bdshypersilc18能用純水洗脫

Ⅰ 色譜硅膠的孔徑及用途

Kromasil柱

Kromasil是瑞典AKZO NOBEL公司生產的高性能硅膠基質液相色譜柱填料品牌。
Kromasil是一種高純度球形硅膠填料，金屬雜質含量極低，減少了有些金屬螯合物在硅膠基質上的絡合作用。
Kromasil硅膠的表面由獨特的硅羥基基團組成，硅烷的覆蓋率高，在較高的或較低的PH條件下不易水解和分解，可在PH=1.5～9.5條件下穩定使用。
Kromasil 的含碳量高，表面極性小，分離效能高。通常在分析鹼性樣品時，與酸性硅羥基反應會產生不利的拖尾現象，而Kromasil化學純度極高，它的表面由分布獨特、相對中生的硅羥基基團組成，並使不需要的酸性硅羥基基團減少到最低，從而使之具有良好的峰對稱性種較高的柱效。

Hypersil BDS

Hypersil BDS 類色譜填料是極好的反相柱填料，有很好的耐久性及重現性，應用范

圍極其廣泛。Hypersil BDS 硅膠擔體鍵合前經過專門的鹼鈍化處理，將殘余硅羥基降至極

限，這種改善的表面，使得鍵合後的硅膠具有很高的配位度，大大降低了硅羥基與分析物之

間的相互作用，改善了色譜峰形，降低了色譜峰的拖尾程度，提高了峰的對稱性。

Hypersil BDS填料的特徵：

l 對鹼性化合物有更好的峰型。

l 更長的壽命。

l 更好的穩定性。

l 同鹼性化合物一樣，酸性和中性化合物也有非常優異的峰值--真正的通用柱填料。

緊管常規填料色譜柱具有優異的選擇性和較長的色譜柱壽命。且對於簡單的兩元流動相(如

甲醇/水)，當樣品為酸性、中性和弱鹼性化合物時均可獲得較佳的峰不對稱度。但當分析葯

物等樣品中的強極性含氮的化合物時，樣品峰型就極查，拖尾嚴重，並導致定量分析精度下

降，時常會出現一些小峰埋沒於前一拖尾峰的尾巴中，造成該現象的原因是固定相上尚有殘

余的硅羥基。盡管很多廠家對硅膠表面作了第二次反應，即所謂的「封尾」，以減小殘余硅

羥基的作用，但往往都不能完全消除殘余的硅羥基的影響。Hypersil公司開發的將殘余的硅

羥基降至極限的Hypersil BDS(Base Deactived Silica,鹼純化硅膠)系列產品，並用現代衍生反應技術生產出特別適用於鹼性化合物的真正均一反相填料。

Hypersil 300A 填料是基於5um和10um,
孔徑為300A 的硅膠為基質的HPLC填料適合越來越多的生物大分子分離與分析的需要,現可提供C18 C8 C4 的填料

*Hypersil 300A C18 適合親水性強的分子量大於5000的小肽酶的水解片斷及各種天然和合成小肽的分析
*Hypersil 300A C4 適合疏水性的小肽及大分子的多肽分析
*Hypersil 300A C8 選擇性介於C18和C4之間適用於親水性及弱疏水性的小肽和蛋白質酶的水解片斷及各種天然和合成小肽的分析。

Hypersil ODS填料

Hypersil 填料是基於粒度為3um 、5um和10um, 孔徑為120A的硅膠為基質的HPLC填料其生產過程的質量控制標准非常嚴格全世界數千個實驗室使用Hypersil色譜柱已長達20多年很多應用實例可以從多種文獻及著名雜志上查到。大量的試驗測試已經證實Hypersil ODS2填料是替代Waters Spherisorb ODS2的最佳填料無論是在酸性還是鹼性樣品的分析上選擇性與峰型幾乎與其保持一致。

LiChrosorb填料常規色譜分析柱

產品介紹： LiChrosorb是德國MERCH公司出品的一種多孔無定型硅膠基質填料品牌，在過去的25年中非常成功地應用於液相色譜分離。
產品特點：LiChrosorb RP-8和RP-18適合於鹼性樣品的色譜分析。

