純化水細菌內毒素含量

❶ 細菌內毒素標准要求小於0.50EU，購買鱟試劑選擇靈敏度單位多大的合適呢，之前沒做過這個項目請教下各位

細菌內毒素檢測（凝膠法）標准操作目的：規范細菌內毒素的檢測操作，保證細胞質量。范圍：適用於所有從治療中心發放的細胞（包括CIK、DC、幹細胞等）內毒素限量檢測。責任人：質量檢測人員。

抗原性不同：

外毒素強，刺激機體產生抗毒素；甲醛液處理脫毒形成類毒素。

內毒素弱，刺激機體產生的中和抗體作用弱；甲醛液處理不形成類毒素。

到1940年，摩根利用痢疾志賀氏菌闡明細菌內毒素是由多糖、脂類和蛋白質組成的復合物。1950年以後，隨著生物學、物理學、化學、免疫學、遺傳學等學科的發展，細菌內毒素特別是其化學結構的研究工作開始展開。而且各種生物活性之間的關系也更加明確。

外毒素是劇毒的，可以殺死實驗動物的數量非常少。重要的外毒素主要有兩類：一類是體外產生的外毒素，引起食物中毒。它們引起的疾病不是一種傳染過程，而是由於食用含有這種毒素的食物而引起的中毒過程。

❷ 細菌內毒素的量值

在80年代以前，所有研究內毒素的報道，毫無例外地使用重量單位表示內毒素的量，在鱟試劑建立後也同樣以重量單位表示鱟試驗的靈敏度。隨著人們對細菌內毒素生物活性認識的提高，以重量單位表示的不科學性被揭示，即相同重量的內毒素，對於菌種來源不同，其生物活性相差很大。1980年美國學者Hochstein完成了將重量單位轉化為內毒素單位的工作。當時美國內毒素參考標准品代號為EC-2，該品的家兔發熱劑量ED50為1.04ng/kg，而與此同時美國食品葯品管理局（FDA）批準的鱟試劑參考品為第四批，FDA邀請當時已獲有鱟試劑生產許可證的製造商進行協作研究，採用EC-2與第四批鱟試劑參考品，求出兩者的凝聚終點用ng/ml表示，四個實驗室的56次單獨試驗結果，幾何平均值為0.194ng/ml，FDA就此規定該值為EC-2的1個內毒素單位，EC-2的量值為5EU/ng。自1982年美國葯典修訂1980年（20）版首次收載的細菌內毒素試驗，內毒素單位（EU）被正式引入，明確指出美國內毒素參考標准品每瓶含10000EU。1EU與1個內毒素國際單位（IU）相當。USP版ng跟EU通過RSE/CSE的比率進行轉化。其比率附在COA證書中。CSE與所使用的鱟試劑一一對應。

❸ 細菌內毒素檢測不同濃度怎麼稀釋我們用的是 0.25EU/ml的鱟試劑

葯典美葯典細菌內毒素檢測同點比較
1、細菌內毒素工作標准品（CSE）
CP CSE用途及效價進行定義細菌內毒素工作標准品每1ng細菌內毒素效價應於2EU於50EU
USP未提CSE
2、細菌內毒素檢查用水
CP ： 與靈敏度0.03EU/ml或更高靈敏度鱟試劑37±1℃條件24產凝集反應滅菌注射用水；
USP：與鱟試劑限定靈敏度發反應滅菌注射用水或其水
CP：用於細菌內毒素定量測定用細菌內毒素檢查用水內毒素含量應於0.005EU/ml
USP： 未提
3、實驗用具准備
CP：實驗所用器皿需經處理除能存外源性內毒素用250℃干烤至少1用其確證干擾細菌內毒素檢查適宜
USP：使用經驗證除熱原程序所玻璃器皿遇熱穩定材料熱空氣烘箱進行除熱原用低溫度少間250℃30鍾
4、內毒素標准品貯備液標准品溶液制備
CP： 未提
USP：RSE效價定10,000USP EU/支用5ml鱟試劑檢查用水復溶1支RSE全部內容物用漩渦混合器間歇混合30鍾並用原液作系列稀釋原液置於冰櫃保存超14作稀釋用使用前用漩渦混合器強力混合少於3鍾作步稀釋前需前面稀釋液混合少於30秒要貯存稀釋液沒數據能證明其吸附作用失性
5、供試品溶液制備
CP：|某些供試品需進行復溶、稀釋或水性溶液浸提 用LRW復溶或稀釋葯品或抽提醫療器械某些物質能更適於用其水性溶液溶解、稀釋或抽提
於酸、鹼或本身緩沖能力供試品需調節測溶液（或其稀釋液）pH值般要求供試品溶液pH值6.0-8.0范圍內
USP：用LRW復溶或稀釋葯品或抽提醫療器械某些物質能更適於用其水性溶液溶解、稀釋或抽提
需要調節待測溶液（或其稀釋液）pH值使鱟試劑品混合物pH范圍落鱟試劑產商指定范圍內通適用於pH值6.0-8.0范圍內產品
6、內毒素限值建立
CP：葯品、物製品細菌內毒素限值（L）般按公式確定：L=K/M
L 供試品細菌內毒素限值般 EU /ml、EU / mg 或 EU / U （性 單位）表示； K 每千克體重每接受內毒素劑量 EU / ( kg · h ）表示注 射劑 K = 5EU/(kg?h ) 放射性葯品注射劑 K=2.5EU / （kg· h ) 鞘內用注射劑 K = 0.2EU / （kg· h ) ； M 用每千克體重每供試品劑量 ml / ( kg · h ）、mg / ( kg · h ） 或 U / ( kg · h ）表示均體重按 60kg 計算體表面積按 1.62m2 計算注射間若足 1 按 1 計算供試品每平米體表面積劑量乘 0.027 即轉換 每千克體重劑量（M）
USP：非經腸道葯品內毒素限值劑量定義等於K/M
除鞘內給葯外任何給葯途徑K均5 USP-EU/kg鞘內給葯K0.2 USP-EU/kg於非鞘內給葯放射性葯品內毒素限值計算175/VVmL單位推薦劑量於鞘內給葯放射性葯品其內毒素限值14/V於按每平體表面積計算給葯劑量（通抗腫瘤葯品）計算公式K/M其K=5EU/kgM（劑量/m2/×1.80m2)/70kg
7、靈敏度復核實驗
CP：濃度2.0λ管陽性低濃度0.25λ管均陰性陰性照管陰性實驗效按式計算反應終點濃度幾何平均值即鱟試劑靈敏度測定值（λc）：λc=lg-1(ΣX/4)
USP：|濃度低標准品溶液所重復管均陰性實驗效
用式計算終點濃度數值平均值再計算該平均值反數：終點濃度幾何平均值= antilog(Σe/f)
Σe稀釋系列終點濃度數值f重復管數反應終點濃度幾何平均值即鱟試劑靈敏度測定值
8、凝膠限量實驗：

