流式細胞儀鞘液用超純水

『壹』 流式細胞儀原理 流式細胞儀原理簡述

1、流式細胞儀原理是參數測量原理。

2、流式細胞儀（Flow cytometer ）是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特徵參量，並可以根據預選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。多數流式細胞計是一種零解析度的儀器，它只能測量一個細胞的諸如總核酸量，總蛋白量等指標，而不能鑒別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說，它的細節 解析度為零。

『貳』 BD流式細胞儀鞘液，關機液能不能用其他產品代替的

看你是什麼型號的機器，如果沒有裝多孔板裝置，只是用管子檢測樣本的，用水就可以代替鞘液。因為在檢測過程中樣本和鞘液是不混合的。

關機液可以用10%漂白水，加10% contrad 70，加純水這三管來代替。

『叄』 流式細胞儀原理

流式細胞儀的工作原理：

流式細胞儀的檢測范圍：

細胞結構：細胞大小，細胞顆粒度，DNA含量與細胞周期，RNA含量，蛋白質含量等等；

細胞功能： 細胞表面/胞漿/核的特異性抗原，細胞活性，細胞內/外的細胞因子，激素結合位點， 細胞受體，鈣離子濃度，線粒體膜電位，等等

『肆』 流式細胞技術與流式細胞儀

流式細胞技術 （Flow Cytometer, FCM）是細胞學的研究手段之一。其能在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞，並能同時從一個細胞中測得多個參數。例如，採用雙激光的方法，研究者可進行核型分析和鑒定，分離純化某號染色體並構建染色體特異性DNA文庫。流式細胞技術是當代最先進的細胞定量分析技術之一。

該技術依託 流式細胞儀 。其主要部件為光源、流動室、熒光檢測部件、分選器。

（1）光源。通常是激光光源，目的是提供足夠的熒光激光能量。

（2）流動室。其為流式細胞儀中最重要的部分。目的是使細胞流穩定流動，依次通過固定的檢測區。其間一道加入還有鞘液（sheath fluid），使樣品微粒之間相互分離，基於 鞘流原理 ，使微粒恆定處於同軸流動的中心位置。流動室的設計運用 液體聚焦原理 ，把激光激發點放在液流聚焦點上，該處是液流直徑最小處，通常為10-20μm，做到了單個細胞進入檢測區。

（3）熒光檢測部件。染色細胞通過激光束時會發出熒光，檢測系統將接收的這些熒光轉換成與其量大小成正比的電壓脈沖信號，該脈沖稱為 峰值脈沖 ，分析系統根據這些來自不同方向的信號把不同的細胞群加以區分。散射光是圍繞細胞360°散發的，所以檢測裝置里一般有90°散色光檢測器（SSC，側向散射光）和前向散射光檢測器（FSC，前向角度散射光）。由於側向散射光強度較弱，因此光電轉換器件選用增益較大的 光電倍增管 。一般來說，6°以內的前向散射光為小角度散射光，可反映細胞體積的大小。大於6°的前向散射為大角度散射光，可提供細胞內的信息，特別是分葉核的信息，細胞質粒存在與否會明顯改變前向大角度散射光的強度。由於前向散射光的強度較強，因此用光電二極體作 光電轉換器 。

（4）分選器。細胞的分選是通過分離含有單細胞的滴液實現的。通過特異性識別與給液滴加電（2kV～6kV），施加靜電場，來實現分離。

過程細節：被激光照射的染色細胞會產生散射光和激發熒光。這兩種光信號同時被光電二極體和光電倍增管接收後轉換成電脈沖信號。無論是散射光或熒光信號，檢測的目的都是要分析不同的粒子。分析的方法有兩種，一是測量粒子通過激光束的最大電壓（與熒光強度成正比），二是測量脈沖的面積。再經過A/D 轉換器將脈沖信號變換成二進制數字信號由計算機處理。光信號基本上反映了細胞體積的大小，熒光信號的強度代表了所測細胞膜表面抗原的強度或其核內物質的濃度。這種屬分析型流式細胞儀。分選型則是則是將液滴充電後送入上面描述的分選器中進行分離，目的是為了將所需的細胞做進一步的培養、觀察和實驗。

染色體倍性不同的細胞，染料吸附於染色體的量迥異，激發的熒光強度限定於一定區間。因此可以對染色體倍性實施鑒定。

總而言之，流式細胞儀能夠對細胞的性質進行系列分析，是細胞學研究的重要工具。

[1] 何克健.流式細胞技術與流式細胞儀[J].醫療裝備,2000(05):6-8.
[2] 羅慶,高建有,李潔維,葉開玉,莫權輝,蔣橋生,查滿榮,王發明,劉世彪.利用流式細胞儀對51份獼猴桃種質染色體倍性的鑒定[J/OL].生物學雜志:1-8[2022-06-02]. http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1081.Q.20220321.1515.00