技術參數：

LiChrosorb填料參數

Spherisorb 填料
Waters公司出品的Spherisorb填料有3um、5um和10um, 孔徑為80A 硅膠為基質的HPLC填料其高的分離性能已得到廣大色譜用戶的認可

Spherisorb填料有C18 C8 CN C6H5和NH2等固定相C18有經封尾處理的ODS-2和未經封尾處理的ODS-1 兩種ODS-2 的碳含量為11.5%ODS-1的碳含量為5.75%

Spherisorb SAX強陰離子交換柱和SpherisorbSCX強陽離子交換柱分別適合於對小分子的酸性和鹼性化合物的分析比
通常的正相和反相色譜柱有更佳的分離性能

BETASIL 填料
ThermoHypersil-Keystone公司非常有特點的新型通用填料裝填的色譜柱-BETASIL 為了達到原裝柱的水平公司採用全新結構柱管裝填以滿足您更高分析要求的需要

*高純硅膠徹底減去活處理提供完美的峰型
*高比表面積高覆蓋鍵合相
*真正的高效柱理論塔板數較高
*較強的保留,反相色譜應用中適宜強極性化合物的分離

Ⅱ rp-hplc中的 hypersil bds c18是什麼意思

這是美國熱電公司（Thermo Scientific）1989年開發出的一款經典反相硅膠填料，以高度鹼性去活硅膠為擔體，採用封端技術屏蔽硅醇基， 具有以下優點：
1、出色的重現性
2、明顯改善峰拖尾
3、十分耐用，色譜柱使用壽命較長
4、不論是鹼性化合物還是酸性化合物，均呈現完美峰形。

Ⅲ HPLC分析中ODS和BDS兩種柱子的區別是什麼如果柱子的長度不同需要注意什麼

ODS是十八烷基硅烷鍵合硅膠的簡寫，即C18。
BDS則是指鹼性去活技術，是通過一些特殊的方式，例如合成硅膠的工藝等，使Si－OH對鹼性化合物的陽離子交換作用減弱而達到減少拖尾的效果。BDS的叫法主要是Hypersil公司宣傳的較多，他們公司就有直接以BDS命名的系列，據說Hypersil BDS硅膠擔體鍵合前經過專門的鹼鈍化處理，將殘余硅羥基降至極限。（其實減少鹼性化合物拖尾的方法何其多，又怎能只有BDS？）
同一品牌同樣顆粒大小的柱子長短不同，主要差異體現保留能力的強弱，柱長保留強，另一個差異體現在柱壓，柱長壓力高，當然還有就是柱長，由於保留強，也許能拉開短柱上分離不理想的化合物之間的距離，分離效果會有所改善。
不同品牌或者不同顆粒尺寸的柱子，長短不同，則情況相對復雜些。因填料與裝填技術差異，出峰順序與壓力很難一言以蔽之。

