純化水濾膜邊緣長菌要不要計數

A. 純化水中的微生物檢測怎麼做 要詳細

採用濾膜法進行微生物檢測是一種國際公認的微生物標准檢驗方法回,其得到AOAC、美國、歐答洲和日本等國家的葯典、FDA和EPA等組織的承認,廣泛應用於環境監測、食品及飲料工業、化妝品、制葯工業品質控制和電子工業等領域.賽多利斯公司的濾膜法微生物檢測產品成功地應用於濾膜法已有20多年的歷史,實用而且方便實用,它簡化了微生物檢測程序.
濾膜法微生物檢測：
將適當孔徑的濾膜放入濾器,過濾樣品,由於濾膜的作用而將微生物保留在膜的表面上.樣品中微生物生長抑制劑可在過濾後用無菌水沖洗濾器而除去.然後,將濾膜放在培養基上培養,營養物和代謝物通過濾膜的微孔進行交換,在濾膜表面上培養出的菌落可以計數,並和樣品量相關.
濾膜法的優點：
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與直接法比較,可以檢測大量的樣品
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濃縮效應使微生物檢測的准確度提高
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帶有菌落的濾膜,可作為檢測的永久記錄存檔
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可見的菌落和樣品量直接對應,得出定量結果
操作具體一點就是：薄膜過濾法檢測,一個樣過濾一份,就是200ml的純化水通過濾膜,將該濾膜浸泡在滅菌好的l生理鹽水中,再接種到平皿中,製成10級、100級、1000級稀釋倍數的細菌、黴菌和酵母菌稀釋培養皿,即可

B. 取樣回來的純化水檢測微生物的可以放置多久

取樣回來的純化水檢測微生物的可以放置多久
您的意思應該是說在純化水微生物限度測試的取樣中，是不是必須在潔凈區的取樣口進行。其實這種說法是錯誤的，主要是你取樣的合法性，一般我們都按檢驗檢測取樣規程來操作，無菌瓶取樣就可以了。
薄膜過濾法,計數,每1ml純化水不得過100個,具體方法：
1、大腸菌群的檢查：取含培養基10
ml的乳糖膽鹽發酵管若干支,分別加入供試水樣1 ml.另取乳糖膽鹽發酵培養基管1支加1ml洗液為陰性對照組,於36±1℃培養18～24
h.陰性對照應無菌生長.供試品乳糖膽鹽發酵管若無菌生長,或有菌生長但不產酸產氣或產酸不產氣,判該管未檢出大腸菌群.
2、黴菌及酵母菌計數：純化水取水樣1ml,均做平行,並做陰性對照,經直徑為50 mm、孔徑0.45μm 的薄膜過濾器過濾,小心取出濾膜,菌面向上貼於玫瑰紅鈉培養基平板上,將培養皿倒置於培養箱中,於23～28℃培養5天（可延長到7天）,菌落計數；
細菌計數：純化水取水樣1 ml,並做陰性對照,經直徑為50 mm、孔徑0.45μm 的薄膜過濾器過濾,小心取出濾膜,菌面向上貼於營養瓊脂培養基平板上,將培養皿倒置於培養箱中,於30～35℃培養72 h,菌落計數
3、判定標准：純化水每片濾膜上微生物菌落總數不超過100 cfu,不得檢出大腸菌群

C. 純化水的微生物限度里的薄膜過濾法如何計數啊

採用薄膜過濾法進行細菌試驗,誤判風險要小些,所以發現問題的概率比直接接種法要大些。內所以，葯典要求細菌試容驗採用薄膜過濾法是有道理的。 tIet^:Ug
純化水微生物限度檢測薄膜過濾法是葯典方法，已經是做了驗證的，所以企業沒有必要再做方法評價。

