疏水柱如果用純化水保存

① 高效液相色譜純化蛋白質一般都用什麼柱子

色譜柱在HPLC中是非常關鍵的部件.一台色譜儀如果沒有色譜柱幾乎什麼工作也做不了.色譜柱是消耗品,有一定壽命,使用中也非常容易出問題.普通的正相反相色譜柱使用得當可用一、兩年.使用不得當用兩、三個月就可能損壞.所以使用中應該非常注意.
1.
在使用一根新的色譜柱之前,一定要看柱說明書,將柱子的使用壓力、pH值、溫度范圍和所用流動相種類都要弄清楚.接觸最多的是C18色譜柱,它對試劑應用的范圍非常廣,甲醇、水、乙腈、四氫呋喃、三氯甲烷、正乙烷、各種緩沖鹽都適用.但其他的色譜柱所使用的試劑就有一定的要求,有的色譜柱只能使用水,不能使用有機試劑,有的色譜柱只能使用有機試劑,而且使用指定是某一種,象GPC色譜柱.這些事情一定搞清楚,如果流動相使用不對,柱子很快會損壞.另外在更換柱子時不能讓不能使用的流動相進入柱子.
2.
柱子是有方向的,柱子上箭頭的方向就是流動相流動的方向.當換新柱子時,不要馬上就接到檢測器上使用.將柱子入口處接在進樣器的出口,柱子出口處（即箭頭的一端）先不接檢測器,按箭頭方向垂直朝上,用流動相（甲醇）以1ml/min的流速沖洗1min左右.將柱子里的小氣泡全部趕走以後再接到檢測器上,否則小氣泡跑到檢測池裡,就很難趕走,檢測器產生雜訊信號,基線也就走不好.
3.
關於壓力對色譜柱的影響：常用的正反兩相色譜柱一般耐壓在12～20MPa之間,生產廠家不同,耐壓也不同,從理論上講耐壓高的色譜柱柱效就高,但柱效高低不僅與耐壓的高低有關,還有其他因素.從使用中看,在保證柱效的同時,耐壓不要太高,儀器所顯示的壓力是流路、混合器、自動進樣器、柱壓、流通池總體的壓力,檢查柱壓力應分段檢查.壓力過高不僅柱子受不了,其他的部件也會出問題,例如自動進樣器.
4.
色譜柱對pH值是有一定的使用范圍.以硅膠為擔體的柱子一般使用范圍在2～7pH.
耐鹼性能不太好,流動相的pH大於8會使硅膠溶解.有些分析條件須用鹼性流動相,這時一定要選耐鹼性好的色譜柱,流動相的PH值過高或過低,流動相使用純水,使用高濃度磷酸鹽緩沖溶液,使用離子對試劑等,均可能造成色譜柱填料被化學破壞,這種對色譜柱固定相及鍵合相的破壞通常是不可修復的.
5.
色譜柱的使用溫度不要超過說明書上規定的溫度.一般使用溫度在60℃以下,典型硅膠基質色譜柱的使用溫度在5℃與60℃之間,高溫使用會縮短柱壽命.
6.
色譜柱使用過程中壓力的驟然波動,溫度的驟然變化或機械撞擊都會對色譜柱床產生影響.進樣過程中,進樣閥轉動太慢引起壓力波動；流速的突然增大都應在日常分析中盡量避免.一般說來,在低柱壓下操作可大大減少由壓力波動造成的柱效損失.這種問題是不可修復的
7.
色譜柱內存在緩沖鹽時,如果用高濃度甲醇或其他有機溶劑沖洗色譜柱,會導致柱內緩沖鹽結晶析出,造成柱壓明顯升高.出現該問題時,反相色譜柱首先應使用20%左右有機溶劑的水溶液低流速沖洗色譜柱,使柱內的鹽全部溶解沖出,再換成高濃度甲醇或其他有機溶劑的流動相.
8.
樣品的預處理,許多樣品,特別是生物樣品與中葯材,其組分復雜,樣品預處理是影響色譜柱壽命的關鍵.樣品經過常規的前處理後,進樣前還需進行以下步驟：a.用微孔過濾膜出除去樣品中的不溶顆粒,以免賭塞柱頭篩板及柱內填充床,使柱壓升高.b.將樣品用流動相溶解或用與流動相互溶的溶劑溶解.
9.
為了保護色譜柱,在色譜柱前接了一個保護柱.保護柱通常是比較短的分析柱,通過吸附可能污染分析柱的強保留雜質,達到保護色譜柱的目的.保護柱的篩板與在線過濾器一樣可以阻擋微粒雜質.為了達到最好的保護效果同時避免導致色譜結果的改變,最好選用與分析柱相同或相似的填料填充保護柱.
10.
色譜柱用合適的溶劑保存,若為C18柱推薦用甲醇保存.在日常分析中,流動相含有的不純物質和樣品中的某些組分會吸附在色譜柱中,隨著分析時間的延長,吸附量會越多,所以柱子要經常清洗,一般柱子使用一兩個星期洗一次,柱子不同清洗的流動相就不同,C18柱子常用甲醇清洗,不要用水清洗這對柱子不好,一般清洗3～4小時,另外色譜柱長時間不用,存放時要將柱子洗干凈,臟柱子放置時間越長,柱效會大大降低.存放時,柱內應充滿溶劑（甲醇或乙腈）,兩端封死.
近幾年化驗室用的液相色譜儀是越來越多,所用色譜柱的種類也越來越多,問題出的也較多,值得注意的是,不論怎樣對色譜柱進行處理,一般都很難恢復到原有水平,因此,大家再使用色譜柱之前一定要看說明書,把以上幾項問題搞清楚後再使用,盡量避免發生如上問題.