Ⅳ 誰能提供一份關於液相色譜培訓的小結

本次培訓主要講解了以下六個方面的內容:一、高效液相色譜法原理與方法發展二、高效液相色譜儀的原理、結構、使用和維護三、樣品制備四、色譜柱的原理、選擇及維護五、高效液相色譜數據處理及定性與定量分析六、高效液相色譜儀在各領域的應用由於高效液相色譜適於分析沸點高、相對分子量大，受熱易分解的不穩定的有機化合物、生物活性物質以及多種天然產物，而這些化合物約占所有有機化合物的80%，因此，高效液相色譜儀具有廣泛的使用范圍，對於有機監測工作也就非常重要。而高效液相色譜儀的維護又決定了工作效率，因此為了能更好的更快速的完成監測工作，必須要懂得維護儀器，當然也必要的學習儀器的一些基本維修技術。對於經常遇到的堵塞問題是由於磷酸鹽緩沖液在管路中沉積導致，解決辦法就是每次做完實驗先經純水再經甲醇沖洗。色譜柱是高效液相色譜儀的核心部分，它的好壞直接影響到樣品分離度的好壞，為了延長HPLC液相泵的使用壽命和維持其輸液的穩定性，必須注意以下幾方面的事項：1、防止任何固體微粒進入HPLC液相泵體，因為塵埃或其它任何雜質都會磨損HPLC液相柱塞、HPLC密封環、HPLC液相缸體和HPLC液相單向閥，因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內蒸餾，而常用的方法是過濾，可採用Millipore 濾膜（0.2um 或 05um） 等濾器。2、流動相不應含有任何腐蝕性物質，含有緩沖液的流動相不應保留在泵內，尤其是HPLC停泵過夜或更長時間的情況下。如果將含有緩沖液的流動相留在HPLC液相泵內，由於蒸發或泄漏，甚至只是由於溶液的靜止，就可能析出鹽的微小晶體，這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞HPLC密封環和HPLC柱塞等。因此，必須HPLC泵入純水充分清洗後，再換成適合於HPLC色譜柱保存和有利於HPLC泵維護的溶劑（對於反相鍵合固定相，可以是甲醇或甲醇和水）。
3、HPLC泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相用完，否則HPLC空泵運轉也磨損HPLC柱塞、HPLC密封環或HPLC缸體最終產生漏液。4、HPLC輸液泵的工作壓力不要超過規定的最高壓力，否則會使高壓密封環變形，產生漏液。5、流動相應先脫氣，以免在HPLC泵內產生氣泡，影響流量的穩定性，如果有大量氣泡HPLC泵就無法工作。而一些常見故障的原因和解決辦法也是得掌握的：1、沒有流動相流出，又無壓力指示。原因可能是HPLC泵內有大量的氣體，這時可打開泄壓閥，使HPLC泵在較大的流量（5ml/min）下運轉，將氣泡排盡，也可用一個50ml的注射器在泵出口處幫助抽出氣體。另一個原因可能是HPLC密封環磨損，需更換。2、HPLC壓力的流量不穩。原因可能是氣泡，需要排除，或者是單向閥內有異物，可以卸下HPLC單向閥，浸入丙酮內，進行超聲清洗。有時有可能是砂濾棒內有氣泡或被鹽的微小晶體粒或滋生的微生物部分堵塞，這時卸下砂濾棒浸入流動相內，超聲除氣泡，或將砂濾棒（片）浸入稀酸（如4mol/L硝酸）內迅速除去微生物或將鹽溶解，再立即清洗。3、HPLC壓力過高的原因，是管路被堵塞，需要清除或清洗。壓力降低的原因則可能是管路有泄漏。檢查堵塞或泄漏時可逐段進行。在管路中存在氣泡會造成色譜圖上出現尖銳的雜訊峰，嚴重時會造成分析靈敏度下降；氣泡變大進入流路或色譜柱時會使流動相的流速變慢或不穩定，使基線起伏。因此流動相必須預先脫氣，在注入樣品前也應注意排出樣品注射器中的空氣。本次培訓還指導了色譜柱的選擇，只有選擇合適的色譜柱才能取得很好的色譜峰，也就能很好的定性及定量分析。如果色譜柱經過一段時間的使用後有凹陷的情況，也可以自行填補，即打開柱頭，以相同或者相似的填料將凹陷的部分填平。對嚴重污染的柱子可以掉頭使用，但必須將連接檢測器的一端斷開，將污染物質沖走，若基線還是有雜峰，也可以進行挖補，往往可基本恢復。

