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多肽離子交換

發布時間:2022-09-29 12:06:19

離子交換層析與疏水層析有何區別

離子交換層析是利用蛋白質在不同PH帶不同種電荷的方法,利用離子交換的方法分離蛋白的。離子交換內的介質一般是樹脂,陽離子交換型的,使用前樹脂先用鹼處理成鈉型,將氨基酸混合液(pH=2-3)上柱,pH=2-3時,氨基酸主要以陽離子形式存在,與樹脂上的鈉離子發生交換而被「掛」在樹脂上,再用洗脫劑洗脫。不同的氨基酸(帶的電荷不同)與樹脂的親和力不同,要將其分離洗脫下來,需要降低它們之間的親和力,方法是逐步提高洗脫劑的pH和鹽濃度,這樣各種氨基酸將以不同的速度被洗脫下來,反之亦然。不同反荷離子與樹脂親和力是不同的,其強弱關系為陽性競爭離子:Ag+〉CS+〉K+〉NH4+〉Na+〉H+〉Li+陰性競爭離子:I->NO3->(PO4)3->CN-〉HSO3-〉Mg2+〉HCO3-〉HCOO-〉CH3COO-〉OH-〉F-如果某種離子溶液洗脫效果不好,可用另一種親和力強的離子代替之,等電點>7選擇陽離子交換樹脂,等電點<7選擇陰離子交換樹脂。

② 多肽和寡肽的區別

1、營養價值不同

多肽:牛乳中的酪蛋白具有較強的抗變異能力,能減少癌變。。

其次,乳中必需氨基酸的量與人類所需的最適氨基酸量關系十分密切。因此,乳蛋白質最好的應用可作為植物性蛋白質的補充,從而發揮其富含必需氨基酸的優點,強化混合食品的營養價值。

寡肽:乳清中富含半胱氨酸和蛋氨酸,它們能維持人體內抗氧化劑的水平。

其次,乳清蛋白中脂肪、乳糖含量低,但它含有β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、免疫球蛋白,還有其他多種活性成分。正是這些活性成分使乳清蛋白具備了有益於人體的諸多保健功能。

2、形成途徑不同

多肽:乳中蛋白質的形成主要是經兩個途經,一個途徑是由血清蛋白轉移而來。另一途徑是由乳腺上皮細胞從血清中吸收的氨基酸和葡萄糖轉化的氨基酸合成而來。

寡肽:美國早在1990年採用離子交換法從乳清中分離乳清蛋白。

生物選擇吸附、親和色譜提純法及反相膠束萃取法等都是開發的新的分離乳清蛋白成分的方法。

3、生理功能不同

多肽:調節機體免疫功能、抗氧化作用、調節鐵離子的吸收。

寡肽:延緩或者構築肌肉、延緩疲勞的產生、保護免疫細胞功能。

參考資料來源:網路-寡肽

網路-多肽

③ 離子交換層析的原理是什麼 已解決

離子交換層析法是從復雜的混合物中,分離性質相似大分子的方法之一,依據的原理是物內質的酸鹼性容,極性,所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質,對管柱上的離子交換劑有不同的親和力,改變沖洗液的離子強度和pH值,物質就能依次從層析柱中分離出來。

層析開始前,功能基團與反離子穩定結合,就與反離子發生可逆交換,與層析劑結合被固定下來。因為鹽離子可以與底物競爭功能基團,鹽濃度越高樣品與層析劑結合越不緊密,易被洗脫下來。不同物質與層析劑結合程度不同,洗脫下來的時間不同,因此得以分開。

(3)多肽離子交換擴展閱讀

離子交換劑的選擇首重保持欲分離物質的生物活性,以及在不同pH值環境中,此物質所帶的電荷和電性強弱,陰陽離子交換劑的選擇若被分離物質帶正電荷,這些鹼性蛋白質,它們在酸性溶液中較穩定,親和力強,故採用陽離子交換劑。

在鹼性溶液中較穩定,則使用陰離子交換劑,如果欲分離的物質是兩性離子,一般考慮在它穩定的pH范圍帶有何種電荷,作為交換劑的選擇。離子交換劑的再生與保存離子交換劑可在柱上再生,若有脂溶性物質則可用非離子型去污劑洗柱後再生,也可用乙醇洗滌。

④ 多肽純化的方法有哪些

對多肽純化常用的方法包括:鹽析法、超濾法、凝膠過濾法、等電點沉專淀法、離子交換層析、屬親和層析、吸附層析、逆流分溶、酶解法等。這些方法常常組合到一起對特定的物質進行分離純化,同時上述這些方法也是多肽類物質分析中常用的手段。

⑤ 多肽在強酸性離子交換柱上的遷移速度取決於什麼

這和該肽鏈的pI值有關吧,還有它的極性。具體原理和單個氨基酸在強酸性離子交換柱上的遷移是一樣的

⑥ 離子交換層析可用於哪些種類蛋白質的分離

離子交換層析是利用蛋白質在不同PH帶不同種電荷的方法,利用離子交換的方法分離專蛋白的。
離子交換屬內的介質一般是樹脂,陽離子交換型的,使用前樹脂先用鹼處理成鈉型,將氨基酸混合液(pH=2-3)上柱,pH=2-3時,氨基酸主要以陽離子形式存在,與樹脂上的鈉離子發生交換而被「掛」在樹脂上,再用洗脫劑洗脫。不同的氨基酸(帶的電荷不同)與樹脂的親和力不同,要將其分離洗脫下來,需要降低它們之間的親和力,方法是逐步提高洗脫劑的pH和鹽濃度,這樣各種氨基酸將以不同的速度被洗脫下來,反之亦然。

