; 重悬细胞于1ml 100mM LiCl溶液悬液转入1.5ml离管; 离机速度离15秒沉淀菌体重悬菌体于400ul 100mM LiCl溶液; 按50ul/管装立即进行转化; 注:要受态酵母菌冰浴;
(3)毕氏酵母转化 煮沸1ml鲑鱼精DNA 5min迅速冰浴制备单链担体DNA; 受态酵母菌离Tips除残余LiCl溶液; 于每转化按顺序加入: 50% PEG3350 240ul 1M LiCl 36ul 2mg/ml 单链Salmon sperm DNA 25ul 5~10ug/50ul H2O 质粒DNA 50ul 剧烈旋涡混匀直至沉淀菌体完全布均匀(约1min); 30℃水浴孵育30min; 42℃水浴热休克20~25min; 6000~8000rpm离收集酵母菌体; 重悬酵母于1ml YPD培养基30℃摇床孵育; 1~4h取25~100ul菌液铺选择性培养基平板于30℃培养2~3鉴定;
2、毕氏酵母PEG1000转化
(1)试剂 缓冲液A:1.0M Sorbitol10mM BicinepH8.35(sigma),3%(v/v)ethylene glycol 缓冲液B:40%(w/v)PEG1000(sigma)0.2M BicinepH8.35 缓冲液C:0.15M NaCl10mM BicinepH8.35 未污染新鲜、试剂级DMSO-70℃保存 注: 缓冲液A、B、C均用滤膜滤-20℃保存; DNA直接加冻结酵母细胞本实验关键处(即使冰解冻待转化细胞其摄取外源DNA能力解冻程迅速降;进行品转化建议按6品/组进行);
(2)待转化毕氏酵母制备 接种环接种Pachia pastoris于YPD平板30℃培养2d; 挑取单克隆酵母菌株于10mlYPD培养基30℃振荡培养夜; 取步骤2量菌液接种100mlYPD培养基振荡培养待其OD值0.1升0.5~0.8; 室温3000g离收集酵母菌体50ml缓冲液A洗涤; 重悬菌体于4ml缓冲液A按0.2ml/管装于1.5ml离管每管加入11ulDMSO混合迅速于液氮冷冻 -70℃保存
(3)毕氏酵母转化 约50ug线性化质粒DNA溶于20ul TE或水直接加于冻结酵母细胞;加入担体DNA(40ug变性超声线性化鲑鱼精DNA)获转化率; 37℃水浴孵育5min间混合品1~2; 取离管加入1.5ml缓冲液B彻底混匀; 30℃水浴孵育1h; 室温2000g离10min除清液菌体沉淀重悬于1.5ml缓冲液C; 离品除清液轻微操作品重悬于0.2ml缓冲液C; 所转化液铺于选择性平板于30℃孵育3~4鉴定;
3、毕氏酵母电转化
(1)E.coli TOP10F’受态细胞制备 取10ul TOP10F’菌液接种于200ml LB液体培养基化培养37℃200 rpm16~18取100ul菌液接种于200ml液体LB培养基 37℃200 rpm培养16~18 灭菌500 ml离管4℃4000 rpm20 min菌体沉淀弃清菌体用10%甘油重悬并洗涤重复洗涤3 第三离弃绝部清留约1ml 液体用于重悬菌体 制受态细胞取200ul于灭菌EP管加入连接反应产物5ul混匀要产气泡冰放置5min 混匀200ul菌液移入电击杯 使用电击穿孔仪进行转化设置电压 2500 V间 5 ms 电击往电击杯加入 800ul SOC培养基冲洗菌体转移至灭菌1.5 ml EP管37℃150 rpm 轻摇45~60 min 取全部均匀涂布于含 Zeocin 25 ug/ml LLB-Zeocin平板放待涂布液流37℃ 培养12~16
(2)线性化质粒DNAPichia pastorisGS115转化 取新鲜制备(或-70℃冻存)受态细胞置于冰浴使其完全解冻;
1)100μl菌体移至新菌Eppendorf管加入5-20μg线性化质粒(5~10μl)轻弹混匀尽数吸转移0.2cm型电穿孔转化杯;
2) 转化杯置于冰浴5~10钟保持低温
3) 电穿孔转化电击条件:电压:1500V;电阻:400Ω;电容:25μF;脉冲间:10mS;电击
4) 电击马电击转化杯加入1ml 4℃预冷1M山梨醇溶液用微量移液枪吹打均匀置于冰浴; 5) 取30℃烘至表面半干MD培养基平板超净工作台菌操作涂布平板400μl/板
感觉提问主意不是很清晰
建议查下资料哦
⑨ 高压灭菌锅能灭蒸馏水吗
可以,100KPA状态15分钟
⑩ 如何制出蒸馏水
实验室中制备蒸馏水,多采用石英管加热的硬质玻璃蒸馏水器,蒸馏时不能用自来水,因为会产生水垢,最好用无离子水作为水源。如欲除去有机物,可在蒸馏水器中每升水加1g高锰酸钾和1mL 85%的磷酸,以便通过氧化除去有机物。不含金属离子的水,需用亚沸蒸馏水,即用石英亚沸蒸馏器进行蒸馏,其特点是在液面上方加热,但水并不沸腾,只是液面处于亚沸状态,可将水蒸气带出的杂质减至最低,但制水量较小,每小时约1~4升。
●无氨蒸馏水制备方法:
方法1:给普通蒸馏水中加硫酸调至pH<2,使水中各种形态的氨或胺最终都变成不挥发的盐类,用附有缓冲球的蒸馏器进行蒸馏,收集馏出液即可。
方法2:每升普通蒸馏水中加25ml5%的氢氧化钠溶液再煮沸1h即可获得。
在收集和存贮无氨水过程中注意避免实验室内空气中存在的氨的二次污染。
●无二氧化碳蒸馏水的制备方法:
煮沸法:将普通蒸馏水或去离子水煮沸至少10min(水多时),或使水蒸发量达10%以上(水少时),加盖冷却。
暴气法:将惰性气体或纯氮气通入蒸馏水或去离子水中至饱和即得。
制得的无二氧化碳水应贮于以附有碱石灰管的橡皮塞盖严的瓶中。
●无酚蒸馏水的制备方法:
加碱蒸馏法:在普通蒸馏水中加氢氧化钠调节至pH>11,使水中酚生成不挥发的酚钠,用附有缓冲球的蒸馏器进行蒸馏,收集馏出液即可。也可同时往普通蒸馏水中加入少量的高锰酸钾溶液使水呈现红色,再进行蒸馏。
活性炭吸附法:将粒状活性炭加热至150--170℃,烘烤2h以上进行活化,放入干燥器中冷却至室温后,装入预先盛有少量水(避免炭粒间留存气泡)的层吸柱中,使蒸馏水或去离子水缓缓通过柱床(一般以每分钟不超过100ml为宜),开始流出的水须再次返回柱中,然后正式收集。此柱所能净化的水量,约为所用炭粒表观容积的1000倍