Ⅳ 如何用液相色譜儀測氨基酸

反相高效液相色譜法測定煙葉中的游離氨基酸
氨基酸是煙草中的一類重要化學物質，在煙草調制、醇化或發酵、加工直至燃燒過程中，游離氨基酸與還原糖之間可發生酶催化及非酶催化的棕色化反應，生成多種具有蒸煮、烤香、爆米花香味特徵的吡喃、吡嗪、吡咯、吡啶類等雜環化合物，某些氨基酸如苯丙氨酸還可自身分解成香味化合物，如苯甲醇、苯乙醇等。氨基酸含量與煙草製品的吃味有著密切的關系，氨基酸在燃燒裂解過程中一般形成具有刺激性的含氮化合物，對煙氣香吃味產生不良影響，個別氨基酸還產生HCN等危害健康的煙氣成分。一般說來，氨基酸含量太高，煙氣辛辣、味苦、刺激性強烈；含量太低時煙氣則平淡無味缺少豐滿度。因此對氨基酸的分析是一項很有意義的工作，二十世紀60年代以來，國內外在這方面做了大量的工作[1-5]。
植物游離氨基酸樣品的制備，國內外採用的提取劑和純化方法各不相同。據文獻報道[6-7]，鹽酸、不同濃度的乙醇溶液均可以用來提取植物組織中的游離氨基酸；提取液純化則有用陽離子交換樹脂、5%磺基水楊酸、活性炭或乙醚等方法。本實驗對不同的提取方式和不同的純化方法進行了對比研究，確定提取煙葉中游離氨基酸的較佳提取劑和純化方法。提取、純化後的樣品，採用OPA、FMOC聯合柱前衍生反相高效液相色譜法對煙葉中的游離氨基酸進行了測定。該方法使帶氨基和亞氨基基團的氨基酸能夠被同時測定，且得到較好的定性定量結果。
1 實驗
1.1 儀器
Agilent公司HP1100型高效液相色譜儀(帶可變波長紫外檢測器和自動進樣器)，PE公司Lambda Bio40 紫外-可見分光光度計。
1.2 試劑
正纈氨酸（Norvaline，內標），OPA ，FMOC，均為色譜純，Agilent公司提供；硼酸緩沖溶液，Agilent公司提供；
醋酸鈉(NaAc)，分析純，中國醫葯（集團）上海化學試劑公司；三乙胺（TEA），四氫呋喃（THF），乙腈（CH3CN），甲醇(MeOH)，均為色譜純，Fisher公司試劑；
氨基酸標樣包括：天冬氨酸（Asp）、谷氨酸（Glu）、天冬醯胺（Asn）、谷氨醯胺（Gln）、絲氨酸（Ser）、組氨酸（His）、甘氨酸（Gly）、蘇氨酸（Thr）、丙氨酸（Ala）、精氨酸（Arg）、酪氨酸（Tyr）、胱氨酸（Cys）、纈氨酸（Val）、蛋氨酸（Met）、苯丙氨酸（Phe）、異亮氨酸（Ile）、亮氨酸（Leu）、脯氨酸（Pro），均為生化試劑，中國醫葯（集團）上海化學試劑公司；
苯乙烯陽離子交換樹脂（732型），天津樹脂廠。
1.3 樣品處理
將煙葉在烘箱中恆溫40℃烘乾至恆重，粉碎，過80目篩，篩下物為實驗用煙樣粉末，置於廣口瓶中備用。准確稱取煙樣粉末1.000g於乾燥的潔凈試管中，用一定濃度的乙醇溶液室溫超聲波提取半小時，過濾，相同濃度的乙醇溶液洗滌，再提取一次，合並後的濾液用陽離子交換柱洗脫，然後用95ml 4mol/L氨水淋洗陽離子交換柱，淋洗液恆溫濃縮至干，最後用3ml 0.1mol/L稀鹽酸溶液溶解濃縮物，將此溶液離心分離20min，0.45μm微孔濾膜過濾，加入濃度為5nmol/μ1的內標10μ1，定容至50ml，HP1100液相色譜儀進行氨基酸分析。