② 那些HPLC色譜柱可以用純水

你問的應該是反相色譜柱，因為凝膠過濾用純水相是司空見慣的。
Agilent的Bonus系列，Aichorm的Aqua系列，都是回可以做純水答相的。
但你如果只是考慮梯度起點的高水相比例，那就不必了，普通的C18、C8都可以用純水相短時間沖洗，不超過10個柱體積，是沒什麼問題的。

③ 純化中不同濃度nacl梯度洗脫怎麼洗

如果是離子柱，一般是以NaCl濃度從低到高的梯度進行洗脫，比如從0.1M NaCl開始一直洗脫到1M NaCl。
如果是疏水柱，一般是以NaCl濃度從高到低的梯度進行洗脫，比如從1M NaCl開始一直洗脫到0M NaCl。

④ 純凈水與蒸餾水有什麼區別

1、製作工抄藝不同

蒸餾水是經過蒸餾和冷凝的水。蒸餾水利用蒸餾設備使水蒸汽化，然後使水蒸氣凝成水。而純凈水大多是將天然水經過過濾、提純凈化的水，在經過多道工序、多次過濾後形成的水。

2、飲用時造成影響不同

蒸餾水不宜飲用。蒸餾水是經過蒸餾和冷凝的水，除去了人體所需要的微量元素，但並沒有除去低沸點的有機物。原因是這些低沸點有機物揮發後隨水蒸氣的冷凝也同時凝結回到水裡。

(4)疏水柱如果用純化水保存擴展閱讀

純凈水：現如今新型的健康飲水方式，科學合理，方便快捷的飲水方式，在國外很多發達國家很早以前就開始使用了純凈水設備、瓶裝、桶裝純凈水生產線等製取方式。有效去除水中各類雜質、細菌、重金屬以及農葯等，不含任何添加物，變為可直接飲用的水，新鮮、衛生、安全。