不同反荷離子與樹脂親和力是不同的,其強弱關系為陽性競爭離子:Ag+〉CS+〉K+〉NH4+〉Na+〉H+〉Li+ 陰性競爭離子:I->NO3->(PO4)3->CN-〉HSO3-〉Mg2+〉HCO3-〉HCOO-〉CH3COO-〉OH-〉F- 如果某種離子溶液洗脫效果不好,可用另一種親和力強的離子代替之,等電點>7選擇陽離子交換樹脂,等電點<7選擇陰離子交換樹脂。

⑦ 怎麼除掉多肽中TFA鹽或將其轉換成醋酸鹽

多肽轉鹽或者除鹽一般建議選擇離子交換填料進行,對於填料選擇需要有針對性,一般填料會對多肽進行吸附,經常在轉鹽的過程中遇到多肽洗不下來的情況。因此一般會選取經過改性離子色譜進行轉鹽。針對不同多肽,轉鹽有兩種情況,一種是過柱直接交換離子達到轉鹽目的,一種是多肽掛柱,經過相關鹽溶液過柱轉鹽後再使用相應溶媒將多肽洗滌下來已達到轉鹽的目的。

⑧ 您好,請問一下可以用離子交換樹脂來對蛋白水解液脫鹽嗎,蛋白水解液主要含鈉離子,氯離子,多肽。

離子交換樹脂可抄以很輕松去除掉水解液中的鹽,Na離子也是非常好脫除,使用H型交換;Cl離子可使用陰離子樹脂OH型交換。

使用離交樹脂對於多肽確實有一定的去除,尤其是強酸和強鹼樹脂;

多肽的脫除一般是在一定PH值范圍內,這取決於氨基酸的等電點,大部分氨基酸在強酸環境下是很容易被幹掉的。

⑨ 離子交換層析為什麼在低離子強度下進行

離子交換層析是根據蛋白質所帶電荷的差異進行分離純化的一種方法。蛋白質的帶電性是版由蛋白質多肽中帶電權氨基酸決定的。由於蛋白質中氨基酸的電性又取決於介質中的pH,所以蛋白質的帶電性也就依賴於介質的pH。當pH較低時,負電基團被中和,而正電基團就很多; 在pH較高時,蛋白質的電性與低pH時相反。當蛋白質所處的pH,使蛋白質的正負電荷相等,此時的pH稱為等電點。離子交換層析所用的交換劑是經酯化、氧化等化學反應引入陽性或陰性離子基團製成的,可與帶相反電荷的蛋白質進行交換吸附。帶有陽離子基團的交換劑可置換吸附帶負電荷的物質,稱為陰離子交換劑,如DEAE-纖維素樹脂;反之稱為陽離子交換劑,如CM-纖維素樹脂。不同的蛋白質有不同的等電點,在一定的條件下解離後所帶的電荷種類和電荷量都不同,因而可與不同的離子交換劑以不同的親和力相互交換吸附。當緩沖液中的離子基團與結合在離子交換劑上的蛋白質相競爭時,親和力小的蛋白質分子首先被解吸附而洗脫,而親和力大的蛋白質則後被解吸附和洗脫。因此,可通過增加緩沖液的離子強度和/或改變酸鹼度,便可改變蛋白質的吸附狀況,使不同親和力的蛋白質得以分離。

⑩ 請教關於離子交換樹脂的使用

一、離子交換樹脂的預處理:

離子交換樹脂在使用之前,為了防止樹脂內含有雜質,對水版質造成權污染,需要對樹脂進行預處理,以下是預處理的步驟:

1.首先使用熱水對樹脂進行清洗,陽樹脂可以使用70-80℃的熱水清洗,陰樹脂的耐熱性較差,一般使用50-60℃的熱水,每隔15分鍾左右需要更換熱水,4-5次之後可以每隔30分鍾左右更換熱水,總共需要7-8次左右,直至出水清澈為止。

2.使用濃度為5%的氯化氫浸泡樹脂,大概浸泡4-8小時左右,然後將水排放,對樹脂進行清洗,直至出水為中性為止。

3.再使用濃度為2-4%的氫氧化鈉浸泡樹脂,浸泡時間與上一步相同,然後將水排放,對樹脂進行清洗,直至出水為中性為止。如此重復2~3次,每次用量為樹脂體積的2倍。

4.陽樹脂最後一次浸泡需要使用濃度為5%的氯化氫,用量加倍效果更好。放盡酸液,用清水淋洗至中性即可。

5.陰樹脂最後一次浸泡需要使用4~5%的NaOH溶液,用量加倍效果更好。放盡鹼液,用清水淋洗至中性即可。

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