樣品自動柱前衍生化：Agilent公司G1313A自動進樣器進樣。程序為：吸取5μl硼酸緩沖液，再吸取1μ1 OPA試劑，洗針一次，吸取樣品2μl，原位混合6次。吸取1μl FMOC試劑，洗針一次，原位混合3次，進樣。
1.4 色譜條件
色譜柱：Hypersil AA-ODS C18 2.1×200mm
流動相A：1.36±0.025g醋酸鈉，加入500ml純水溶解，加90μl三乙胺，用1%醋酸調pH=7.20±0.05，再加入1.5ml四氫呋喃，混合均勻。
流動相B：1.36±0.025g醋酸鈉，加入100ml純水溶解，用1%醋酸調pH=7.20±0.05，將此溶液加至200ml乙腈和200ml甲醇的混合物中，並混合均勻。
流速：0.45ml/min
柱溫：40℃
紫外檢測波長: 0～16min， 338nm； 16～25min，262nm
淋洗梯度：見表1
表1 流動相的淋洗梯度表
Table 1 The gradient time table of mobile phase
序列 時間（min） 流動相A（%） 流動相B（%） 流速（ml/min）
1 0.00 100.0 0.0 0.450
2 15.50 40.0 60.0 0.450
3 18.00 0.0 100.0 0.450
4 21.00 0.0 100.0 0.800
5 23.90 0.0 100.0 0.800
6 24.00 0.0 100.0 0.450
7 25.00 100.0 0.0 0.450
1.5 氮基酸的定性
用標樣色譜圖、文獻參照和標樣加入的方法，通過對照保留時間進行定性，對氨基酸的出峰順序加以確認。
1.6 內標法定量
准確移取濃度為10 pmol/μ1、25 pmol/μ1、50 pmol/μ1、100 pmol/μ1、250 pmol/μ1、500 pmol/μ1、1000 pmol/μ1的氨基酸混合標樣100μl於帶內襯管的樣品瓶中，再加入250pmol/μ1內標溶液100μl，充分混合，液相色譜分析，儀器自動計算各氨基酸的標准曲線。
2 結果與討論
2.1 萃取溶劑的比較
氨基酸可溶解於水、乙醇、甲醇、稀酸等，因此它們均可作為煙葉中游離氨基酸的萃取溶劑，傳統的方法是用乙醇和0.1mol/L的鹽酸。實驗發現，乙醇和0.1mol/L的鹽酸萃取方法比較，提取出的煙葉中的游離氨基酸的總量變化不大，但用鹽酸提取的樣品分析時RSD%較大，平均8.51%，其中超過10%的有4個，甘氨酸的RSD%最大為20%；而用乙醇提取的樣品分析時RSD%相對較小，平均5.12%，超過10%的只有1個。而且鹽酸提取液過濾速度慢，需要30-40min，而乙醇提取液過濾只需10min左右；因此，本實驗選擇乙醇作為煙葉中游離氨基酸的萃取溶劑。
2.2 乙醇濃度的選擇
選擇五種不同濃度的乙醇溶液進行了煙樣中游離氨基酸的提取，測定不同條件下提取液中游離氨基酸的總量，結果如圖1。圖中顯示，在乙醇溶液濃度為80%時，煙樣中總游離氨基酸的提取量最大。而且不同濃度下游離氨基酸的RSD%沒有明顯的變化，因此，選擇80%的乙醇溶液來進行煙樣中游離氨基酸的提取。

