① tris-甘氨酸如何配置電泳緩沖液
所用試劑:Tris鹼,甘氨酸和SDS
含量配方:30.3Tris鹼,188g甘氨酸,10gSDS,此產品為乾粉混合物。用時可以用雙蒸水溶解成1L,配成10倍濃縮液,用時再稀釋10倍,配好的電泳液用於SDS-PAGE蛋白電泳,可反復使用三到五次,如果發現有明顯沉澱或者漂浮時,請丟棄換新的。
電泳緩沖液是核酸、蛋白質凝膠電泳系統的一個重要組成, 是電泳場中的導體,也是維持電泳系統恆定pH值的必要條件,成分及其離子強度影響物質的電泳遷移率,應避免與被分離的樣品發生化學反應而改變樣品的理化性質或使 其喪失生物活性。
電泳緩沖液中的EDTA可螯合Mg離子等二價陽離子,防止電泳時激活DNA酶及Mg離子與核酸生成沉澱。
(1)電泳緩沖液一定要純水嗎擴展閱讀:
注意事項:
1、所有試劑、溶液以及樣品的包裝上必須要有標簽。標簽要完整、清晰,表明試劑的名稱、規格、質量。
2、溶液除了表明品名外,還應表明濃度、配置日期等。萬一標簽脫落,應照原樣貼牢。決定不允許在容器內裝入與標簽不相符的物品。
3、無標簽的試劑必須取小樣檢定後才可使用。不能使用的化學試劑要慎重處理,不能隨意亂倒。為了保證試劑不受污染,應當用清潔的牛角勺或不銹鋼小勺從試劑瓶中取出試劑,絕不可以用手抓取。若試劑結塊,可用潔凈的玻璃棒或瓷葯鏟將其搗碎後取出。
4、液體試劑可用洗干凈的量筒到取,不要用吸管伸入原試劑中吸取液體。從試劑瓶中取出的、沒有用完的聲譽葯品,不可再倒回原瓶。
5、為了安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作。
參考資料來源:網路-電泳緩沖液
參考資料來源:網路-聚丙烯醯胺凝膠電泳
② 電泳法的電泳緩沖液
電泳緩沖液還有一個組分是EDTA(乙二胺四乙酸),加入濃度為1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+
等離子,防止電泳時激活
DNA酶,此外還可防止Mg2+離子與核酸生成沉澱。
此外,我們常常用「電泳法」判斷液體的性質,是膠體還是溶液。在高中化學中我們就用過這種方法判斷給定的液體是否為膠體。
③ 配製western blot 的各種緩沖液不用去離子水可以嗎
1.配製電泳試劑用水蒸餾水單蒸水,條件允許,用更純水;
2.般實驗室都蒸餾水,雙蒸水,其實雙蒸水能滿足數實驗室要求,純水才所謂離水
感覺這樣的提問沒有什麼意義
不要多想,想多了累
④ 聚丙烯醯胺凝膠電泳可不可以不需要加水
你說的是制完膠待凝之前吧,不能的,必須加水,否則聚丙烯醯胺凝固後在上面會由於乾涸出現凹面甚至斷裂,影響後續跑帶結果~
⑤ 電泳後有兩道水洗,依次是UF洗和純水洗,請問第二個水洗必須用純水洗還是可以用自來水。
我認為,電泳後的第一道水洗(UF0)是部件剛出電泳槽,洗下的電泳漆直接回到電泳槽內,回然後再答經UF1和UF2水洗,因為UF1和 UF2水洗,洗下來的水中還含有電泳漆固體份0.8--0.5%電泳漆,為了電泳漆回收利用,最好不要省去這些工序,經過UF0、UF1、UF2水洗後再用純水噴淋洗,效果很好。
⑥ TBE緩沖液可以用自來水配嗎還是必須得是超純水
配試劑不能用自來水的。最好是用蒸餾水或超純水。
⑦ 全細胞反應為什麼要用緩沖液,純水不行嗎
您好,緩沖液是為了調節細胞反應的ph值,如果用純水,反應之後會產生影響反應繼續進行的物質,可能ph發生變化,從而使細胞失活。
⑧ 電泳緩沖液的配製方法
50×TAE Buffer 配製方法:
1。稱量氨基丁三醇 242g,Na2EDTA.2H2O 37.2g 於1L燒杯中;
2。向燒杯中加入約600ml去離子水,充分攪拌均勻;
3。加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解;
4。用NaOH調pH至8.3,加去離子水定容至1L後,室溫保存。
使用時稀釋50倍 即1×TAE Buffer
10×TBE Buffer配製方法:
1。稱量氨基丁三醇 108g,Na2EDTA.2H2O 7.44g,硼酸55g 於1L燒杯中;
2。加入約700ml去離子水,攪拌均勻;
3。用NaOH調pH至8.3,加去離子水定容至1L後,室溫保存。
使用時稀釋10倍 即1×TBE Buffer
⑨ 丙烯酸電泳漆用什麼水可以調,非要用純水,和蒸留水嗎,自來水可以嗎
如果想塗裝線長期穩定運行的話,必須用純水或蒸餾水。
以下是個人經驗內,僅供參考,後果容自負。
根據個人經驗,如果採用自來水配槽是可行的,前提是自來水電導率不能超過300,此為其一;其二,電泳槽液更新周期短,也就是說,每天電泳的生產量大,補加新漆的量也大,如果更新周期在一個月之內的話,可以用電導率低於300的自來水配槽及生產過程中加水;其三,維持電泳槽液溶劑含量在標準的上限,如廠家建議溶劑含量范圍為0.8-1.5%,那平時生產時,須將溶劑含量維持在1.5%左右;其四,電泳前的水洗可用電導率低於300的自來水,前提是更換的頻次要多,一般建議一班至少更換一次,上限不能超過400;其五,泳後水洗用自來水清洗時,建議在下線用高壓水槍再噴洗一次,會對漆膜外觀有好的改善。大概就這些。
再說一次,用自來水的話,有一定的風險性,建議不懂的人,不要輕易採用,否則後果自負!!
⑩ 電泳脫水劑一定要加純水嗎
電泳脫水劑-定要加純水。