蒸餾水：廣泛應用於醫療、科學研究、生產生活中，作為生活飲用水，它屬於純凈水，不宜長期使用。但可以作為醫療用水，常被用於消毒等方面。

⑤ 離子色譜柱能用純水沖洗嗎，這樣是否會影響柱子的性能。

按看說明書或咨詢色譜柱廠商，防止損害色譜柱，離子柱都不便宜，小心為上。
用純水短時間內沖洗色譜柱，通常不會對色譜柱造成較大的損傷，但如果長時間用水沖洗色譜柱則
可能引起固定相流失和相塌陷現象，所以若非必要請盡量避免用純水沖洗色譜柱，建議在水中加入一定
量的甲醇或乙腈進行沖洗，通常水的含量<90%不會對色譜柱造成任何影響。
原因分析：
首先，由於目前所用的色譜柱大多以硅膠為基質，硅膠的溶解特點是在純水中的溶解度比在含有一
定濃度有機溶劑的流動相中要大得多，所以長時間的用純水沖洗會導致固定相的流失，引起柱效下降。
其次，對於常規的 C18 柱而言，由於C18 長鏈與水是不互溶的，C18 長鏈之間的相互作用力大於
C18 與水分子的作用力，長時間的用水沖洗，使得C18 長鏈之間相互靠近，水流的沖刷，導致相互聯結
的C18 長鏈倒伏在硅膠基質的表面，對疏水性物質的保留能力下降，即相塌陷。針對用純水沖洗容易出
現相塌陷的現象，有些廠家推出了純水柱（如我公司的UltimateTM AQ-C18 柱），這種純水柱可以用純
水作流動相而不會產生相塌陷，這對只溶於純水的樣品的分析提供了一個很好的選擇。
第三，如使用過含緩沖鹽的流動相的色譜柱，用純水沖洗，並一定能將緩沖鹽完全洗去。因為，由
於緩沖鹽難溶於有機溶劑，C18 反相柱中用的填料是在硅膠表面上接上許許多多的C18 長鏈，相當於一
個疏水的有機相，而硅膠基體被有機物質包裹著，所以用純緩沖鹽水溶液做流動相時也許緩沖鹽不容易
到達硅膠基質，不至損害基體。但所用的流動相通常會含一部分有機溶劑，而且這些有機溶劑與C18
長鏈是互溶的，因此有機溶劑的加入增強了流動相滲入硅膠基質的能力，能使部分緩沖鹽達到硅膠基質。
同樣的道理，用純水沖洗只能洗掉表面的緩沖鹽，而滲入深處的緩沖鹽則仍然殘留在那裡。所以最好在
水中加入部分有機溶劑進行沖洗，一般的C18 柱通常用含水20％～90％都可以，含水的比例要視分析
時使用的流動相來定，原則上，用於沖洗的流動相中水的比例應該等於或高於（緩沖鹽用後清洗的情況，
推薦使用「等於」）分析時所用流動相中水的比例。

⑥ 在沖洗高效液相C18反相柱的時候，為什麼不能用純水

相C18色譜柱（即憎水柱子）如果用純水沖洗後，如果立即停泵則由於其憎水（疏水專）的緣故使得柱子內屬的水因而流失掉，長時間停泵使得柱子幹掉（變干），會造成柱子內固定相填料表面鍵合的硅烷基結構塌陷（也說成是失去支撐倒下），柱子就這樣報廢了。那麼一旦沖洗柱子用了純水相怎麼辦呢？誒！不要驚慌，只要你不停泵，上述情況不會立即發生，我們只要保證最後用有機相沖洗柱子，停泵後使柱子內留存的是有機相，就無大礙，

⑦ 為什麼普通C18色譜柱不能用純水沖洗

容易引起疏水坍塌，把強保留物質沖出來，會毀了柱子的，所以水相不能超過95%，最開始的梯度淋洗也是高有機相到高水相，但是不是純水相。

⑧ 凈水器用的活性炭真的那麼好嗎

活性炭的吸附功能和過濾功能這是經過科學驗證的。經過活性炭濾芯過濾的水，的確是純凈水，而且異味也消失了。但活性炭濾芯是有使用期限的，需要定期更換才有理想效果

⑨ 反滲透凈水機有什麼優缺點

一、優點

1、反滲透凈水機：反滲透凈水設備的功能更加齊全，集微濾、吸回附、超濾、反滲透、答紫外殺菌、超純化等技術於一體，更新鮮、更衛生、更安全。

2、超濾凈水機：產水可直接飲用；根據選用濾芯的不同效果也不盡相同，採用韓國新一代濾芯的超濾設備，過濾精度高、使用壽命長，其水錘、耐壓等測試均通過 NSF 測試標准。

二、缺點

1、反滲透凈水機：出水為可以直接飲用的純凈水，出水量較小，比例大概為4比1，排出的廢水是不能飲用的

2、超濾凈水機：超濾凈水器的出水比為2比1，過濾後的水可以直接喝下，但是前提是要正常的自來水，畢竟超濾膜只是一種物理過濾，對化學物質是無法過濾的，所以對一般的自來水過濾沒有問題。但是超濾膜過濾後的水口感並沒有反滲透膜好。