2.3 不同純化方法的確定
在最佳乙醇溶液濃度下，分別用活性炭加入提取液吸附雜質、乙醚加入提取液萃取分離雜質、5%磺基水楊酸加入提取液沉澱去除雜質和陽離子交換樹脂吸附雜質四種方法進行了純化實驗。結果發現，活性炭作為純化劑時其色譜圖中雜質峰較少，但同時氨基酸峰亦有多個消失，主要是因為活性炭對氨基酸也有較強的吸附，它在吸附雜質的同時也吸附了需要檢測的氨基酸，故活性炭不適合作為純化劑使用。乙醚和5%磺基水楊酸作為純化劑時，雜質去除不完全，其色譜圖均表現為雜質峰較多，湮沒了大量氨基酸峰，且基線漂移嚴重，給定性定量工作帶來困難。當用陽離子交換樹脂進行純化時，其色譜圖中雜質峰較少，基線平穩，氨基酸峰分離較好，均可以進行定性和定量分析，故本實驗選擇了陽離子交換樹脂作為純化手段。
2.4 色譜分離
2.5 線性范圍及標准曲線
分別取濃度為10 pmol/μ1、25 pmol/μ1、50 pmol/μ1、100 pmol/μ1、250 pmol/μ1、500 pmol/μ1、1000 pmol/μ1的氨基酸混合標樣加入等體積的250 pmol/μ1的內標溶液，進行HPLC分析，以氨基酸濃度為橫坐標，氨基酸與內標的面積比為縱坐標，得到各個氨基酸的標准曲線，如表2所示。從表中可以看出，各氨基酸在10-1000 pmol/μ1的濃度范圍內均有良好的線性，各氨基酸標准曲線的線性相關系數均大於0.99。
表2 氨基酸的標准曲線
Table 2 Standard curves of 17 amino acids
氨基酸 線性方程 相關系數
Asp Y=0.007037x+0.004689 0.9972
Glu Y=0.007520x+0.005375 0.9961
Ser Y=0.006903x+0.038212 0.9988
His Y=0.003719x+0.020168 0.9945
Gly Y=0.005851x+0.018235 0.9966
Thr Y=0.006932x+0.021072 0.9978
Ala Y=0.006275x+0.015314 0.9912
Arg Y=0.006088x+0.016113 0.9920
Tyr Y=0.006734x+0.015022 0.9993
Cys Y=0.006004x+0.009876 0.9985
Val Y=0.006432x+0.009932 0.9927
Met Y=0.006574x+0.010346 0.9905
Phe Y=0.005098x+0.019023 0.9962
Ile Y=0.005976x+0.016235 0.9953
Leu Y=0.006044x+0.015332 0.9964
Lys Y=0.006833x+0.010437 0.9969
Pro Y=0.022455x+0.009376 0.9922
2.6 重現性實驗
取雲南C2F99煙樣做平行實驗（n=5），進行煙葉中游離氨基酸含量的檢測，結果發現： Asp和 Glu含量的RSD%分別為8.0%和8.6%，這可能是二者的分離度不高引起的；His的RSD%為9.0%，這可能與其含量較低，分離效果不好有關。其它氨基酸含量的RSD%均處在3%～7%。
2.7 回收率實驗
用標樣加入法進行回收率實驗，結果見表3。 Thr的回收率僅為68.0%，原因可能與其含量較少有關；其它15種氨基酸的回收率在81.0%～110.5%，平均回收率為93.9%，說明該方法的回收率結果令人滿意。
表3 分析方法的回收率
Table 3 Recovery percents of the analytical method
氨基酸 加入量（mg/g煙樣） 樣品含量（mg/g煙樣） 測定值（mg/g煙樣） 差值（mg/g煙樣） 回收率%
Asp 0.200 0.320 0.499 0.179 89.5
Glu 0.200 0.309 0.484 0.175 87.5
Asn 0.200 0.986 1.208 0.222 110.0
Ser 0.200 0.172 0.334 0.162 81.0
Gln 0.200 0.186 0.368 0.182 91.0
His 0.200 0.106 0.297 0.191 95.5
Gly 0.200 0.064 0.279 0.215 107.5
Thr 0.200 0.052 0.188 0.136 68.0
Ala 0.200 0.642 0.835 0.193 96.5
Arg 0.200 0.266 0.463 0.197 98.5