CP：溶液制備添加內毒素溶液供試品溶液』---USP：經稀釋供試品溶液

CP：使用稀釋倍數MVD並且已經排除干擾供試品液制備溶液AB----USP；使用稀釋倍數超MVD稀釋液制備溶液AB

CP：復試溶液A需做4支平行管所平行管都陰性供試品溶液符合規定
------------USP：復試溶液A兩支平行管均陰性供試品溶液符合規定

USP：供試品溶液超MVD某稀釋倍數稀釋檢測結陽性進步稀釋供試品溶液能超MVD再重新進行試驗------CP；規定

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❹ 細菌內毒素樣品，限值是小於＜10eu/ml那我怎麼計算MVD值

首先你得先確定進行供試品干擾試驗預試驗，確定所需檢測的供試品的最大不幹擾濃度和適宜的鱟試劑靈敏度，然後再按
MVD = c L/λ進行正式干擾試驗，確定所檢供試品的稀釋倍數，在進行細菌內毒素檢測前，你得先多看葯典，了解內毒素檢測步驟

❺ 純化水微生物限度檢測如何控制其測定準確性

目的來
探討紫外線照射源法殺菌結合0.2μm微孔除菌過濾在純化水微生物控制中的應用。方法
運用紫外線殺菌和0.2μm微孔過濾除菌，對飲用水經過預處理一級反滲透和混合床時（陰、陽離子交換樹脂）系統制備的純化水進行紫外線照射殺菌和0.2μm微孔除菌過濾循環使用，再次進行紫外線照射殺菌，比較經混合床制備的純化水在不同取樣點微生物含量，以證明紫外殺菌器和0.2μm微孔除菌過濾對純化水微生物控制的效果。
結果
經過混合床制備的純化水，含有較高的微生物，平均為4.07CFU/ml；經紫外線一次照射殺菌後純化水樣平均為2.25CFU/ml；經0.2μm除菌過濾器後純化水樣平均為1.17CFU/ml；純化水貯罐出水口純化水樣平均為1.15CFU/ml；純化水循環使用前經紫外線二次照射殺菌後純化水樣平均為0.83CFU/ml，回水口純化水樣平均為0.96CFU/ml；純化水細菌內毒素含量檢測<0.25EU/ml。
經統計學分析，混合床出水樣與回水樣檢測結果比較，具有顯著統計學意義（P<0.01）。結論
運用紫外殺菌結合0.2μm微孔除菌過濾器對純化水微生物能夠進行有效的控制；純化水細菌內毒素檢測結果可以達到注射用水標准。

❻ 二級反滲透+edi出水的細菌內毒素能<0.125eu/ml嗎

理論上講是可以的，因為離子級別的都可以截留住，有機物肯定是進入不到純水中去的，但是由於管道材質、安裝水平等原因造成的二次污染會影響測定結果。

❼ 細菌內毒素樣品濃度是2時,我要稀釋40倍咋稀釋是怎麼計算的

細菌內毒素在測定是怎麼稀釋阿
1、如果用了：0.1ml和0.9ml得水，那才1ml母液了，你後面那些稀釋液就沒母液讓你配製了。
2、這樣的稀釋太好算拉，你按倍數換算就是了呀。

❽ 細菌內毒素，浸提樣品多少毫升怎麼算

產品為固體的，根據產品結構及大小，設定合理的浸提體積，體積以能浸沒產品或者充內滿產品為准。
產品為溶液容的，溶液即浸提液。
之後還需根據產品細菌內毒素限量及浸提液體積計算浸提液內毒素限量
再根據浸提液內毒素限量及鱟試劑靈敏度計算最大有效稀釋倍數

❾ 歐洲葯典對純化水有細菌內毒素的要求嗎

純化水沒有要求，注射用水有