『壹』 星三角變換 能不能解決非平面的純電阻拓撲結構的等效
能用。只要是拓撲同構就等效
至於變換之後是否能夠解決問題,就不好說了
『貳』 語瓶實驗室洗瓶機安裝使用需要有超純水機么
實驗室裡面了一般都配備的有實驗室超純水設備的,最好配上。
『叄』 RNA分離及提取的方法
分子克隆技術(華農)
實驗一 質粒的制備
質粒是攜帶外源基因進入細菌中擴增或表達的主要載體,它在基因操作中具有重要作用。質粒的分離與提取是最常用、最基本的實驗技術。
質粒的提取方法很多,大多包括3個主要步驟:細菌的培養、細菌的收集和裂解、質粒DNA的分離和純化。本實驗以鹼裂解法為例,介紹質粒的抽提過程。
實驗目的:掌握鹼裂解法抽提質粒的原理、步驟及各試劑的作用。
實驗材料:含有質粒pUC18載體的大腸桿菌菌液,克隆有水稻外源片段的BAC的大腸桿菌菌液。
實驗原理:在pH 12.0 ~ 12.6鹼性環境中,細菌的線性大分子量染色體DNA變性分開,而共價閉環的質粒DNA雖然變性但仍處於拓撲纏繞狀態。將pH調至中性並有高鹽存在及低溫的條件下,大部分染色體DNA、大分子量的RNA和蛋白質在去污劑SDS的作用下形成沉澱,而質粒DNA仍然為可溶狀態。通過離心,可除去大部分細胞碎片、染色體DNA、RNA及蛋白質,質粒DNA尚在上清中,然後用酚、氯仿抽提進一步純化質粒DNA。
實驗步驟:
1. 取含有pUC18質粒的大腸桿菌菌液於LA培養基上37℃過夜培養;
2. 用無菌牙簽挑取單菌落,接種於含有Amp抗生素的LB培養基中,37℃搖床~250 r/min過夜培養;
3. 吸取1.5 ml菌液,12000 g離心2分鍾,收集菌體,倒掉菌液;吸取1.5 ml菌液,再次收集菌體,盡量將菌液倒干凈;
4. 加入300 ml溶液 I振盪打勻,重新懸浮細胞,震盪混勻(注意:應徹底打勻沉澱或碎塊); (劇烈)
5. 加入300 ml溶液II,輕柔顛倒混勻,放置至清亮,一般不超過5分鍾;
6. 加入300 ml溶液III顛倒混勻,放置於冰上10分鍾,使雜質充分沉澱;(溫和)
7. 12000 g離心10分鍾;
8. 吸取800 ml上清液(注意:不要吸取到飄浮的雜質)至另一Eppendorf管中,加入2/3體積的異丙醇,室溫下放置5分鍾;
9. 12000 g 常溫離心15分鍾;
10. 倒盡上清,加75%乙醇浸洗除鹽(放置片刻或離心3分鍾後倒去上清);
11. 室溫放置或超凈台上風干DNA;
12. 加40 ml滅菌超純水或TE溶解;
13. 質粒、BAC的質量檢測,於-20℃保存。
附註:質粒檢測
電泳檢測:質粒電泳一般有三條帶,分別為質粒的超螺旋、開環、線型三種構型
吸光值檢測:採用分光光度計檢測260nm、280nm波長吸光值,若吸光值260nm/280nm的比值介於1.7-1.9之間,說明質粒質量較好,1.8為最佳,低於1.8說明有蛋白質污染,大於1.8說明有RNA污染。
實驗二 DNA的瓊脂糖凝膠電泳
帶電荷的物質在電場中的趨向運動稱為電泳。電泳的種類多,應用非常廣泛,它已成為分子生物學技術中分離生物大分子的重要手段。瓊脂糖凝膠電泳由於其操作簡單、快速、靈敏等優點,已成為分離和鑒定核酸的常用方法。
實驗目的:掌握瓊脂糖凝膠電泳的原理,學習瓊脂糖凝膠電泳的操作。
實驗材料:質粒DNA、BAC、植物總DNA
『肆』 RNA的提取方法步驟及原理.