Val 0.200 0.090 0.259 0.169 84.5
Phe 0.200 0.218 0.406 0.188 94.0
Ile 0.200 0.026 0.191 0.165 82.5
Leu 0.200 0.028 0.199 0.171 85.5
Pro 0.200 1.432 1.653 0.221 110.5
Tyr 0.200 0.062 0.245 0.183 91.5
2.8 樣品分析
利用該方法對不同等級的煙葉中游離氨基酸的含量進行了分析，結果見表4。從表中可以看出，在所分析的樣品中，烤煙煙葉中含量最高的氨基酸是Pro，白肋煙煙葉中含量最高的氨基酸是Asp和Asn；白肋煙煙葉中氨基酸的含量高於烤煙煙葉；相同等級的烤煙煙葉，雲南煙葉中的氨基酸含量高於其它產區。
表4 不同等級煙葉中游離氨基酸的含量（mg/g煙樣）
Table 4 Amounts of free amino acids in different
grade tobacco leaves（mg/g tobacco leaves）
氨基酸 雲南烤煙C1F 雲南烤煙C2F 雲南烤煙C1L 雲南烤煙B1F 雲南烤煙B2F 福建烤煙B1F 福建烤煙C1F 四川烤煙C1F 四川烤煙B1F 貴州烤煙C1F 貴州烤煙B1F 貴州烤煙C1L 鄂西白肋中一 鄂西白肋中二
Asp 0.24 0.31 0.60 0.40 0.38 0.37 0.26 0.37 0.26 0.26 0.32 0.35 1.73 1.59
Glu 0.36 0.32 0.21 0.17 0.16 0.11 0.15 0.20 0.30 0.32 0.29 0.25 0.54 0.61
Asn 0.91 0.34 1.50 0.95 0.38 0.18 0.25 0.35 0.32 0.44 0.55 0.48 7.70 7.62
Ser 0.16 0.10 0.18 0.16 0.10 0.12 0.24 0.21 0.19 0.20 0.19 0.15 0.62 0.58
Gln 0.19 0.05 0.22 0.17 0.04 0.06 0.10 0.11 0.10 0.11 0.15 0.10 0.18 0.20
His 0.11 0.02 0.14 0.10 0.06 0.06 0.11 0.09 0.07 0.09 0.08 0.09 0.20 0.22
Gly 0.10 0.09 0.19 0.17 0.07 0.08 0.12 0.15 0.12 0.15 0.13 0.12 0.16 0.19
Thr 0.05 0.05 0.08 0.06 0.05 0.04 0.08 0.09 0.08 0.07 0.06 0.05 0.19 0.16
Ala 0.65 0.55 0.84 0.69 0.54 0.51 0.65 0.59 0.55 0.48 0.53 0.70 0.57 0.55
Arg 0.29 0.21 0.32 0.28 0.18 0.26 0.32 0.28 0.25 0.33 0.29 0.33 0.48 0.42
Tyr 0.06 0.07 0.06 0.07 0.06 0.05 0.07 0.05 0.06 0.06 0.07 0.06 0.10 0.15
Val 0.10 0.10 0.12 0.11 0.10 0.14 0.15 0.13 0.12 0.15 0.14 0.13 0.21 0.25
Met 0.07 0.07 0.09 0.08 0.06 0.06 0.08 0.08 0.08 0.07 0.09 0.08 0.12 0.13
Phe 0.26 0.12 0.28 0.23 0.10 0.21 0.25 0.21 0.25 0.28 0.30 0.33 0.44 0.59
Pro 1.14 0.83 2.13 1.51 0.69 0.66 1.03 1.23 1.11 1.32 1.18 1.09 0.25 0.35
總量 4.69 3.23 6.96 5.15 2.97 2.91 3.86 4.14 3.86 4.33 4.37 4.31 13.49 13.61
3 結論
本煙葉中游離氨基酸的分析方法採用80%的乙醇作為萃取溶劑，陽離子交換樹脂對提取液進行純化，能夠最大程度地提取煙葉中的游離氨基酸並較好地去除了影響氨基酸測定的雜質，使色譜圖中雜質峰較少；OPA、FMOC聯和柱前衍生使帶氨基和亞氨基基團的氨基酸同時得到測定；良好的梯度洗脫使各個氨基酸峰得到較好的分離，並使定量結果更加可靠。

