一抗用pbs稀釋還是純水

1. 用冷凍乾燥技術保存的抗體，用的時候是什麼溶解啊 是用PBS嗎

溶解可以直接加入一定量的雙蒸水，溶解到100ul.稀釋的時候可以用PBS。因為抗體在凍干前裡面含有一定量的鹽。當然，也可以加入等量的甘油。以保證在－20度不凍上。

2. 請教western blot孵一抗

1.TBS和PBS的緩沖體系不同，TBS用Tris做緩沖，PBS用磷酸鹽做緩沖。實際使用中差別不大。
Tween-20是一種去污劑，可以降低非特異結合帶來的背景。你上面提到的TBS+0.1% Tween-20+5%脫脂奶粉，其中的TBS完全可以被PBS代替。脫脂奶粉也可以用BSA代替，不過脫脂奶粉要便宜許多。
不知道你說的「做了幾次都沒結果」是怎麼樣沒結果，膜都是黑的，還是都是白的？這是兩種完全不同的「沒結果」。如果膜是黑的，說明背景太強，加入Tween可能會改善一些。如果膜是白的，那和PBS或者TBS關系不大，說明你實驗中有些關鍵試劑或步驟有問題，比如抗體或者轉膜過程，你需要一個一個去核實。

2. 網上TBS配方很多，自己搜一下吧，效果不會差太多。

3. 免疫組化一抗用什麼稀釋PBS可以嗎

建議用血清稀釋，最理想的方法是用二抗同種屬的血清，如二抗是山羊的，用山羊血清，或者是用2%BSA，前提是一抗不是牛的。也就是說，一抗是羊的，小鼠的，兔子的，都可以用BSA。

4. 血清抗體干凍粉用何稀釋啊（是去離子水，PBS,還是生理鹽水啊 ）

你可以先加少量的水，比如100ul或者1ml的水溶解。溶解完後，稀釋可以用PBS或者專門的抗體稀釋液。

5. western 一抗用什麼稀釋比較好

可以用加了脫脂奶粉的封閉液，也可以用TBST液。如果顯色用的是紅外熒光二抗，則只能用TBS液稀釋。

6. WB一抗用什麼稀釋

建議起始濃度1:200開始（當然你也可以1:100，如果你的背景不高的話），倍比稀釋，不是再做1:100-1:1000稀釋，注意了。其實沒有必要分裝，一般都會添加保護劑的。如果你一定要分裝，建議原液分裝或是10稀釋後分裝。

溶液的濃度取決於溶解在溶劑內的物質的多少。溶解度則是溶劑在特定溫度下，可以溶解最多多少物質。 有機溶劑主要用於乾洗（例如四氯乙烯）。

作塗料稀釋劑（例如甲苯、香蕉水、松香水、松節油），作洗甲水或去除膠水（例如丙酮，醋酸甲酯，醋酸乙酯），除銹（例如己烷），作洗潔精（檸檬精），用於香水（酒精）跟用於化學合成。

溶劑：

溶劑是一種可以溶解固體，液體或氣體溶質的液體，繼而成為溶液。在日常生活中最普遍的溶劑是水。而所謂有機溶劑即是包含碳原子的有機化合物溶劑。溶劑通常擁有比較低的沸點和容易揮發。或是可以由蒸餾來去除，從而留下被溶物。

因此，溶劑不可以對溶質產生化學反應。它們必須為低活性的。溶劑可從混合物萃取可溶化合物，最普遍的例子是以熱水沖泡咖啡或茶。溶劑通常是透明，無色的液體，他們大多都有獨特的氣味。

溶質，溶液中被溶劑溶解的物質。溶質可以是固體（如溶於水中的糖）、液體（如溶於水中的酒精）、或氣體（如溶於碳酸飲料中的二氧化碳）。其實在溶液中，溶質和溶劑只是一組相對的概念。一般來說，相對較多的那種物質稱為溶劑，而相對較少的物質稱為溶質。

7. 免疫熒光的一抗核二抗分別用什麼稀釋

PBS稀釋。當然最好用封閉液直接稀釋，再加一點TritonX100效果好。

培養液成分太多了。而且固定之後細胞都死了，用培養液沒什麼意義，只要保證其pH等條件適合就好了。

抗體說明書上都會有推薦的稀釋倍數。上網查一下，有很多protocol。一般一比幾百到一萬都有，依抗體而定。可以4度過夜，這樣染色效果好。

二抗一般較便宜，一般1：50到1：200多。

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注意事項：

為進一步提高信噪比，推薦配套使用QuickBlock™免疫染色封閉液(P0260)和QuickBlock™免 疫染色一抗稀釋液(P0262)用於封閉及一抗的稀釋。

為了能使稀釋的二抗可以反復多次使用，二抗孵育結束後稀釋的二抗應立即存放在4℃，以便於後續重復使用。

本產品僅限於專業人員的科學研究用，不得用於臨床診斷或治療，不得用於食品或葯品， 不得存放於普通住宅內。

為了安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。

8. 做免疫組化都需要哪些試劑

最重要的是選擇好一抗、二抗或者還有三抗，注意抗體的特異性、效價和交叉反應，最好用單抗。
其他常用試劑有：
1、0.01M(pH7.4)的磷酸鹽緩沖生理鹽水（PBS），稀釋抗體和洗片子用；
2、清潔液、純水，洗玻片用
3、多聚賴氨酸處理載玻片，防止脫片
4、固定液：4%多聚甲醛或冷丙酮等；
5、15%~30%蔗糖，組織脫水用；
6、梯度酒精脫水、二甲苯透明、石蠟包埋，或者OCT包埋做冰凍切片；
7、抗原修復液：枸櫞酸緩沖液（pH6.0）；
8、活化劑：EDTA或者Triton X-100；
9、1%~10%牛血清清蛋白（BSA）封閉液；
10、H2O2，滅活內源性過氧化物酶；
11、顯色液：根據你做的酶來選擇，如果是HRP就用DAB，如果是AKP，就用NBT/BCIP，免疫熒光則不需要；
12、50%緩沖甘油封片液。

9. 能用PBS代替抗體稀釋液嗎

抗體說明書裡面應該有該抗體凍干制備之前，是用什麼稀釋的
如果是用PBS稀釋的，則可以用PBS稀釋
若是用生理鹽水稀釋的，則用生理鹽水稀釋

而且稀釋後的用處也決定了是否能用PBS代替抗體稀釋液
如果是用來做普通石蠟切片或者冰凍切片的免疫組化的話，可以用PBS代替抗體稀釋液

10. ELISA間接法中一抗二抗的稀釋用PBST或PBSM（包被液）有沒有什麼差異

一般直接用PBS或者PBST就可以了，PBSM應該是封閉液吧，理論上也可以。但有沒有差別，不好說，只有自己試過才知道，因為牛奶成份復雜，一般的指標是沒有影響的，但不能保證所有指標都適用。
商品化的ELISA抗體稀釋液應該還含有一些穩定劑。但如果不存放，現配現用，與PBS或者PBST應該是沒有差別的。