D. 純化水微生物限度檢查用薄膜過濾法怎麼做

准備工作：

用純化水浸泡濾膜，浸泡完全後放入濾杯中，包好濾杯，連同回量筒、培養基、平皿、答取膜器、三角燒瓶等一起121℃滅菌30min。

滅菌後的物品一並傳入潔凈室中，微生物限度過濾器上連好已經滅好的濾杯，用緩沖液先潤濕濾膜，抽掉緩沖液，然後倒入供試液（10倍稀釋），濾過，再用緩沖液沖洗濾膜。

過濾結束後取下濾膜平貼於R2A瓊脂培養基平板上，32℃倒置培養5天。菌落計數（平皿上長幾個菌結果就報幾個菌）

(4)純化水濾膜邊緣長菌要不要計數擴展閱讀：

薄膜過濾系統主要用於去除小顆粒及溶解鹽，一般可分為微濾、超濾、納濾和薄膜過濾反滲透。

微濾又稱微孔過濾，它屬於精密過濾，截留溶液中的砂礫、淤泥、黏土等顆粒和賈第蟲、隱抱子蟲、藻類和一些細菌等，而大量溶劑、小分子及少量大分子溶質都能透過膜的分離過程。

超濾是一種加壓膜分離技術，即在一定的壓力下，使小分子溶質和溶劑穿過一定孔徑的特製的薄膜，而使大分子溶質不能透過，留在膜的一邊，從而使大分子物質得到了部分的純化

納濾 ( NF，Nanofiltration)是一種介於反滲透和超濾之間的壓力驅動膜分離過程，納濾膜的孔徑范圍在幾個納米左右。

參考資料來源：網路-薄膜過濾

E. 用濾膜法測細菌總數,該如何處理

基於濾膜上細菌直接計數法的細菌總數快速檢測
【摘要】 細菌總數快速檢測在質量監測中具有重要的意義，目前除了經典的平板培養法以外，還有微菌落法、阻抗法等快速檢測方法，這些方法或者需要較長的檢測時間，或者需要較高的檢測成本。本研究提出一種不需要培養而在濾膜上直接計數的細菌總數的快速檢測方法，它主要分為過濾、染色、顯微鏡計數和計算四個步驟。計算細菌總數時，根據細菌在濾膜上的分布特點，對傳統公式進行改進，提出按區域計算細菌總數的計算方法，提高了檢測精度。研究結果表明，該方法與傳統的平板培養法無顯著性差異（t=0.847，P=0.436＞0.05），是一種低成本、快速的細菌總數檢測方法。
1 引 言

細菌總數計數的研究已有很多，目前國標規定的方法為平板計數法，該方法是將樣品加入瓊脂營養基，在37 ℃下培養24～48 h後計數。這種方法精度高，但耗時長，難以滿足實際工作需要。為了簡化檢測程序、縮短檢測時間，國內外學者進行了大量的快速檢測方法的研究，提出了阻抗檢測法〔1〕、Simplate TM全平器計數法〔2〕、微菌落技術〔3-5〕、紙片法〔6-7〕等檢測方法，取得了一定的成果，但檢測時間仍在4 h以上。

本研究在分析了已有研究成果的基礎上，提出了在濾膜上染色後，直接計數的細菌總數檢測方法，具體步驟為：用集菌儀進行細菌收集→在膜上進行染色→在油鏡下計數→按公式計算出菌液濃度。實驗結果表明，該方法與傳統的平板培養法無顯著性差異，檢測時間約1 h，是一種快速的細菌總數檢測方法。

2 材料與方法

2.1 材料

本研究中用的試驗材料有集菌儀（杭州泰林生物技術設備有限公司），染色劑，生物顯微鏡（寧波永新光學股份有限公司），聚碳酸脂膜（直徑47 mm）。

2.2 實驗方法

2.2.1 准備工作 卸下集菌儀的濾網（見圖1），統計濾網上小孔總數，為計算菌液濃度做准備。另外，還需對集菌儀中的集菌器進行高壓滅菌，以防止過濾過程中引入外源細菌。

2.2.2 細菌收集 取一定濃度的黴菌菌液300～500 ml，裝在集菌儀上，集菌儀採用蠕動加壓方式對菌液施加一定的壓力，使菌液流過孔徑為0.45 um的聚碳酸脂膜。採用過濾方法是因為它可以使細菌相對均勻地分布在濾膜上，而選用聚碳酸脂膜是因為這種膜具有良好的透光性，便於用顯微鏡觀察。