Ⅵ C18和C8色譜柱的區別

一、填充材料不同

1、C18色譜柱：鍵合到硅膠上的烷烴是18個碳，填充的是C18。

2、C8色譜柱：鍵合到硅膠上的烷烴是8個碳，填充的是C8。

二、極性不同

1、C18色譜柱：C18在極性較弱的一側。

2、C8色譜柱：C8在弱極性較強的一側。

三、作用不同

1、C18色譜柱：適合分析弱極性物質里極性更弱的物質。分子量較小的物質，經常用C18來進行分析和分離。

2、C8色譜柱：分析弱極性物質里極性稍強的一類物質。由於C18比C8的碳鏈更長，因此帶來更好的保留特性。因此C8就更適合分析大分子類的物質，比如一些球蛋白等，都用C8和緩沖鹽洗脫劑來配合使用。

Ⅶ 液相色譜C18柱堵塞後如何沖洗柱子，能用純水 沖柱子嗎

C18柱子不能用純水沖洗，再說本來就堵了，壓力很高應該選擇壓力低的溶劑。
如果內你確定是堵容塞了，就用純乙腈反沖，先用低一點的流速，比如01ml/min，看壓力情況，不要超過200bar，再慢慢提高流速，但不要超過1.的流速，如果是真的堵了，可能會壓力慢慢降下來的。
如果上面方法不行，那還有可能是鹽析堵的，那就用乙腈：水=90：10反沖。

Ⅷ 芳烴中C8和C8A有什麼區別

他們都是色譜填料的一種，C8代表該化合物由8個碳組成，c18由18個碳組成，我們經常叫它們碳8或碳18。色譜柱填料的特點是標志色譜柱的重要方面，你常常會看到在C8或C18的前面，有些其他的名稱，比如hypersil之類的，他們表示在C8或C18的基礎上，進行了一些該進，因此更適合於某類特定化合物的分析。從表面上看，C18和C8的區別就是C18比C8少了10個碳原子，而我們要討論的區別，就是差別這十個碳原子帶來的。這反映了物質決定意識的基本哲學原理。

談到色譜，必須要搞清楚的一個就是極性，因為色譜分離的一個重要原理就是「相似相容」。那我們就先談談極性。

C8和C18都是反相色譜柱的一種，適用於分析弱極性的物質，而C8在弱極性較強的一側，C18在極性較弱的一側。也就是說，C8適合分析弱極性物質里極性稍強的一類物質，C18適合分析弱極性物質里極性更弱的物質。這是他們極性上的差別，但是差別並不是特別明顯，一般能用C8分析的物質，在C18上也能分離。這是因為，後者比前者的保留特性更好一些，這似乎和色譜柱填料的結構關系更為密切。

再讓我們談談空間位阻的問題，也許由於C18比C8的碳鏈更長，因此帶來更好的保留特性。因此C8就更適合分析大分子類的物質，比如一些球蛋白等，都用C8和緩沖鹽洗脫劑來配合使用。相反，分子量較小的物質，經常用C18來進行分析和分離。

另外，你還會經常在C18前面看到「ODS」的字樣，ODS是英文octadecyl silane的所寫，意思是十八(烷)基硅烷，是以硅膠為基質鍵合的C18填料，由於大部分的C18柱都是硅膠基質，因此有時你還會看到色譜柱上只標稱二者之一。其中以ODS居多。有時你還會看到ODS-x，x是不同的數字，這個x雖然是數字，但是不同廠家的產品代表的含義不同，一般以含碳量區分，但這也不是絕對的。比如：

YMC Pack-ODS-AL

ODS-AL液相色譜柱不僅具有疏水基團的相互作用，而且還具備由硅醇基產生的第二級相互作用，這使其與傳統的ODS不同的選擇性。當離子間相互作用被優化後，特別推薦用於流動相中含有緩沖液的色譜分離，可以獲得高重現性的色譜圖。YMC-Pack ODS-AL液相色譜柱採用的是沒有封端的高碳含量單層C18相，其只能在殘存的硅醇基活性有利於色譜分離時使用，由於容易發生拖尾峰，不推薦在分析胺類或含鹼性基團的化合物中使用。

Ⅸ Hypersil BDS C8色譜柱用前怎麼處理

新的色譜柱使用前用色譜甲醇低速沖洗1個小時後就能使用了。