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:
Trizol是一種總RNA抽提試劑,內含異硫氰酸胍等物質,能迅速裂解細胞,抑制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。
Trizol作用原理:
在勻質化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心後,裂解液分層成水相和有機相。RNA存在於水相中。
水相轉移後,RNA通過異丙醇沉澱回收。移去水相後,用乙醇可從中間相沉澱得到DNA,加入異丙醇沉澱可從有機相得到蛋白質。
與DNA不同,RNA一般為單鏈長分子,不形成雙螺旋結構,但是很多RNA也需要通過鹼基配對原則形成一定的二級結構乃至三級結構來行使生物學功能。
RNA的鹼基配對規則基本和DNA相同,不過除了A-U、G-C配對外,G-U也可以配對。
在細胞中,根據結構功能的不同,RNA主要分三類,即tRNA(轉運RNA),rRNA(核糖體RNA),mRNA(信使RNA)。mRNA是合成蛋白質的模板,內容按照細胞核中的DNA所轉錄;tRNA是mRNA上鹼基序列(即遺傳密碼子)的識別者和氨基酸的轉運者;rRNA是組成核糖體的組分,是蛋白質合成的工作場所。
『伍』 RNA的提取方法
1、酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎細胞,消化蛋白,然後用酚和酚-氯萃取,高速離心後取上清,所得DNA大小為100-150kb
2、甲醯胺解聚法:破碎細胞同上,然後用高濃度甲醯胺解聚蛋白質與DNA的結合,再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
3、玻璃棒纏繞法:用鹽酸胍裂解細胞,將裂解物鋪於乙醇上,然後用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪,DNA沉澱液繞於玻棒。生成DNA約80kb。
4、異丙醇沉澱法:基本同1法,僅用二倍容積異丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在異丙醇中可溶狀態)
5、表面活性劑快速制備法:用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細胞,然後用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉澱或透析。
6、加熱法快速制備:加熱96℃-100℃,五分鍾,然後離心後取上清,可用於PCR反應。
7、鹼變性快速制備:先用NaOH作用20分鍾,再加HCI中和,離心後取上清,含少量DNA。
(5)天津拓撲超純水擴展閱讀:
DNA提取原則:
1、保證核酸一級結構的完整性;
2、核酸樣品中不應存在對酶有抑製作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子;
3、其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降低到最低程度;
4、其他核酸分子,如RNA,也應盡量去除。
『陸』 請問拓撲中的胞腔是什麼定義,跟單純性有什麼關系和區別么
粗略的說如果一個拓撲空間和某個n維的單位球B^m同胚的話,我們稱之為是一個n維胞腔(如果同胚於開球的話就稱為開胞腔)。胞腔可以用來定義CW復形和CW鏈復形之類的東西,用以構造相應的上同調,額,可以參看相應的代數拓撲的書。
與單純性有什麼關系?你大概是打錯了吧?單純形還差不多,這是單純形的一個推廣,明顯單純形是同胚於某個單位球的。
『柒』 在拓撲學中任意一個三維空間是否可以完全單純剖分
什麼是單純剖分?
『捌』 請問拓撲中的胞腔是什麼定義,跟單純性有什麼關系和區別么
粗略的說如果一個拓撲空間和某個n維的單位球B^m同胚的話,我們稱之為是一個n維胞腔(如果同胚於開球的話就稱為開胞腔)。胞腔可以用來定義CW復形和CW鏈復形之類的東西,用以構造相應的上同調,額,可以參看相應的代數拓撲的書。
與單純性有什麼關系?你大概是打錯了吧?單純形還差不多,這是單純形的一個推廣,明顯單純形是同胚於某個單位球的。
『玖』 純金屬晶體最密堆積數位12,拓撲密堆相(合金相)的最高堆積數能達到多少
12 只要前提是合金組成成分的原子半徑很接近.