2.2.3 染色 集菌後取下濾膜，切下一部分放在載玻片上，進行染色、固定。染色的目的是增大細菌與背景的對比度，便於觀察。

2.2.4 顯微鏡計數與計算 菌液經集菌儀過濾後，細菌在濾膜上的分布見圖2、圖3，由圖可以看出細菌分布具有以下兩個特點：一是細菌集中在一個個的圓形區域內，這些圓形區域和擋板的小孔相對應；二是各個圓形區域之間細菌很少。根據膜上細菌分布的這種特點，提出以圓形區域為單位進行計數，統計出圓形區域內細菌的平均個數，從而計算出菌液中細菌總數。具體步驟如下：隨機選擇10個圓形區域，在油鏡下，調節焦距以獲得較清晰的圖像（見圖4），統計每個圓形區域內的細菌個數，然後按公式(1)計算出菌液的濃度。

X=A10×N/V(1)圖2 膜上細菌的區域分布

Fig 2 The distributing region of bacteria on the filter(100倍)

圖3 膜上細菌的區域間隔

Fig 3 The space among the distributing regions(100倍)

圖4 膜上細菌染色後圖像

Fig 4 Figure of bacteria after coloration(1 000倍)

式中：X表示待檢菌液濃度（CFU/ml）

A表示10個圓形區域內細菌總數

N表示濾網上小孔總數

V表示集菌時所用待檢菌液體積（ml）

3 結果與討論

3.1 實驗結果

按上述方法計算得到的結果與平板培養法得到的結果見表1。表1 兩種方法得到的細菌總數

Table 1 Total bacteria number by two different methods

樣本1樣本2樣本3樣本4樣本5樣本6染色鏡檢

(cfu/ml）185168157165171166平板培養

(cfu/ml)176155165158183152

對表1中兩組數據進行配對t檢驗，在α=0.05時，雙尾檢驗結果如下：t=0.847，P=0.436＞0.05，說明兩種方法得到的結果無顯著性差異。

3.2 討論

3.2.1 計算公式的改進 用集菌儀對樣本菌液進行過濾時，由於濾網擋板的作用，使得細菌不是均勻地分布在整個濾膜上，而是集中分布在濾網的小孔處，所以，計算細菌總數時，不能採用公式X=A40×Φ1Φ22/V（其中Φ1，Φ2分別為濾膜直徑和視野直徑），該公式是微菌落方法檢測細菌總數中的常用計算公式。在本實驗中，根據細菌分布的特點，提出以圓形區域為單位計算細菌總數的思路，使計算結果更接近真實值，從而提高了檢測精度。

3.2.2 細菌大小的影響 細菌大小對本實驗的影響主要體現在鏡檢時，如果細菌太小，顯微鏡計數時不能將細菌從背景中分辨出來，我們的實驗結果顯示，不能分辨大腸桿菌和葡萄球菌，而較大的黴菌可以清晰地分辨。

3.2.3 檢測時間進一步縮短 細菌總數的經典檢測方法是平板培養法，得到的結果精度高，但是它所用時間長，為了縮短檢測時間，出現了微菌落法，將檢測時間縮短為4 h左右〔3-5〕。本研究不對細菌進行培養，而是在膜上染色後直接用顯微鏡計數，最大限度地縮短了檢測時間，使整個檢測時間在1 h左右。

4 結論

本研究用集菌儀將菌液過濾後，取濾膜一部分進行染色、製片，然後在油鏡下統計細菌個數。根據細菌在濾膜上的分布特點，提出將圓形區域作為統計單位，得到圓形區域內細菌的平均個數，從而計算出菌液濃度。實驗結果表明，按照該方法得到的結果與平板培養法的結果無顯著性差異。與平板培養法和微菌落法相比，該方法不需要細菌培養，檢測時間只需要1 h左右，明顯縮短了檢測時間，是一種快速、有效的細菌總數檢測方法。