『伍』 生物實驗室必備設備有哪些

1、樣品保存:
冰箱/超低溫冰箱(荷蘭SKADI)
液氮罐(英國STATEBOURNE CRYOGENICS)

2、樣品前處理:
移液器(gilson,ependof,biocos)
天平(梅特勒，賽多利斯)
均質/攪拌系列(IKA,KINEMATICA,LABSCAN)
離心機(sigma,日立，ebendof,hettich,beckman)
凍干機(荷蘭SKADI)
高壓滅菌器(MMM,SANYO,STURDY)
電泳儀(bio-rad,epondorf)

3、培養過程
培養箱系列(美國SI)
生物安全櫃/超凈工作台(telstar,baker,thermo)
發酵罐(infors，labconco)
搖床(IKA,INFORS,LAB-LINE)
水浴(LABSCAN,JULABO)
轉瓶機(WHEATON,IBS)
PCR(thermo，epondorf,ABI,BIO-RAD,MJ)
酶標儀(Awareness，epondorf,ABI)

4、觀察分析
顯微鏡(Hund,olympus，leica，nikon)
菌落計數儀(INTERSCIENCE)
流式細胞儀(bd,日立)
DNA測序儀(ABI)
高效色譜系列(agilent,whatman,abi,dionex,mathon)

5、其它
洗瓶機(labconco，miele)
超純水系列(MILLIPORE,ELGA,PALL)
超聲波清洗(英國Prima)

微生物實驗室主要用於無菌環境下微生物提純、分離、增殖及鑒定等工作，對無菌環境的要求很高。那麼微生物實驗室中需要用到哪些儀器設備呢？

一、無菌室

無菌室是實驗室的核心部分，主要為樣品提供保護，保證實驗結果的准確和人員的安全。

二、超凈工作台

微生物的培養都是在特定培養基中進行無菌培養，那麼無菌培養必然需要超凈工作台提供一個無菌的工作環境。超凈工作台的主要用途是微生物的接種及處理時的無菌操作。

六、微波爐/電爐

其主要作用是用於溶液的快速加熱，微生物固體培養基的加熱溶化等。

七、搖床

搖床又稱搖瓶機，它是培養好氣性微生物的小型試驗設備或作為種子擴大培養之用。

八、冰箱

冰箱是實驗室中保存試劑和樣品必不可少的儀器。微生物學實驗中用到的試劑有些要求是4度保存，有些要求是負20度保存，實驗人員一定要看清試劑的保存條件，放置在恰當的溫度下保存。

九、顯微鏡

微生物個體微小，必須藉助顯微鏡才能觀察清楚它們的個體形態和細胞結構。因此，在微生物學的各項研究中，顯微鏡就成為不可缺少的工具。

十、生物安全櫃

微生物實驗中所涉及到的部分試劑和樣品微生物有些是有毒的，對於操作人員來說傷害比較大。為了防止有害德懸浮微粒、氣溶膠的擴散，可以利用生物安全櫃對操作人員、樣品及樣品間交叉感染和環境提供安全的保護作用。

微生物實驗室用到的儀器設備都有哪些

A2生物安全櫃

十一、菌落計數器

菌落計數儀可幫助操作者計數菌落數量。通過放大，拍照，計數等方式來准確的獲取菌落的數量。有些高性能的菌落計數器還可直接連接電腦來完成自動計數的操作，方便快捷的計數。

十二、分光光度計

分光光度計在微生物試驗中用於測定微生物懸液的濃度，可以正確選取合適的培養時間。

十三、離心機

離心機是用於收集微生物菌體以及其他沉澱物。有冷凍離心機和常溫離心機之分。

十四、液氮罐

液氮罐里裝有液氮，可用於微生物實驗室中各菌種的長期保存。

『陸』 為什麼不用油作為流式細胞儀分選的鞘液

並不一定要用等滲的緩沖液，很多地方就是用超純水的（分選儀不能用水）。對機器的保護作用更好。
因為鞘液和樣本的壓力不同，流速也不一樣，所以不會混合。同樣都是水或者水溶液，表面張力也一樣。如果用了油，粘滯度很高，無法高速通過管路。表面張力大，干擾樣本軸流，另外折光性也不一樣了。而且肯定成本也會貴很多。