A. 細胞實驗室是否需要純水、超純水,設計時要不要把純水系統設計進去
你做細胞實驗基本是離不開純水和超純水的,不論你是做動植物實驗、細胞免疫化學、PCR實驗、蛋白質純化以及電泳/凝膠分析,都是要用到超純水的。建議你設計時最好把超純水系統也設計進去,以後你的幾個實驗室直接用設計好的超純水系統的管道取水即可。你可以聯系南京權坤。
B. PCR 進行的基本條件是什麼
PCR反應進行的條件:引物(PCR引物為DNA片段,細胞內DNA復制的引物為一段RNA鏈)、酶、dNTP、模板和緩沖液(其中需要Mg2+)。
引物有多種設計方法,由PCR在實驗中的目的決定,但基本原則相同。PCR所用的酶主要有兩種來源:Taq和Pfu,分別來自兩種不同的噬熱菌。其中Taq擴增效率高但易發生錯配。Pfu擴增效率弱但有糾錯功能。所以實際使用時根據需要必須做不同的選擇。
(2)超純水可以做pcr么擴展閱讀:
PCR的特點:
1、靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12)量級的起始待測模板擴增到微克(μg=-6)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中最小檢出率為3個細菌。
2、簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好後,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
3、純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗製品及RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活組織等DNA擴增檢測。
參考資料來源:網路—PCR
C. 做配葯品,稀釋引物,PCR實驗中,對水的要求要很高么
配製一般化學試劑使用二級水即可。
配製生化試劑,包括引物稀釋、PCR所用水,以及轉膜、核酸抽提等,必須使用二次蒸餾水或一級水。
D. 求助:做PCR用什麼水的效果是最好的
因為你已經加了Buffer有了一個緩沖條件,理想狀態下,新鮮制備的蒸餾水也是可行的。
但為了保證PCR質量,減少麻煩,大家的做法是使用滅菌的去離子水。
水到不必最純凈,但是一定要保證無核酸酶最重要。一般滅菌都能除去dna酶,rna要是特別在意就用depc處理。
不厚道的說一下,你沒有師兄師姐么,這種入門的東西問一下就知道了,幹嘛還發這種帖子。
溝通是科研第一要務。
E. 自由的去離子水可以做PCR嗎
可以,如果你一下子找不到的話,可以使用屈臣氏的雙蒸餾水和DEPH水
F. 做PCR如何設置條件
儀器不一樣,設置的具體操作有點差別。
PCR條件一般是:
95° 3--10min
95° 15-45s
退貨溫度 15-45s
72° 15-90s 35cycles
72° 10min
G. 做hplc一定要用超純水嗎,用純化水可以嗎
是必須用純水,而且最好是用二級以上的純化水來做。
H. 做PCR的水要求高嗎
不需要.但必須專用於PCR,可分裝成500ul的小包裝,使用次數太多,或者覺得可能污染可以丟掉而不會太浪費.
如果PCR的操作環境比較好,那麼試劑很安全、很穩定
I. pcr用超純水
最好還是在冰上做啦,一次兩次沒有問題,久了多了可能問題就出來了
一般用的是滅菌的雙蒸水
保證引物的終濃度就可以.都是用水稀釋的,沒啥差別
J. pcr 去離子水
diH2O是去離子水,ddH2O是雙蒸水,不太一樣,但我覺得在PCR體系裡完全可以相互替代.