F. r2a培養基上和濾膜上都長細菌是怎麼回事

r2a培養基上和濾膜上都長細菌是怎麼回事
R2A瓊脂培養基培養基
英文名稱：R2A Agar
R2A瓊脂培養基用於純水中微生物的計數。(2015版CP)
檢驗原理：
酵母浸出粉、蛋白腖、酸蛋白水解物提供氮源、維生素、生長因子;葡萄糖、為可發酵糖類;可溶性澱粉可以吸收菌在復甦過程產生的有害物質;丙酮酸鈉可增強細菌的復甦。磷酸二氫鉀為酸鹼緩沖劑;無水硫酸鎂提供二價陽離子;瓊脂為凝固劑。
R2A瓊脂培養基配方成分：
成分
含量(g/L)
酵母浸出粉
0.5
蛋白腖
0.5
酪蛋白水解物
0.5
葡萄糖
0.5
可溶性澱粉
0.5
磷酸二氫鉀
0.3
無水硫酸鎂
0.024
丙酮酸鈉
0.3
瓊脂
15.0
蒸餾水(乾粉培養基不含此成分)
1000
最終pH 7.2±0.2
使用方法：
平板凝膠培養基使用：待檢樣品按照相應的標准進行處理後，取適量樣品液接種於該培養基上，於葯典規定的培養條件進行培養，觀察結果。
脫水乾粉培養基使用：稱取本品乾粉18.1g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，121℃高壓滅菌15 min。(註：配製不同用量體積，可按比例擴增或縮小。)後續操作可參考「平板凝膠培養基使用」。

G. 細菌培養基裡面長黴菌怎麼計數

不能，因為每一種微生物所需的成分是不一樣的，溫度、濕度、pH等都有影響細菌現在採用的是PCA平板計數培養基，是國家自2010年6月實行的新標准中規定

H. 做純化水微生物限度時濾膜周圍長了一圈菌是怎麼回事

有可能是污染了，濾膜上是否有菌落？所有器具好好消毒下，在做一下看看！希望對你有幫助

I. 微生物純化水耐膽鹽革蘭陰細菌需要做嗎

薄膜過濾法,計數,每1ml純化水不得過100個,具體方法：
大腸菌群的檢查：取含培養專基10 ml的乳糖膽鹽發酵管若干支屬,分別加入供試水樣1 ml.另取乳糖膽鹽發酵培養基管1支加1ml洗液為陰性對照組,於36±1℃培養18～24 h.陰性對照應無菌生長.供試品乳糖膽鹽發酵管若無菌生長,或有菌生長但不產酸產氣或產酸不產氣,判該管未檢出大腸菌群.
黴菌及酵母菌計數：純化水取水樣1ml,均做平行,並做陰性對照,經直徑為50 mm、孔徑0.45μm 的薄膜過濾器過濾,小心取出濾膜,菌面向上貼於玫瑰紅鈉培養基平板上,將培養皿倒置於培養箱中,於23～28℃培養5天（可延長到7天）,菌落計數；
細菌計數：純化水取水樣1 ml,並做陰性對照,經直徑為50 mm、孔徑0.45μm 的薄膜過濾器過濾,小心取出濾膜,菌面向上貼於營養瓊脂培養基平板上,將培養皿倒置於培養箱中,於30～35℃培養72 h,菌落計數
判定標准：純化水每片濾膜上微生物菌落總數不超過100 cfu,不得檢出大腸菌群；

J. 微生物限度檢查 陰性長菌（薄膜過濾法）

准備工作：
1.
用純化水浸泡濾膜，浸泡完全後放入濾杯中，包好濾杯，連同量筒專、培養屬基、平皿、取膜器、三角燒瓶等一起121℃滅菌30min。
2.
滅菌後的物品一並傳入潔凈室中，微生物限度過濾器上連好已經滅好的濾杯，用緩沖液先潤濕濾膜，抽掉緩沖液，然後倒入供試液（10倍稀釋），濾過，再用緩沖液沖洗濾膜。
3.
過濾結束後取下濾膜平貼於r2a瓊脂培養基平板上，32℃倒置培養5天。
4.
菌落計數（平皿上長幾個菌結果就報幾個菌）