⑴ 合成的引物該怎麼處理,用超純水還是什麼稀釋
如果短期內不用,不開管-20度保存就行,開管了,用超純水稀釋就可以,一般按照說明書稀釋就行,稀釋後-20度保存,我用的-20度保存5年還能用,不過沒評價效果降低到什麼程度
⑵ 合成的引物該怎麼處理,用超純水還是什麼稀釋
12000rpm離心1min後加入ddH2O,渦旋震盪1min後瞬時離心甩一下即可。加水量根據你需要的濃度確定。比如引物管上是4nmol,那麼加入400μl水,濃度就是100p
⑶ 酶切後直接用乙醇沉澱,然後用滅菌超純水溶解後直接做連接會有影響嗎
不太好,如果只做沉澱,沒有酚氯仿抽提,酶可能還是有活性的。所以後面連接的時候可能會有干擾。如果能用PCR clean的試劑盒處理一下的話,就比較保險了。不然最好做酚氯仿抽提。
⑷ 如何稀釋新引物啊
用TE(或ddH2O)稀抄釋,按引物合成報襲告單上寫的先稀釋到100uM(一般有To dissolved into 100uM,add XX ul water...,不過注意一下是1OD的還是一管的,一般指1OD加這么多),作為貯存液。
然後再取出一部分,稀釋10倍到10uM,使用
⑸ pcr用超純水
最好還是在冰上做啦,一次兩次沒有問題,久了多了可能問題就出來了
一般用的是滅菌的雙蒸水
保證引物的終濃度就可以.都是用水稀釋的,沒啥差別
⑹ 請問引物是怎麼稀釋的
上面網友講的估抄計應該會出現襲在你合成的引物單上。 在實際操作時,你首先需要進行離心。離心前請不要打開蓋子。 離心後,在離心管底可見白色沉澱,這時你可根據合成單上的說明,加入適量的ddH2O或者Elution Buffer。合成單上標有Tm值,OD值以及引物長度等。通常,會有1OD=?ug的標記(由於引物長度不同,此處數值也對應不同),直接按??值加入等量ddH2O(如20ug對應加入20ul水)便可稀釋為1ug/ul 最後充分渦旋,使沉澱完全溶解。 -20度保存,使用時,應稀釋10倍。