❶ 求免疫荧光DHE染色具体步骤和细胞流式的具体步骤
细胞免疫荧光的详细操作步骤1，取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里，PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小，因此夹取的时候要小心。2，4%多聚甲醛固定20分钟，PBS洗三遍。3，0.2%TritonX100通透10分钟，PBS洗三遍。4，与二抗相同宿主的血清封闭30分钟，PBS洗三遍。5.，一抗4度湿盒内过夜，也可37度2小时，感觉前者效果好，PBS洗三遍。6，二抗室温2小时，或者37度1半小时，PBS洗三遍。7，最好用DAPI染核，然后直接照荧光片。8，蒸馏水洗掉PBS，甘油封片，指甲油封片子的四周。
❷ 涂片为什么要用蒸馏水的缓冲水冲洗
缓水流：防止把已经解离的烘干的细胞冲跑 冲洗：把解离液洗掉，因为其主要成分是盐酸，呈酸性，而用来染色的二苯胺或甲基绿呈碱性，会中和，影响染色效果
❸ 细胞he染色时没有用到二甲苯为什么还要用酒精脱水
染色流程(1)二甲苯（Ⅰ） 15min (2) 二甲苯（Ⅱ） 15 min (3)100%乙醇（Ⅰ） 5min (4)100%乙醇（Ⅱ） 5 min (5)80%乙醇 5min (6)蒸馏水 5 min (7)苏木精液染色 5 min (8 ) 流水稍洗去苏木精液 1-3 s (9) 1%盐酸乙醇 1-3 s (10) 稍水洗 10-30 s (13)蒸馏水过洗 1-2 s (14) 0.5%伊红液染色 1-3 min (15) 蒸馏水稍洗 1-2 s (16) 80%乙醇稍洗 1-2 s (17) 95%乙醇（Ⅰ） 2-3 s (18) 95%乙醇（Ⅱ） 3-5 s (19) 无水乙醇 5-10 min (20) 石炭酸二甲苯 5-10 min (21) 二甲苯（Ⅰ） 2 min (22) 二甲苯（Ⅱ） 2 min (23) 二甲苯（Ⅲ） 2 min (24) 中性树胶封固 注：①第（10）、（11）步可省去,（12）步冲水时间需延长至20-30min.②第（20）步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇.* 冷冻切片HE染色步骤：（1）冰冻切片固定 10～30 s （2）稍水洗 2 s （3）苏木精液染色（60℃） 30～60 s （4）流水洗去苏木精液 10 s （5）1%盐酸乙醇 3 s （6）稍水洗 2 s （7）促蓝液返蓝 10 s （8）流水冲洗 15～30 s （9）0.5%曙红液染色 30～60 s （10）蒸馏水稍洗 2 s （11）80%乙醇 2 s （12）95%乙醇 2 s （13）无水乙醇 2 s （14）石炭酸二甲苯 3 s （15）二甲苯（Ⅰ） 3 s （16）二甲苯（Ⅱ） 3 s （17）中性树胶封固.注：第（14）步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇.染色结果：细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色.4．12 切片脱水透明 切片经HE染色后,要彻底脱水透明,才能用中性树胶封盖.如果脱水不彻底,封片后呈白色雾状,镜下观察模糊不清,且容易褪色.切片1-2级无水乙醇脱水,也可使用石碳酸二甲苯进行脱水.石碳酸有较强脱水能力,但长时间可使切片脱色,因此要经过多次二甲苯以使石碳酸完全除去.
❹ 既然洗涤剂是瓦解细胞膜，那为什么在鸡血细胞的时候不用洗涤剂，那或者植物细胞在研磨之后不用蒸馏水
鸡血细胞吸水可以涨破，非常方便，没有必要用洗涤剂。植物细胞有细胞壁，吸水不会涨破，所以加洗涤剂，目的就是瓦解细胞膜。
❺ 观察DNA和RNA在细胞中的分布实验时，为什么用蒸馏水冲洗载玻片为什么要冲洗图片
冲洗之前不是滴上甲基绿和吡咯红药水了么，将玻片外面的多余药水冲洗掉。 烘干是要将细胞固定在玻片上，起到稳固的作用。
❻ 蒸馏水冲洗涂片的目的
解、在实验步骤中，水解用的试剂是盐酸，水解之后进行冲洗，然后再进行染色，所以冲洗的目的是去除盐酸，防止对实验结果的干扰．
故选：B．
❼ “观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中，冲洗涂片时为什么用蒸馏水缓水流冲洗
是为了冲洗掉盐酸防止盐酸影响观察效果，是因为染色剂是碱性染色剂会与盐酸中和
❽ 为什么要烘干载玻片为什么要用蒸馏水冲洗细胞不是肯定会被冲走吗
可能你仪器中存在一些有机物没有除去,可能是原先实验的残留物,新仪器的话应该是你没有除油导致的,可以先蒸馏乙醇一次烘干后再蒸馏水,或者蒸馏水多做几次就可以了
❾ 请问台盼蓝染色（区分死细胞与活细胞）和结晶紫染色的染液的配制方法以及染色的步骤是怎么样的谢谢！
一. 台盼蓝配制：4％台盼蓝母液：称取4克台盼蓝，加入少量蒸馏水研磨，加0.9%NaCl至100毫升，用滤纸过滤，4℃保存。或者直接用0.9%的生理盐水或者PBS配成母液 用的时候用生理盐水或者PBS稀释 。
台盼蓝染色步骤：
1.、4%台盼蓝母液：称取4g台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，加双蒸水至100ml，用滤纸过滤，4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。（也可买Gibco的成品）; T
2、胰酶消化贴壁细胞，制备单细胞悬液，并作适当稀释。
3、染色：细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。（终浓度0.04%）
4、计数：在三分钟内，分别计数活细胞和死细胞。
5、镜下观察，死细胞被染成明显的蓝色，而活细胞拒染呈无色透明状。
6、统计细胞活力：活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100%
二. 结晶紫配制：
结晶紫 2.0g
草酸铵 0.8g
95％酒精 20ml
馏水 80ml
先将结晶紫溶于酒精，草酸铵溶于蒸馏水中，然后将两液混合，静置48小时使用。此染液稳定，置密闭的棕色瓶中可储存数月。
结晶紫染色步骤：
1．在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104～10×4 WEHI-164细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1640培养液），37℃ 5％ CO2的二氧化碳培养箱中培养2～3小时，让细胞帖壁。
2．用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品，根据需要3～5倍递次稀释待检样品，每孔加0.1ml稀释的标准品或待检样品，每个稀释度3个重复孔。对照孔6个，3个阳性对照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培养液，3个阴性对照孔各加100μl RPMI-1640培养液。继续培养18～24小时。
3．甩去培养液，用PBS小心洗涤一次，每孔加0.1ml 10％甲醇溶液固定细胞30秒钟。
4．吸去甲醇溶液，每孔加0.1ml结晶紫染液，室温中放置20分钟。
5．轻轻甩去染色液，用蒸馏水洗涤各孔，将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室温中长期保存。
6．测定前，每孔加0.1ml 33％醋酸脱色，充分振荡后在570nm处测定光吸收度。用光吸收度（OD）值对样品稀释度作图，比较标准品曲线和待检样品曲线即可得到待测样品中的细胞因子活性